六味地黄丸制剂的含量测定研究进展_开题报告

六味地黄丸的研究现状

六味地黄丸出自宋·钱乙《小儿药证直诀》中的“地黄丸”，该方删减医圣张仲景著《金匮要略》中的肾气丸药方当中的附子与桂枝，由熟地黄（八钱）、山萸肉（四钱）、干山药（四钱）、泽泻、牡丹皮、茯苓（各三钱）六味中药组成，是著名的补阴方剂。该方的主要功效是滋阴补肾，用于治疗肾阴亏损，肝肾不足，或兼阴虚火旺之证。方中重用熟地黄，补肾填精，为君药；山萸肉补肝养肾而涩精，既能助熟地黄填精益髓，又能防止补而不失；山药补益脾阴而固精，既能助熟地黄补肾填精，又能助后天生化之源而补脾；山萸肉与山药共为臣药。三味补药相配，具有滋养肝脾肾的作用，称为“三补”。配伍泽泻利水渗湿，防熟地黄之滋腻留邪；牡丹皮清泄相火，制山萸肉之温涩；茯苓健脾利湿，助山药之健运。三药合为“三泻”，渗湿浊，清虚热，使得“补中有泄”，“泄中有补”，均为佐药。六味合用，三补三泻，滋补而不留邪，降泄而不伤正，是本方的配伍特点[1,2]。

六味地黄丸作为经典方剂，配伍合理，功效显著，其化学成分分析、质量控制和药理药效研究一直是国内外研究的热点，现对其研究现状做如下综述：

中药复方成分复杂，全面研究六味地黄丸制剂中化学成分，是保证药品质量安全、有效和一致性的前提。赵新峰等[3]采用UFLC-ESI-IT-TOF方法同时检测六味地黄丸中的化学成分，结果在六味地黄丸提取物中一共鉴定了40种化学成分，包括地黄苷A、B、C、D等环烯醚萜类化合物，芍药苷、羟基芍药苷等二萜类化合物，泽泻醇A、B、C等三萜类化合物，番木鳖苷、莫罗忍冬苷等苷类成分以及茯苓酸、去氢茯苓酸等。说明超快液相色谱与飞行时间质谱联用，适合于中成药复杂成分的分离与鉴定，为中药复方的质量控制和潜在药效物质基础研究奠定基础。王远[4]等采用HPLC-UV-ELSD联用方法，通过将灵敏度高的紫外检测器与通用性蒸发光散射检测器联用，以提高分离效率和可识别的峰数目，对六味地黄丸的有效成分进行分析。结果显示，常温下，两个检测器联用一共检测到42个色谱峰，提示两者联用可对样本中化学成分进行更全面的分析，有利于中药指纹图谱的研究和质量控制。

质量控制是保证药品上市后安全、有效和一致性的决定因素，因此也是成方制剂研究中的热点和重点。常增荣等[5]在原有六味地黄丸质量控制专属性不强及质控效率低等基础上，新增莫诺苷作为酒萸肉质量控制成分，并且改良色谱条件，使得在一个色谱条件下同时测定六味地黄丸中马钱苷、莫诺苷和丹皮酚的含量，达到更有效、高效率控制药品质量的目的。叶霁等[6]选取六味地黄丸中分别属于苷类、萜类、酚类、四环三萜和鞣质类化合物为研究对象，采用梯度洗脱和HPLC-UV的方法，建立六味地黄丸的指纹图谱，并根据色谱指纹图谱得到的整体化学信息，建立了一种对六味地黄丸进行质量控制的新方法。此外，也建立了一种HPLC-DAD-ELSD的方法，同时对六味地黄丸中没食子酸、5-羟甲基糠醛、莫诺苷、璋牙菜苷、马钱苷、芍药苷、丹皮酚和泽泻醇B-23醋酸酯八种主要化学成分进行含量测定。

六味地黄丸药理作用研究广泛，主要包括：提高免疫力、抗肿瘤作用；降血压、降血糖、降血脂与抗动脉粥样硬化作用；肾脏保护作用；抗衰老作用等[7]。此外，研究者也对六味地黄丸在其它疾病方面的应用进行研究。薛红等[8]评估了六味地黄丸对已接受多巴胺替代治疗的帕金森病患者多个系统自主神经症状的影响，发现六味地黄丸可显著降低帕金森患者夜间盗汗和畏热的发生率，减少夜尿、尿失禁、尿频，还能明显减少性功能障碍，且均具有显著性差异（P<0.05），提示六味地黄丸可能通过作用于泌尿系统、体温调节和性功能等多歌方面，发挥改善帕金森病自主神经症状的作用。王红梅等[9]通过检测各组小鼠的体重及状态、学习记忆能力、自主活动、抗疲劳能力、血清皮质酮含量、免疫学指标及脑组织病理学变化，评价了六味地黄丸对肾虚型老年痴呆动物模型的治疗作用，发现六味地黄丸可显著改善肾虚型老年痴呆症状。

此外，也有研究者对六味地黄丸的作用机制进行研究。Wang等[10]以甲状腺素和利血平诱导的肾阴虚大鼠为研究对象，运用UPLC/ESI-SYNAPT-HDMS代谢组的方法对肾阴虚大鼠的尿液进行分析，以探讨甲状腺素和利血平诱导大鼠以及六味地黄丸、熟地-山药-山茱萸和泽泻-茯苓-牡丹皮治疗作用造成的代谢谱的变化，并且从生化和代谢水平探讨六味地黄丸治疗肾阴虚的作用机制。结果表明，甲状腺素和利血平扰乱了健康大鼠的代谢谱，一共鉴定出20个潜在生物标志物用于临床诊断肾阴虚，六味地黄丸、熟地-山药-山茱萸和泽泻-茯苓-牡丹皮治疗后，代谢谱均不同程度向正常大鼠靠近，且六味地黄丸治疗后更接近正常水平，进一步说明复方治疗效果最佳。

联合用药目前在临床很常见，Wang等[11]评估了六味地黄丸（LWDHW）联合抗高血压药物治疗原发性高血压的有效性和不良反应。综合结果显示，与单用降压药物相比，LWDHW联合降压药物治疗原发性高血压更有效，且大多数试验没有报告不良事件，但安全性仍不确定，值得进行进一步实验。

二、^范文提纲

1 六味地黄丸研究现状

1.1 溯源

1.2 临床应用

1.3 化学成分研究

1.3.1 体外化学成分研究

1.3.2 体内化学成分研究

1.4 药理作用研究概括

1.5 六味地黄丸现有标准情况

2 六味地黄丸制剂含量测定研究进展

2.1 高效液相法

2.1.1 熊果酸和齐墩果酸

2.1.2 丹皮酚和熊果酸

2.1.3 马钱苷、芍药苷和丹皮酚

2.1.4 丹皮酚、马钱苷、莫诺苷和芍药苷

2.1.5 莫诺苷、马钱苷、山茱萸新苷和丹皮酚

2.1.6 没食子酸、马钱苷、芍药苷和丹皮酚

2.1.7 没食子酸、5-羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷、芍药苷、丹皮酚和熊果酸

2.2 近红外色谱法

2.2.1 丹皮酚

2.2.2 马钱苷

2.3 毛细管色谱法

2.4 苯酚硫酸法

3 全文总结

三、参考文献

[1] 杨林, 孙静, 郝璐. 六味地黄丸组方的临床应用及研究[J]. 浙江中医药大学学报, 2010, 34(5):796-798.

[2] 王萍, 王喜军. 六味地黄丸研究现状[J]. 中医药信息, 2013, 30(3):163-165.

[3] 赵新峰, 孔宏伟, 汪江山,等. UFLC-ESI-IT-TOF鉴定六味地黄丸中的化学成分和代谢成分[J]. 世界科学技术:中医药现代化, 2009, 11(1):153-157.

[4] 王远, 韩爽. HPLC-UV-ELSD联用常温分析检测六味地黄丸成分[J]. 黑龙江环境通报, 2014, 38(3):24-28.

[5] 常增荣, 李姣, 郭洪祝,等. 六味地黄丸质量控制方法提高研究[J]. 中国药学杂志, 2015, 50(16):1441-1445.

[6] 叶霁. 六味地黄丸质量控制新方法的研究[D]. 沈阳药科大学, 2009.

[7] 李红. 六味地黄丸的药理研究概述[J]. 中国林副特产, 2014(5):99-100.

[8] 薛红, 虢周科, 刘璇. 六味地黄丸对帕金森患者自主神经功能的影响[J]. 中医学报, 2010, 25(2):283-285.

[9] 王红梅, 宋彩梅, 刘新民,等. 六味地黄丸对肾虚型老年痴呆动物模型的改善作用[J]. 中国实验方剂学杂志, 2012, 18(5):112-116.

[10] 关俭, 唐洁凤, 郭荣林. 六味地黄丸对绝经后骨质疏松患者骨密度的干预研究[J]. 海南医学, 2009, 20(5):79-80.

[10] Ping W, Hui S, Lv H T, et al. Thyroxine and reserpine-induced changes in metabolic profiles of rat urine and the therapeutic effect of Liu Wei Di Huang Wan detected by UPLC-HDMS.[J]. Journal of Pharmaceutical & Biomedical Analysis, 2010, 53(3):631-645.

[11] Wang J, Yao K, Yang X, et al. Chinese Patent Medicine Liu Wei Di Huang Wan Combined with Antihypertensive Drugs, a New Integrative Medicine Therapy, for the Treatment of Essential Hypertension: A Systematic Review of Randomized Controlled Trials[J]. Evidence-based complementary and alternative medicine: eCAM, 2012, 2012(6):714805.