反相高效液相色谱法测定重组甘精胰岛素注射液中间甲酚的含量开题报告

重组甘精胰岛素注射液在市场上主要有两个品种，一个是甘李药业生产的长秀霖，另一种是赛诺菲-安万特公司（sanofi-aventis）的来得时（Lantus）。目前国内还有很多企业在进行该品种的研发和注册申报工作。

重组甘精胰岛素为大肠杆菌重组技术生产的由53氨基酸残基组成的蛋白质。为降血糖药,分子式: C267H404N72O78S6，分子量 6063，为白色或类白色粉末。

它是在人胰岛素B链羧基末端增加了两个精氨酸，同时也把A链羧基末端A21位置的天冬酰胺替换成甘氨酸，见图1：重组甘精胰岛素原料药的一级结构图。

重组甘精胰岛素注射液为无菌水溶液，本次试验的产品规格为3ml：300单位（10.92mg），即含重组甘精胰岛素（C267H404N72O78S6）的标识量为10.92mg。除重组甘精胰岛素外，注射液中还含有甘油、氧化锌、盐酸、氢氧化钠、间甲酚等物质，。溶液的pH值为3.5～4.5。产品的贮藏条件为2～8℃避光冷藏，不能冰冻。

重组甘精胰岛素注射液皮下注射后，因酸性溶液被中和而形成的微小沉淀可持续缓慢释放重组甘精胰岛素，继之吸收入血也慢，从而产生长达24小时平稳无峰值的可预见的血药浓度。

图1：重组甘精胰岛素原料药的一级结构图

在重组甘精胰岛素注射液中加入间甲酚的目的是作为抑菌剂，每ml约含2.70mg。间甲酚在注射液中起抑菌作用，但是其含量需要控制，否则会对人体产生不良影响。目前一般采用反相高效液相色谱法测定其含量。反相高效液相色谱法现在已被广泛应用到药品的质量控制和质量分析中，是药品研发和质量分析的重要仪器和手段。

在进行间甲酚含量检测前，需要对检测的方法进行验证，证明拟采用的分析方法适合于项目检测的要求。通常需要进行验证的指标包括：准确度、精密度（包括重复性、中间精密度和重现性）、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。在分析方法验证中需采用标准物质进行方法学的验证工作。根据重组甘精胰岛素注射液以及间甲酚的特性，决定在方法学验证中对以下项目进行验证：

1.专属性

专属性系指在其他成分(如杂质、降解产物、辅料等）存在下，采用的分析方法能正确测定被测物的能力。鉴别反应、杂质检查和含量测定方法，均应考察其专属性。如方法专属性不强，应采用多种不同原理的方法予以补充。

2.准确度与重复性

准确度系指采用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率（％ )表示。准确度应在规定的范围内测定。

重复性是指由同一分析人员在规定的条件下，同一份均匀供试品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。精密度一般用偏差、标准偏差或相对标准偏差表示。

3.中间精密度

考察随机变动因素如不同日期、不同分析人员、不同仪器对精密度的影响，应设计方案进行中间精密度试验。

4.线性与范围

线性系指在设计的范围内，测定响应值与试样中被测物浓度呈比例关系的程度。范围系指分析方法能达到一定精密度、准确度和线性要求时的高低限浓度或量的K 间。

5.耐用性

耐用性系指在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度，为所建立的方法用于日常检验提供依据。

6.定量限

定量限系指试样中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果应符合准确度和精密度要求。对微量或痕量药物分析、定量测定药物杂质和降解产物时，应确定方法的定量限。

二、^范文提纲

摘要：

关键词：

正文

1实验准备

 1.1仪器与设备

 1.2试剂与溶液

 1.3供试品溶液

 1.4对照品溶液

2方法学验证

 2.1色谱条件

 2.2专属性 

 2.3准确度与重复性

 2.4中间精密度

 2.5线性与范围

 2.6耐用性

 2.7定量限

3样品测定

4.讨论

三、参考文献

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