复方制剂中钩藤生物碱的含量检测研究-开题报告

一、文献综述

钩藤为钩藤属茜草科植物Ｕｎｃａｒｉａ　ｒｈｙｎｃｈｏｐｈｙｌｌａ大叶钩藤(U.macrophyllaWal.l )、华钩藤[U. sinensis(Oliv. )Havi.l ]、毛钩藤(U. hirsutaHavi.l )、无柄果钩藤(U. sessilifructusRoxb. )。钩藤属植物品种较多，为多源中药材，全世界约70 种，我国有14 种，在广西、广东、云南、四川、贵州、湖北、湖南、海南、西藏等地均有分布。钩藤的带钩茎枝入药，性凉、味苦甘，具有清泄肝火、平肝息风、定惊的功效，现代医学研究证明钩藤对治疗头痛头晕、感冒夹惊、惊痫抽搐、妊娠子痫以及高血压、高血脂等心脑血管疾病有显著疗效。现已经从钩藤中已分离出３０多种化合物，主要有钩藤碱(Rhynchophylline)、异钩藤碱(Isorhynchophylline)、 去 氢 钩 藤 碱(Corynoxeine)(异名柯诺辛因碱)、异去氢钩藤碱(Isocorynoxeine)(异名异柯诺辛因碱)。其中钩藤碱与异钩藤碱、去氢钩藤碱与异去氢钩藤碱分别为同分立体异构体。这些生物碱均为吲哚型生物碱。钩藤是许多用于心血管和中枢神经系统疾病的中药复方制剂的主要成分。钩藤碱（ｒｈｙｎｃｈｏｐｈｙｌｌｉｎｅ）是钩藤的主要生物碱之一，主要作用于心血管系统和中枢神经系统，具有降低血压、扩张血管、减慢心率和抑制心肌收缩力等效应。检测钩藤碱含量可作为衡量含钩藤中药复方制剂的质量标准之一。近年来国内外已有不少有关含钩藤中药复方制剂中医临床上多配伍应用,天麻钩藤颗粒、复方钩藤片、脉君安片等均为市场上销售良好的钩藤配伍制剂,它们的质量标准中均无钩藤定量分析项目。关于HPLC法测定复方制剂中钩藤生物碱含量测定法的报道较少，多涉及测定钩藤碱或异钩藤碱的单一成分。为全面有效控制药品的内在质量,有必要对钩藤总碱及4种生物碱成分进行含量测定。虽然关于同时测定钩藤碱和异钩藤碱含量的方法已见多篇报道，但是对于钩藤碱和异钩藤碱与钩藤中的其他成分，特别是去氢钩藤碱和异去氢钩藤碱的分离却未见报道。

综合国内外相关文献进行综合分析测定钩藤总生物碱提取物中钩藤总生物碱采用紫外分光光度法测定了钩藤总生物碱提取物中的钩藤总生物碱含量，四种钩藤生物碱用高效液相色谱、薄层色谱等方法。中药复方制剂中钩藤碱的含量检测方法研究虽然取得了一定的成果，但随着科技发展和对药品质量控制要求的。

二、范文提纲

1 钩藤总碱的紫外检测。

1.1 钩藤总碱分光光度法测定钩藤总生物碱提取物中钩藤总生物碱含量。①仪器

与试药：紫外分光光度计；钩藤碱对照品：纯度＞99%。对照品溶液的配制：精密称取对照品适量，加2%盐酸溶液制成含钩藤碱100 μg/mL的溶液，100ml作为对照品溶液。②标准曲线的绘制：精密吸取对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL 分别置于 50 mL 量瓶中，用2%盐酸溶液稀释至刻度。以相应的溶剂为空白，根据分光光度法(《中国药典》 2010 年版一部附录 VC)试验，在 250 nm 波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。③供试品溶液的制备与测定：取本品25 mg，置于50 mL量瓶中，加2%盐酸溶解并稀释至刻度。精密吸取 2 mL，供试品吸收度，由标准曲线计算含量。

2 钩藤四种生物碱含量的测定

2.1 岛津２０－ＡＴ双泵高效液相色谱仪。流动相A:10mM磷酸盐缓冲液   PH6.6  B：甲醇：乙腈（1；1） 梯度洗脱 1-15min  A:B   55:45     15min -结束   A:B    30:70   波长245nm  流速 1.0ml/min  柱温30℃  进样量10ul。可以用HPLC一次性检测四种钩藤生物碱。

3 药复方制剂中钩藤碱含量测定的不同方法进行综述，为其进一步简化检测手

段、提高灵敏度和开发利用提供参考。

三、参考文献

 国家药典委员会．中华人民共和国药典一部［Ｍ］．北京：中国医药科技出版社，２０１０：２４０．

 仲崇林，赵为民，杨美林，等．反相高效液相色谱法测定植物钩藤中钩藤碱的含量［Ｊ］．应用化学，２００６，２３（９）：１０６１－１０６２．

 王英锋，魏璐雪，王保中．高效液相色谱法测定钩藤中钩藤碱、异钩藤碱含量［Ｊ］．药物分析杂志，１９９９，１９（１）：５６－５７．

 汪 冰，袁 丹，马 斌，等．钩藤叶化学成分的研究［Ｊ］．中国药物化学杂志，２００６，１６（６）：３６９－３７２．

王捷，刘宗河，龙禹，等．高效液相色谱法测定安神养血口服液中钩藤碱和异钩藤碱含量［Ｊ］．中药材，２００９，３２（７）：１１３４－１１３７．

王捷，龙禹，焦爱军，等．ＨＰＬＣ测定安神养血口服液中３种生物碱延胡索乙素、钩藤碱和异钩藤碱含量［Ｊ］．中成药，２０１０，３２（２）：２３１－２３５．

李德潮．反相高效液相色谱法测定安神养血口服液中钩藤碱含量［Ｊ］．中国药业，２００９，１８（１４）：４２－４３．

彭国庆，曹岳华．高效液相色谱法测定新乐康片中钩藤碱的含量［

    Ｊ］．中南药学，２０１０，８（４）：２７４－２７６．

蒋永和，袁继承，李卓亚，等．ＨＰＬＣ法测定小儿七星茶口服液有效成分的含量［Ｊ］．安徽医药，２００９，１３（１１）：１３３７－１３３９．

李亚萍，雷晓林，庄义修，等．高效液相色谱法测定小儿七星茶 冲 剂 中 钩 藤 碱 含 量 ［Ｊ］．中 国 医 院 药 学 杂 志，２００７，２７（１２）：１７８３－１７８４．

张荣,刘睿,刘启德,等.钩藤中钩藤碱、异钩藤碱的提取与含量测定.中药                   新药与临床药理,2009,20(4):338-341ZHANG Rong,LIU Rui,LIU Qi-de,et  al.Extraction anddetermination of rhynchophylline,isorhynchophylline  inUncaria.Traditional Chinese Drug Research and Clinical  Pharmacology,2009,20(4):338-341

王英锋,魏璐雪,王保中.高效液相色谱法测定钩藤中钩藤碱、异钩藤碱含量[J].药物分析杂志,1999,19(1):56-57.

李维锋,姜建国,王定勇,等.大叶钩藤总生物碱提取溶剂的研究及钩藤碱的纯度测定[J].食品科技,2007,8:157-158.

[14] 蒋海强,窦月,周洪雷.钩藤总生物碱有效部位质量控制研究[J].山东中医药大学学报,

辛文波，侴桂新，王峥涛 . 钩藤生物碱类成分研究

  ［J］. 中草药，2009，40( 2) : 204-207.

邓美彩，焦威，董玮玮，等 . 钩藤化学成分的研究［J］.天然产物研究与开发，2009，21( 2) : 242-245.

仲耘，冯瑞芝 . 钩藤及其同属植物生物碱含量的紫外分光、HPLC 测定［J］. 中草药，1993，24( 9) : 462-466.

张荣，刘睿，刘启德，等 . 钩藤中钩藤碱、异钩藤碱的

提取与含量测定［J］. 中药新药与临床药理，2009，20( 4) : 338-341.