钱洁等【10】为了探索小檗碱对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响以及阐明小檗碱促乳腺癌细胞凋亡的分子机制，采用Annexin-V/PI染色定量考察小檗碱对肿瘤细胞凋亡的影响,运用Western Blot实验检测肿瘤相关通路蛋白表达来进行研究。实验表明小檗碱对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖具有抑制作用,使细胞中自噬因子Beclin 1表达增加,诱导细胞自噬泡的形成,导致肿瘤细胞发生凋亡。结果表明小檗碱是通过抑制AKT-mTOR通路,诱导MDA-MB-231细胞的自噬以及凋亡,从而发挥抗肿瘤作用。
任晖等【11】分别采用人乳腺癌MDA—MB-231，MCF-7细胞株，通过MTT实验，考察小檗碱对乳腺癌细胞增殖的抑制作用，检测小檗碱干预后乳腺癌细胞中葡萄糖消耗及乳酸含量，评价小檗碱对乳腺癌细胞糖酵解的影响；检测乳腺癌细胞中ATP及NAD＋/NADH含量，评价乳腺癌细胞能量供应情况；通过检测己糖激酶Ⅱ活性及蛋白定量，明确小檗碱对乳腺癌细胞己糖激酶的影响。结果：小檗碱对人乳腺癌细胞株MDA—MB-231，MCF-7细胞增殖，具有明显抑制作用，并呈浓度依赖性；小檗碱可以明显降低不同乳腺癌细胞株中葡萄糖消耗及乳酸含量，中高剂量组相较于对照组差异有统计学意义（P〈0．05）；同时相较于对照组，中高剂量组可明显降低细胞ATP含量，升高NAD＋/NADH含量（P〈0．05）；此外小檗碱可以抑制乳腺癌细胞己糖激酶Ⅱ活性及其蛋白含量。研究结果表明小檗碱可以明显抑制乳腺癌细胞增殖，并抑制乳腺癌细胞糖酵解，降低其能量供应，同时明显抑制乳腺癌细胞中己糖激酶Ⅱ的表达。
郭钢等【12】探讨盐酸小檗碱对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及迁移能力的影响。对数生长期人乳腺癌MCF-7细胞株分为对照组(普通培养液)、紫杉醇组(培养液+100mg/L紫杉醇)、观察组(培养液+盐酸小檗碱),采用MTT法检测盐酸小檗碱对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响,依据细胞生长抑制率计算盐酸小檗碱对人乳腺癌MCF-7细胞的半数抑制浓度值,参照IC-(50)值进行后续实验；采用划痕实验检测3组人乳腺癌MCF-7细胞迁移率；采用实时荧光定量PCR法检测3组细胞色素P450 1A1和CYP1B1 mRNA表达水平。结果：盐酸小檗碱对人乳腺癌MCF-7细胞具有明显的增殖抑制作用,其IC-(50)值为(106±17)μmol/L；人乳腺癌MCF-7细胞迁移率在紫杉醇组[(45.50±4.30)%]和观察组[(37.50±3.43)%]均低于对照组[(84.60±6.88)%]，且观察组低于紫杉醇组(P<0.05)；CYP1A1 mRNA表达量在紫杉醇组(247.69±59.67)和观察组(253.70±60.03)均低于对照组(512.31±76.53),且紫杉醇组低于观察组(P<0.05);CYP1B1 mRNA表达量在紫杉醇组(139.09±18.82)和观察组(141.53±19.25)均低于对照组(224.63±33.89)(P<0.05),观察组与紫杉醇组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结果表明盐酸小檗碱具有抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖和迁移的作用,其机制可能与抑制CYP1A1、CYP1B1基因表达有关。
（四）黄连治疗卵巢的研究
糜亚琴【13】收集79例卵巢癌组织标本及8例卵巢囊肿组织标本，运用免疫组织化学染色法检测其中PD-L1和PD-1的表达情况，研究结果显示卵巢癌组织中PD-L1的表达水平与患者的预后差和生存期短有关。
马丽莎【14】利用实时荧光定量PCR检测IC50浓度的小檗碱作用0h、2h、6h后SKOC-3和A2780细胞TDO、AhR mRNA的表达情况实验结果显示小檗碱能显著抑制人卵巢癌细胞SKOV-3、A2780细胞TDO的表达，且抑制活性随着药物作用时间延长而增强；小檗碱能显著抑制存在TDO高表达的SKOV-3细胞AhR mRNA的表达，同时抑制活性随着药物作用时间延长而增强，小檗碱IC50浓度作用于2h、6h，A2780对AhR mRNA不表达。研究结果表明SKOV-3和A2780细胞均存在TDO高表达，小檗碱下调TDOmRNA表达可能通过减少卵巢癌细胞上清色氨酸消耗作用，进而减少犬尿氨酸代谢产生，下调AHR表达。
王婉等【15】探讨小檗碱对人卵巢癌细胞(SKOV3)增殖及凋亡的影响。采用MTT法检测细胞增殖；流式细胞仪Annexin V/PI双染色法和透射电子显微镜检测细胞凋亡情况；甲基化特异性PCR分析h MLH1基因启动子区Cp G岛的甲基化状态；实时荧光定量RT-PCR检测Bcl-2、Bax、Survivin和h MLH1 mRNA基因的表达。结果：小檗碱对卵巢癌SKOV3细胞增殖有明显的抑制作用(P0.05),呈剂量和时间依赖性。当与顺铂联用时,小檗碱对卵巢癌细胞有协同抗癌作用。小檗碱可明显诱导SKOV3细胞凋亡,并下调Bcl-2、Survivin基因及上调Bax基因的表达。此外,小檗碱能恢复h MLH1启动子的甲基化状态及增强h MLH1 mRNA的表达。研究结果表明小檗碱可抑制卵巢癌细胞增殖及诱导细胞凋亡,小檗碱可协同增强抗癌药物顺铂的抗肿瘤作用。
（五）黄连治疗宫颈癌的研究
刘明珠【16】以宫颈癌细胞为主要研究对象,用不同浓度的小檗碱处理后,运用CCK-8方法检测小檗碱对3株宫颈癌细胞的增殖活性的影响,筛选出作用较为明显的一株细胞作为研究对象,通过流式细胞术检测小檗碱对宫颈癌细胞凋亡及细胞周期的影响,用Western blot法检测小檗碱对宫颈癌细胞STAT3、p-STAT3水平的影响,最后通过细胞克隆实验绘制细胞存活曲线,并根据单击多靶模型参数计算放射增敏比,以明确小檗碱对宫颈癌放射敏感性的影响,并对其可能的作用机制进行探讨。研究结果表明小檗碱能够抑制宫颈癌细胞增殖,促进凋亡,阻滞细胞周期,增加宫颈癌细胞的放射敏感性。
李娜等【17】研究不同浓度盐酸小檗碱(Ber)单用及联合应用顺铂(DDP)对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响,并探讨其抗癌机制。将不同浓度的盐酸Ber、DDP分别或联合作用于宫颈癌Hela细胞,采用MTT比色法检测细胞体外增殖的抑制作用;原位末端标记法(TUNEL法)检测细胞凋亡率;免疫组化SABC法检测Hela细胞中NF-κBp65的表达。结果:MTT比色法表明盐酸Ber能抑制宫颈癌Hela细胞的体外增殖,并具有剂量、时间的依赖性(P0.05);TUNEL法可检测到凋亡细胞,其凋亡率显示盐酸Ber诱导宫颈癌Hela细胞凋亡表现出剂量和时间的依赖性(P0.05);免疫组化SABC法结果显示,盐酸Ber能引起细胞内NF-κBp65表达下调,与对照组相比差异有统计学意义(P0.01);盐酸Ber与DDP联合用药表现出明显的协同作用,且高剂量的盐酸Ber可增加DDP的疗效。结果表明盐酸Ber对宫颈癌Hela细胞体外增殖具有明显的抑制作用,且能增强DDP对宫颈癌Hela细胞的抑制作用,并增加其诱导宫颈癌Hela细胞的凋亡,其作用机制可能与降低NF-κBp65的表达有关。
李娜等【18】研究不同浓度盐酸小檗碱对人宫颈癌Hela细胞转移侵袭的影响,探讨其抗癌机制。将不同浓度的盐酸小檗碱作用于人宫颈癌Hela细胞,采用MTT比色法检测细胞体外增殖的抑制作用;应用Transwell小室进行人工重组基底膜侵袭和运动实验,观察盐酸小檗碱对Hela细胞侵袭和转移的影响;采用免疫组化SABC法检测Hela细胞中MMP-9、NF-κBp65的表达。结果:MTT比色法表明,盐酸小檗碱能抑制宫颈癌Hela细胞的体外增殖(P0.05),并具有剂量、时间依赖性(P0.05),同时细胞侵袭和迁移能力明显降低;免疫组化SABC法结果显示,盐酸小檗碱能引起细胞内MMP-9、NF-κBp65表达下调,与对照组相比差异有统计学意义(P0.01)。研究结果表明盐酸小檗碱对宫颈癌Hela细胞体外增殖具有明显的抑制作用;盐酸小檗碱能够减弱人宫颈癌细胞Hela的侵袭和转移,其作用机制可能与降低MMP-9、NF-κBp65的表达有关。
（六）黄连治疗白血病的研究
王成艳等【19】为观察小檗碱(berberine,BBR)对急性淋巴细胞白血病细胞株Jurkat凋亡的影响以及探讨细胞凋亡的机制,采用MTS法检测小檗碱的细胞毒性;软琼脂克隆法检测小檗碱的长期细胞毒性;Annexin V-FITC/PI双染的流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting法检测不同浓度、时间小檗碱处理后caspase-3前体蛋白、激活型caspase-3、caspase-9、PARP的表达水平的变化;Western blotting法检测胞浆中Cyto-C、AIF的变化。结果发现小檗碱能显著抑制Jurkat细胞的增殖,IC_(50)约18.6μg/m L;小檗碱能抑制细胞克隆,并呈量效关系(r=-0.989,p0.001)。小檗碱诱导Jurkat细胞凋亡,呈浓度依赖性(r=0.928,p0.001)。小檗碱作用Jurkat细胞后caspase-3前体蛋白、caspase-9前体蛋白、PARP 116 k D表达水平下调;PARP 85 k D、激活型caspase-3以及胞浆中Cyto-C、AIF表达上调,并呈时效关系。研究发现内源性凋亡途径可能参与小檗碱诱导的Jurkat细胞凋亡过程。
王成艳等【20】通过对近年来小檗碱及其衍生物抗白血病作用方面的相关文献进行整理和分析,初步探讨了小檗碱及其衍生物抗白血病的作用机制,发现其可以通过抑制肿瘤细胞的增殖、诱导肿瘤细胞的凋亡、影响细胞周期以及促进细胞分化等方面来实现抗白血病的作用。本文同时整理了小檗碱与其他抗白血病药物的联合疗效,为开发小檗碱新的药理作用以及寻找新的治疗靶标提供理论依据。
王冠玲等【21探讨小檗碱对人T淋巴细胞白血病细胞株Molt-4细胞体外增殖抑制、凋亡诱导及相关机制。通过CCK-8法检测不同浓度的小檗碱对Molt-4细胞的增殖抑制作用；流式细胞术检测细胞凋亡率；RT-PCR检测Molt-4细胞Notch1、Bcl-xl、Deltex1基因表达情况。结果显示小檗碱诱导Molt-4细胞毒性及凋亡作用，呈剂量依赖性(P0.05)；RT-PCR显示Molt-4细胞株有Notch1 mRNA的表达，且随着小檗碱剂量的增加，Notch1、Bcl-xl、Deltex1 mRNA的表达逐渐下降。因此认为小檗碱可能通过Notch信号途径抑制Molt-4细胞增殖并诱导凋亡。
（七）黄连治疗前列腺癌的研究
黄连抗肿瘤研究进展(三)相关范文