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黄连抗肿瘤研究进展(四)

本文ID:LW226227 ¥TXW817884
凡治国等【22】探讨采用磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制药——LY294002抑制磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)信号通路联合小檗碱对前列腺癌DU145细胞生长的抑制作用。采用MTT法检测细胞增殖情况;采用流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期分布情况;采用Western blot检测细胞中PI3K、p-AKT、cyclin D1、bcl-2、BA..
凡治国等【22】探讨采用磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制药——LY294002抑制磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)信号通路联合小檗碱对前列腺癌DU145细胞生长的抑制作用。采用MTT法检测细胞增殖情况;采用流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期分布情况;采用Western blot检测细胞中PI3K、p-AKT、cyclin D1、bcl-2、BAX蛋白表达情况。结果:随着小檗碱作用浓度的增加,DU145细胞的增殖率逐渐降低;不同浓度小檗碱与LY294002联合处理对DU145细胞增殖的抑制作用均较相同浓度小檗碱单独处理增强(P﹤0.05)。与空白对照组相比,小檗碱组DU145细胞的凋亡率增高(P﹤0.05),G0/G1期细胞所占比例增高(P﹤0.05),PI3K、p-AKT、cyclin D1、bcl-2蛋白表达水平均下调(P﹤0.05),BAX蛋白表达水平上调(P﹤0.05)。与小檗碱组和空白对照组相比,小檗碱+LY294002组DU145细胞的凋亡率增高(P﹤0.05),G0/G1期细胞所占比例增高(P﹤0.05),PI3K、p-AKT、cyclin D1、bcl-2蛋白表达水平均下调(P﹤0.05),BAX蛋白表达水平上调(P﹤0.05)。研究结果表明小檗碱能够抑制DU145细胞增殖,并促进细胞凋亡和细胞周期阻滞,采用LY294002阻断PI3K/AKT信号通路能够明显增强小檗碱对前列腺癌DU145细胞生长的抑制作用。
钟静等【23】研究发现小檗碱可抑制人前列腺癌细胞株PC3细胞增殖、促进细胞凋亡,其机制可能与小檗碱可上调Cleaved-Caspase-3、Bax表达,抑制Bcl-2表达有关。
(八)黄连治疗其他肿瘤的研究
孙彦珍等【24】采用免疫磁珠法分离CD133+肺癌干细胞,MTT法和流式细胞仪分别检测不同质量浓度小檗碱(0,2.5,5,10,20,40 mg/L)对CD133+肺癌干细胞增殖和凋亡的影响,免疫印迹检测小檗碱(0,20 mg/L)对肺癌干细胞中Ki67、Bax、Bcl-2、PTCH1、SHH、Gli-1和SMO蛋白表达的影响。研究结果发现采用免疫磁珠法分选得到高比率的CD133+肺癌干细胞;小檗碱抑制肺癌干细胞生长,并呈浓度依赖性;小檗碱促进肺癌干细胞凋亡,并呈浓度依赖性;Ki67、Bcl-2、PTCH1、SHH、Gli-1和SMO蛋白在20 mg/L小檗碱组中的表达水平明显低于未加药组,Bax蛋白的表达水平则明显高于未加药组;小檗碱可能通过调控Hedgehog信号通路抑制肺癌干细胞增殖,促进其凋亡。
常金荣等【25】通过体外培养人结肠癌HT29细胞、盐酸小檗碱(2.5,5.0,10.0μM)和吴茱萸碱(1.8,3.75,7.5μM)作用于稳定转染miR-17-5p和miR-20a的HT29细胞后,采用MTT法、流式细胞术、实时荧光定量PCR及Western印记法检测药物对HT29细胞增殖、细胞周期分布情况、mRNA表达水平及E2F1蛋白表达的影响。结果发现盐酸小檗碱和吴茱萸碱可以抑制转染的HT29细胞增殖,具有时间依赖性;并且盐酸小檗碱和吴茱萸碱分别以浓度5.0、3.75μM作用转染HT29细胞72h后抑制率超过50%,者能够将细胞阻滞在S期,抑制miR-17-5p和miR-20a的表达水平及E2F1的蛋白表达。研究结果表明盐酸小檗碱和吴茱萸碱通过靶向miR-17-92抑制E2F1蛋白的表达,将细胞阻滞在S期,进而抑制大肠癌HT29细胞的增殖。
四、结语
黄连抗肿瘤作用的研究一直是学术界的热点,黄连抗肿瘤的作用已得到国际公认。通过多年来的研究,黄连治疗各种恶性肿瘤效果显著。在寒性中药抗肿瘤研究中,黄连价格不贵、货源充足、长期使用对人体基本无毒副作用,随着人们对黄连抗肿瘤作用的进一步探讨和研究,黄连及其制剂在治疗肿瘤方面将具有更加广阔的发展前景。


参考文献
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