（一）方法一：高效液相色谱法
（1）应用范围：本方法采用高效液相色谱法测定葛根芩连片中葛根素的含量。本方法适用于葛根芩连片中葛根素的含量测定。
（2）方法原理：供试品用甲醇回流提取后，过滤，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长250nm处检测葛根素的吸收值，计算出其含量。
试剂：1.甲醇2.二次重蒸水
仪器设备：1高效液相色谱仪
色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；紫外吸收检测器
色谱条件流动相：甲醇+水(23：77)。
检测波长：250nm2.3温度：35℃。
试样制备：（1）对照品溶液的制备精密称取葛根素对照品10mg，置10m1棕色量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置于50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液。（2）供试品溶液的制备甲醇取葛根芩连片20片，精密称定，求得平均片重。研细。精密称取葛根芩连片细粉适量(约相当于葛根0.lg)，置150m1三角烧瓶中，精密加入甲醇100m1，精密称定。水浴加热回流提取1h，放冷至室温，精密称量下准确补加损失的甲醇，摇匀。取少量用0.45mm滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。
（二）方法二：葛根薄层定性鉴别
（1）葛根阳性对照液 称取葛根粉末1.0g加10ml 甲醇，浸泡2h,滤过，滤液浓缩备用。
（2）葛根阴性对照液 按处方比例制成除葛根外的模拟片，研成粉末，取2g，按（1）项制备。
（3）葛根芩连片供试液 取葛根芩连片30片（去糖衣）研成粉末，称取4.0g,加20ml甲醇，浸泡2h，滤过，滤液浓缩备用。
（4）葛根素对照液 取葛根素对照品制成1mg/ml的甲醇液。
操作方法：将四种溶液分离，在相同的硅胶G薄层板上使用毛细管点（规格为10ml×20cm），以氯仿甲醇（8:2）为显影剂，铺展距离为14cm。在紫外线灯（365nm）下观察到斑点。结果如图1所示。样品、阳性对照品溶液和葛根素对照品溶液在同一位置出现相同的彩色荧光斑点。
三、葛根芩连片含量测定的实例
（一）薄层定性鉴别
1.黄芩的薄层定性鉴别
（1）黄芩阳性对照液 称取黄芩粉末1.0g，加乙醇10ml，加热回流 60min，滤过，滤液浓缩备用。
（2）黄芩阴性对照液 按处方比例制成除黄芩外的模拟片研成粉末，称取4.3g，加乙醇50ml，照（1）项制备。
（3）葛根芩连片供试液 取葛根芩连片30片（去糖衣）研成细粉，称取5.3g，照阴性对照液制法制备。
（4）黄芩甙对照液 取黄芩甙对照品制成0.5mg/ml的乙醇液。
操作方法：取上述四种溶液，点于同一块用4% 醋酸钠调成的硅胶G板（用4%醋酸钠水溶液调硅胶G成糊状，铺板，在105℃烘箱2小时活化。以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（10:7:1:1）为展开剂，展开17厘米，在可见光下观察斑点。结果如图2所示。样品、阳性对照液和黄芩甙对照液在同一位置上出现相同的色斑。
2.黄连的薄层定性鉴别
（1）黄连阳性对照液 称取黄连粉末1.0g，加甲醇10ml，水浴加热至沸腾，滤过，滤液浓缩备用。
（2）黄连阴性对照液 按处方比例制成除去黄连外的模拟片，研成粉末，称取4.3g，加甲醇50ml，水浴加热至沸腾，滤过，滤液浓缩备用。
（3）葛根芩连片供试液 取葛根芩连片30片（去糖衣）研成细粉，称取5.3g，照阴性对照液制法制备。
（4）盐酸小檗碱对照液 取盐酸小檗碱对照品制成0.2mg/ml的甲醇液。
操作方法：将上述四种溶液分别置于同一硅胶G板（涂布板，自然干燥后，120℃活化2h），用氯仿-甲醇-氨水（15:4:1）展开，作为显影剂。在紫外光（254 nm）下观察到斑点。结果如图3所示。阳性对照液、盐酸小檗碱对照液和供试品溶液位置相同。
相同颜色的斑点。
3.甘草薄层定性鉴别
（1）甘草阳性对照液 称取甘草粉末1.0g，加乙醚20ml，加热回流90min，冷却，滤过，滤液挥干乙醚，加甲醇10ml 加热，过滤，滤液浓缩备用。
（2）甘草阴性对照液 按处方比例制成除去甘草外的模拟片研成粉末，称取3.5g，照（1）项处理。
（3）葛根芩连片供试液 取葛根芩连片30片（去糖衣）研成细粉，称取4.0g，照（1）项处理。
（4）甘草酸对照液 取甘草酸对照品制成0.2mg/ml的甲醇液。
操作方法：取上述四种溶液，并将其置于同一硅胶G-CMC薄层板上。以苯-氯仿-甲醇（10:10:1）为第一次显影，显影距离为15cm，取出干燥距离，再以苯-氯仿-甲醇（5:5:1）为第二次显影，显影距离为15cm，取出干燥距离，在紫外线灯（365 nm）下观察斑点。结果如图4所示。阳性对照液、甘草酸对照液和供试品溶液在同一位置出现相同色斑。
（二）总黄酮的测量
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