山楂中总黄酮的含量测定_开题报告

山楂中总黄酮含量测定的研究概述

【摘要】目的：建立山楂中总黄酮含量的有效测定方法。

【关键词】山楂 黄酮类化合物 含量测定

山楂 为 蔷 薇 科 植 物 ( Rosaceae ) 山 楂 ( Crataegus pinnatifida Bge.)或 山 里 红 ( Crataegus pinnatif ida Bg e. var. major N. E. Br.)的干燥成熟果实[1] ,药食兼用。主产于我国北方，是一种常用中药，研究发现 ,临床上用于消食化滞，活血化瘀，近年来，更广泛用于治疗心血管疾病和抗癌消炎，引起了国内外学者的关注，通过化学、临床和药理等方面的研究，发现其主要化学成分为黄酮类及黄酮甙类，有降压、增加冠脉血流量、降低血脂、耐缺氧、强心等作用 [2, 3]，并有山楂类制剂上市。 黄酮类化合物是山楂发挥有效作用的最主要成分 ,是一类具有 C6-C3-C6基本母核的天然有色 产物 ,广泛存在于中药、天然产物和食物 (蔬菜和水果 )中 [4] 。近年来 ,黄酮类化合物以其天然的生物 活性正逐渐应用于食品、医药和保健方面 ,已成为当前研究的热点。本文对近年来山楂中黄酮类化合物含量测定方法的研究作一概述。

1、紫外分光光度法

分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸光度或发光强度,对该物质进行定性和定量分析的方法。对于植物提取物中总黄酮含量的测定  ,一般采用传统的紫外分光光度法 (或者称为化学比色法 ) [5] ,该方法是药典中测定总黄酮的常用方法 ,操作简单方便、稳定性好、精密度高、准确可靠 ,可用于山楂的检验和质量控制。

陈克克、强毅[6]等人在陕西山楂中总黄酮含量测定研究中，采用该方法，以芦丁为标准品 , 510nm测定吸光度，绘制芦丁校准曲线，做了精密度实验，稳定性实验，重复性实验，加标回收率，样品含量测定，实验结果所得校准曲线线性关系良好 ,实验精密度、稳定 性和重复性均良好 ,平均加标回收率为 104. 3%，且成功首次测定了陕西山楂中的总黄酮含量。

张文莉等[7]采用NaNO2- Al(NO3)3-NaOH和AlCl3两种显色系统，以芦丁为对照品， 采用紫外-可见分光光度法测定山楂叶提取物中总黄酮的含量。结果：NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色法（510nm）测 定含量为86.15%，AlCl3显色法（272nm）测定含量为35.19%， 两种方法所得测定结果相差较大，但对于何种方法更适合 用于山楂叶提取物中总黄酮的测定还有待进一步研究。 杨少冉等[8]用紫外-可见分光光度法测定了不同采收期承德产山楂叶中总黄酮的含量，进行动态分析，结果以6月份所含总黄酮含量最高。

2、三波长分光光度法

在双波长测定方式中，一般是寻找干扰成分的等吸光点，从而使整个吸收光谱上下平移来消除干扰成分的影响，但往往会碰到干扰成分的吸收光 谱没有吸收峰，因而找不到合适的等吸光点的情况，此时用双波长法必然会影响测定的准确度。三波长分光光度法除了能将吸收光谱上下平移，也能校正它的倾斜度，因而，当在干扰成分的吸收光谱上找不到等吸光点时，应用三波长测定法更加准确[9-10]。张兰杰等[11]以λ1=463nm、λ2=417nm、λ3=382nm的三波长分光光度法测定山楂叶、果总黄酮的含量，有效地消除了吸收峰不对称给黄酮定量分析造成的 影响，并校正了干扰组分的吸收光谱产生的基线倾斜，提高了定量分析的准确度。

3、高效液相色谱法

高效液相色谱（HPLC）是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检 测，从而实现对试样的分析。因具有操作简便、快速、准确、可靠、重现性好和专属性强等特点，HPLC法已广泛应用于 山楂叶黄酮类成分的含量测定。

4、其他

此外微乳液相色谱法、超高效液相色谱法以及一测多评法在该领域也有运用。

微乳液相色谱（MEIC）应用较多的是水包油型反相MEIC，其分离机制是溶质在固定相、伪 固定相（表面活性剂在固定相的吸附层）、多相分散相（微 乳液滴）、水相进行的动态吸附解析过程。由于分离过程的复杂性，可控参数较多，使得具有不同极性的组分在等度洗脱下，在短时间内达到有效分离。李宁等[12]以SDS-正辛 醇-正丁醇和Brij35-正辛醇-正丁醇微乳体系为流动相，选择Venusil ASB C18色谱柱对山楂叶提取物进行分离，稳定、快速地测定出了山楂叶提取物中牡荆素鼠李糖苷、芦丁、牡荆素、金丝桃苷4种黄酮类成分的含量。

超高效液相色谱（UPLC）借助 于HPLC的理论及原理，涵盖了小颗粒填料、非常低系统 体积及快速检测手段等全新技术，增加了分析的通量、灵 敏度及色谱峰容量。

一测多评是指利用中药有效成分内在的函数关系和比例关系，只测定一个成分（对照品可得到者） 实现多个成分（对照品难以得到或难供应）的同步测定。一 测多评法经济、方便、高效，既能解决中药对照品匮乏的 问题，又能实现中药及其制剂的多组分定量。

小结：通过查阅文献，山楂中总黄酮类化合物定性以及定量的测定方法多种多样，且每种方法都有不同的人员做相关的研究，其中比较多见的有比色法和高效液相色谱法，超高液相色谱法等在该领域也有运用。

参考文献

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[11]张兰杰,辛广,陈华，等.三波长-分光光度法测定山楂叶、果总黄酮的含量[J].食品与生物技术学报,2009,28（4）：483-486.

[12]李宁,黄光亮,李玉兰,等.微乳液相色谱法同时测定山楂叶 提取物中4种黄酮成分[J].分析化学,2009,37（12）：1791-1794.