柴胡口服液中总黄酮含量测定_开题报告

中药柴胡为伞形科植物柴胡 Bupleurum chinense DC．或叶柴胡 Bupleurum scorzonerifolium Willd．的干燥根。按性状不同，分别习称“北柴胡”和“南柴胡”。主产于东北、华北、内蒙古、河南、陕西及甘肃等省区。柴胡药性辛、苦，微寒，归肝、胆、肺经，具有疏散退热，疏肝解郁，升举阳气等功效1,2。临床上用于感冒发热，寒热往来，胸胁胀痛，月经不调，子宫脱垂等证。

近年来，对中药柴胡的研究非常广泛，且不断深入，尤其在资源利用、质量控制、化学成分和药理活性方面取得了许多进展，柴胡地上部分主含黄酮类成分,具有利胆、抑菌、杀菌等作用3-6。

（一）国内研究现状

古籍《博物志》云: “芸蒿叶似邪蒿，春秋有白蒻，长四五寸，香美可食。长安及河内并有之。此茈胡治伤寒第一用。”可以看出古时的柴胡多生长在长安及河内，其主要是在古银州地区。而到了北宋时期，《本草图经》则曰: “柴胡，生洪农山谷及冤句，今关陕，江湖间进到皆有之，以银州者为胜。”其中的银川地区，即为现今的陕西北部地区。另外，《雷公炮制论》也曾说道: “凡使，茎长软、皮赤、黄髭须。出在平州平县，即今银州银县也。西畔生处，多有白鹤。绿鹤与此翔处，是柴胡香直上云间……”据此看来，柴胡的道地产区为古银州地区，而银州柴胡则为道地品种7。而现今药用的北柴胡则被划为“北药”之一，道地产区为河北、北京、天津、山东、山西等省。其中河北还是" 津柴胡" 的主产区。柴胡含有皂苷( saponin) 、挥发油( essential oil) 、黄酮( flavone) 、多糖( polysaccharide ) 、油酸( oleic acid ) 、亚麻酸( linolenicacid ) 、硬脂酸( stearic acid) 等多种化学成分，其中前四种是其主要化学成分，皂苷种类有柴胡皂苷 a、c、d，挥发油也含有月桂酸( dodecanoic acid) 、肉豆蔻酸( tetradecanoic acid) 、3 － 二十烷炔( 3－eicosyne) 等多种成分，此外，柴胡黄酮与多糖类成分也是近些年研究的热点。

（二）国外研究现状

周亚福等8采用可见光分光光度法比较了小叶黑柴胡、北柴胡、狭叶柴胡等五种植物的总皂苷和总黄酮含量，认为小叶黑柴胡和秦岭柴胡具有很好的开发前景。林海霞9则利用薄层色谱法鉴定了竹叶柴胡中芦丁、槲皮素等黄酮类成分，并运用 HPLC 法测定了竹叶柴胡中芦丁、槲皮素、山柰素和异鼠李素的含量，并以此起草了竹叶柴胡的质量标准，为竹叶柴胡的质量控制奠定基础。

柴胡口服液是将柴胡粉碎、温浸、回流、精滤而制得,同样具有解热消炎作用,且服药方便。

综上所述，中药柴胡作为中医临床常用药物，具有柴胡皂苷、挥发油、黄酮、多糖等多种有效成分，同时又具有解热、抗炎、保肝等众多药理活性。而目前，学者们的研究也多集中在柴胡的化学成分及药理活性研究两方面，虽然皂苷、挥发油等的提取研究给柴胡的应用带来了广阔的前景，解热、抗炎等药理活性的研究也使柴胡受到了更广泛的应用，但笔者认为药材的资源与质量问题更应受到人们的重视，因为资源保护与质量的控制是其化学和药理研究的基础，只有资源丰富、质量优的药材才值得更加深入的研究，也是人们得以广泛应用的前提。而这也带来许多问题需要更深入的研究。

本实验参考文献方法10-13以芦丁为对照品,用硝酸铝在碱性溶液中与黄酮显色,测定其总含量,为建立该口服液的质量标准提供了理论依据。

二、^范文提纲

1　材料与方法

1.1仪器与试剂　日本岛津UV2120 紫外分光光度计。柴胡口服液(河南百泉制药厂, 批号:050902、051016、051105) ;芦丁对照品(中国药品生

物制品鉴定所) ;其余试剂均为分析纯。

1.2　实验方法

1.2.1 对照品溶液的制备　精密称取120 ℃干燥至恒重的芦丁对照品40. 0 mg,置于100 ml容量瓶中,加入60%乙醇适量,微热使溶解,放冷后用60%乙醇稀释至刻度,摇匀备用。

1.2.2 供试品溶液的制备　精密吸取柴胡口服液50. 00 ml,挥去水后用80 ml甲醇回流提取4 h,冷却,放置过夜后过滤,回收甲醇至干,用60%乙醇定容至100. 00 ml,即得。

1.2.3 测定波长的确定　以芦丁为对照品测定柴胡口服液中总黄酮的含量。精密量取对照品溶液和试品溶液适量, 分别置于50 ml 容量瓶中, 加0.72 mol/L亚硝酸钠溶液0.5 ml, 摇匀, 放置6 min,加0.47 mol/L硝酸铝溶液1.5 ml,摇匀,放置6 min,加1.0 mol/L氢氧化钠溶液4.0 ml,再加水至刻度, 摇匀, 放置15 min 后, 在200 ～700 nm波长范围内扫描,结果2种溶液均在510 nm波长处有最大吸收,其他成分对测定无干扰,故选择510 nm作为测定波长。

1.2.4  标准曲线的绘制　精密吸取芦丁对照品溶

液0.0 ml、0.5 ml、1.0 ml、1.5 ml、2.0 ml、2.5 ml、3.0 ml、3.5 ml、4.0 ml,分别置于50 ml容量瓶中,加60%乙醇至4.0 ml,加0.72 mol/L亚硝酸钠溶液0.5 ml,摇匀,放置6 min,加0.47 mol/L硝酸铝溶液1.5 ml,摇匀,放置6 min,加1.0 mol/L氢氧化钠溶液4.0 ml,再加水至刻度,摇匀,放置15 min,用第1份溶液作空白,在510nm的波长处测定吸光度(A) 。

1.2.5  样品含量测定　精密吸取供试品溶液6份,每份5 ml,置于50 ml容量瓶中,按上述标准曲线绘制方法分别测定其吸光度(A) 。

三、参考文献

1国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部).[M].北京:中国医药科技出版社 235 (2010).

2申保生,杨道坤.三甲益肝冲剂和螺内酯对大鼠肝纤维化的预防作用.新乡医学院学报 22, 4292432 (2005).

3中国医学科学院药物研究所.中药志[M ].第2版.北京:人民卫生出版社 4812486 (1982).

4罗思齐,金.我国西南地区六种柴胡属植物地上部分的化学成分研究.中国中药杂志 16, 353 (1991).

5林启寿.中草药成分化学[M ].北京:科学出版社 (1977).

6汪琼,徐增菜.竹叶柴胡地上部分总黄酮含量测定.中国药材 28, 4532455 (2005).

7李达,秦凯华.《证类本草》中柴胡的本草学考证. 陕西中医药大学学报 35, 8-10 (2012).

8周亚福,李思锋.柴胡属 5 种植物总皂苷和总黄酮含量的测定.时珍国医国药 24, 1241 (2013).

9林海霞.竹叶柴胡的质量研究.成都中医药大学硕士^范文(2012).

10董明华,刘旭.柴胡口服液的制备.制剂技术 9, 34 (2000).

11闭业范.紫外分光光度法测定降脂通脉口服液中总黄酮含量.广西中医学院学报 54, 1022103 (2001).

12刘义梅.分光光度法测定复方银杏口服液中总黄酮的含量.医学导报 24, 722 (2005).

13鄢英慧,沈小苹.紫外分光光度法测定保肾口服液中总黄酮含量.福建中医药 36, 43245 (2005).