—腺苷甲硫氨酸对甲苯磺酸硫酸盐制备工艺研究

摘要

S-腺苷甲硫氨酸（SAMe）是甲硫氨酸和三磷酸腺苷相结合的产物，广泛存在于动植物和微生物体内，参与40多种生化反应，主要作为三种代谢途径（转甲基、转硫基、转氨丙基）的前体。S-腺苷-L-蛋氨酸（SAMe）是目前效果最显著、功能最完善、适用面最广泛的一种新型药物。它既可作为疾病治疗药物，又可作为食品营养强化剂物质，是甲硫氨基酸－蛋氨酸的天然代谢产物，协助人体内重要功能的正常运行，是无毒、抗衰老的健康产物，具有治疗各种高发难治疾病（关节炎、抑郁症、肝病等）的功能。SAMe制备方法主要有化学合成法、酶促转化法和微生物发酵法。本文利用酵母菌发酵富集S-腺苷甲硫氨酸，并对其进行分离纯化，最终以对甲苯磺酸硫酸盐形式成盐。

关键词　S-腺苷甲硫氨酸、酵母菌、发酵、HPLC、S-腺苷甲硫氨酸对甲苯磺酸硫酸盐

目录

摘要……………………………………………………………………I

第1章文献综述………………………………………………………1

1.1S-腺苷-L-蛋氨酸理化性质与代谢途径…………………………………1

1.1.1理化性质……………………………………………………………1

1.1.2代谢途径……………………………………………………………1

1.2S-腺苷-L-蛋氨酸的临床应用…………………………………………2

1.2.1保护肝脏……………………………………………………………2

1.2.2改善关节炎………………………………………………………2

1.2.3改善情绪……………………………………………………………2

1.2.4改善睡眠……………………………………………………………3

1.3S-腺苷-L-蛋氨酸的制备方法…………………………………………3

1.3.1化学合成法…………………………………………………………3

1.3.2酶促转化法…………………………………………………………3

1.3.3微生物发酵法………………………………………………………3

第2章实验器材与检测方法……………………………………………4

2.1实验器材…………………………………………………………………4

2.2检测方法…………………………………………………………………4

2.2.1种子液、发酵液OD测定………………………………………………………4

2.2.2发酵液中葡萄糖浓度的测定………………………………………4

2.2.3发酵液SAMe+含量测定……………………………………………5

2.2.4破胞液、纳滤液、浓缩液等中SAMe+含量测定……………………5

2.2.5成品HPLC分析……………………………………………………6

2.2.6离子色谱测定浓缩液中硫酸根含量…………………………………6

2.2.7水分分析…………………………………………………………7

第3章实验部分………………………………………………………8

3.1工艺流程…………………………………………………………………8

3.2工艺过程…………………………………………………………………8

3.2.1摇瓶种子的制备……………………………………………………8

3.2.2一级种子液的制备…………………………………………………8

3.2.3二级种子液的制备…………………………………………………9

3.2.4发酵液的制备……………………………………………………………9

3.2.5破胞液的制备………………………………………………………10

3.2.6离子交换……………………………………………………………10

3.2.7脱色………………………………………………………………10

3.2.8纳滤浓缩……………………………………………………………10

3.2.9喷雾干燥……………………………………………………………10

3.2.10真空干燥……………………………………………………………11

第4章实验数据……………………………………………………………13

4.1发酵液检测数据…………………………………………………………13

4.2破胞液HPLC图谱…………………………………………………………13

4.3浓缩液HPLC图谱…………………………………………………………14

4.4喷雾前料液HPLC图谱……………………………………………………14

4.5成品HPLC图谱………………………………………………………………14

4.6离子色谱检测硫酸根图谱………………………………………………15

第5章结果与讨论…………………………………………………16

参考文献……………………………………………………………17

致谢…………………………………………………………………18