半枝莲抗肿瘤作用研究进展(二)

实体瘤的生长及转移具有血管依赖性，抑制血管生成可能成为治愈肿瘤的新途径。绝大多数恶性实体瘤的生长和转移是血管依赖的，即肿瘤组织在其生长过程中会诱导新的血管的生成，以提供肿瘤生长所需的营养和氧气，同时通过血管向其他组织输送转移细胞，并在机体的其他部位继续生长和诱导血管生成，导致肿瘤转移。这个在肿瘤生长过程中被诱发的血管生成现象，称之为肿瘤新生血管生成。李丹丹[8]采用 Transwell 小室共培养、ELISA、转染荧光素酶报告基因等方法，从细胞、分子水平综合研究了半枝莲抑制肿瘤血管生成的作用及其机制。结论表明，半枝莲在体内外均有抗血管生成作用，其机制可能通过一方面抑制肿瘤细胞缺氧诱导因子（HIF-1）的表达，另一方面抑制内皮细胞迁移，从而阻断肿瘤血管生成。

徐敏等[9]将半枝莲提取出的黄酮类化合物A06作用于 HUvEC及肿瘤细胞中，观察半枝莲黄酮类化合物A06对内皮细胞迁移、形成小管样结构的影响，研究结果表明， 半枝莲黄酮类化合物A06能抑制内皮细胞小管样结构形成和肿瘤细胞条件培养液刺激下的内皮细胞迁移， 实验表明其作用机制可能与A06能抑制肿瘤细胞分泌 VEGF 和 NO 这些血管生成促因子有关。

王翊豪等[10]通过酶联免疫法测血清中TNF-α、VEGF含量，结果显示，半枝莲多糖辅助环磷酰胺CTX能上调TNF-α产生更好的肿瘤杀伤效果，通过下调VEGF能抑制肿瘤血管的生成。

（三）诱导肿瘤细胞凋亡作用

张智岩等m[11]采用MTT比色法、流式细胞术等检测半枝莲含药血清对H22肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响，结果显示半枝莲含药血清能有效诱导肿瘤细胞凋亡，并认为其机制可能与降低肿瘤细胞线粒体膜电位有关。半枝莲还可阻滞人大肠癌HT-29细胞周期中S期向G2/M期的转变过程，从而抑制人大肠癌细胞增殖，诱导HT-29细胞凋亡。

陈明等[12]探讨半枝莲对宫颈癌 Hela 细胞内游离钙浓度的影响及其抗癌作用机理，结果显示，半枝莲可通过促进细胞内储存钙的释放和胞外钙离子的内流，显著提高细胞内游离钙的浓度，推测半枝莲可能通过提高 Hela细胞内基础钙的水平达到诱导癌细胞凋亡。

刘钢[13]发现半枝莲的乙醇提取物可诱导人慢性髓系白血病K562细胞株凋亡，他的实验首先采用MTT法检测半枝莲乙醇提取物对K562细胞的增殖抑制作用。

（四）抗突变作用

半枝莲可显著抑制黄曲霉毒素（AFBT）、二氢二醇环氧苯并芘（BPDE）以及苯并（a）芘（BaP7）、（8- DHD）与 DNA 结合，使 AFBT- DNA复合物生成减少，减少BaP7、8- DHD的脂溶性代谢产物，增加BaP7、8- DHD和BPDE水溶性结合产物的形成，且水溶性结合物中硫酸盐和谷胱甘肽含量增加，葡萄糖醛酸化物减少，表明半枝莲可通过某种清除机制发挥抗突变作用。

张春玲等[14]的研究表明，半枝莲的水溶性提取物可以对抗NNK(NNK是一种致癌性很强的亚硝胺类物质(为诱发人类肿瘤的主要因素之一)的致突变作用，使实验菌株回复突变数减少，而且随着各受试药物的浓度升高，其拮抗作用增强，表明半枝莲中含有抗突变物。半枝莲水提物的抗突变作用，可显著抑制黄曲霉素B2等诱变的突变菌落数，使与 DNA 生成的复合物减少。

田新宇等[15]通过人外周血淋巴细胞的非程序DNA合成试验 (UDS试验)发现浓度为125g/L的半枝莲提取物有一定的抗香烟焦油的致突变作用，能够保护淋巴细胞DNA。

（五）下调端粒酶活性

端粒酶是肿瘤的特异标志物，在分化了的正常体细胞中检测不到端粒酶，但是绝大多数肿瘤细胞端粒酶则重新激活并高表达，并可使细胞永生化，目前，抑制端粒酶活性已成为抗肿瘤治疗的新热点。牟卫伟等[16]综述14份国外研究资料， 恶性肿瘤端粒酶阳性率达88%，而周围正常组织和非癌组织端粒酶阳性率达12.1%和 4.2%。石梦莹等[17]采用流式细胞仪检测半枝莲含药血清对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞端粒酶表达的影响，并与DDP进行参照，结果表明，正常血清组端粒酶表达率最高，而DDP组和半枝莲含药血清组均有不同程度的下降，下降幅度最大的是含药血清和DDP共用组. 这说明半枝莲含药血清对PG细胞端粒酶活性的表达有下调作用，与DDP合用，可以增强DDP的下调作用。

（六）增强机体免疫力作用

半枝莲多糖可促进刀豆素 A（ConA）诱导的小鼠淋巴细胞增生，50、100、200mg/kg 半枝莲多糖皮下注射1周，可明显提高小鼠外周淋巴细胞中脂酶阳性细胞的百分率，促进二硝基氯苯（DNCB）诱导的迟发型变态反应。表明该药对机体的细胞免疫有促进作用，但大剂量注射（200mg/kg）可抑制小鼠胸腺指数，对脾指数无影响，故中、小剂量半枝莲多糖能增强细胞免疫力。

莫宗成等[18]用 MTT法测定了半枝莲醇提取对小鼠脾细胞的增生活性，结果提示其对小鼠脾细胞的增生具有促进作用，表明半枝莲有可能通过增强机体免疫力来实现其抗肿瘤作用。张秀娟等观察半枝莲多糖对小鼠体内肿瘤细胞生长和免疫器官胸腺、脾的影响；通过 ANAE 法观察半支莲多糖对 T 细胞阳性率的影响. 结果发现，半枝莲多糖有抗肿瘤作用和免疫增强作用。莫宗成等[19]研究发现半枝莲多糖能明显促进脾淋巴细胞增殖和脾细胞分泌 IL-2 和 TNF-α 等肿瘤抑制因子，推测半枝莲多糖可能是通过增强机体免疫功能达到治疗肿瘤的功效,观察半枝莲提取物在体内的抑瘤效果及作用靶点，结果发现，半枝莲提取物剂量依赖性地抑制肿瘤的生长，同时在一定程度上提高了机体的免疫力。

（七）抗氧化，抗自由基作用