RP-HPLC测定藿香正气散中橙皮苷的方法研究_开题报告

橙皮苷是由橙皮素和芸香糖形成的糖苷，属于二轻黄铜类化合物，能降低毛细管的脆性，保护毛细血管，防止微血管破裂出血的作用；具维生素P样效能,用入皮肤护理制品中,有预防冻伤的作用；能抗炎和抗病毒,有一定的抗菌作用,在口腔卫生制品中使用能抑制齿斑的生成并同时减少口臭；能防止紫外线辐射作用,可用于防晒品。还具有抗氧化、抗癌、调节免疫力等药理作用。藿香正气散由广藿香、桔梗、橙皮等组成，具有解暑祛湿、和胃止呕、芳香化浊的功效，日常中用于外感暑湿引起的发热、胸闷、腹胀等症[1]。其中橙皮苷发挥着不可或缺的作用[2]。为了有效、快捷的控制制剂的质量，保证其疗效，因此研究采用高效液相色谱法测定藿香正气散中的橙皮苷含量。

（一）历年来对于橙皮苷的各项研究

高效液相色谱法[3]测定橙皮苷含量实验中，在文献研究基础上，对橙皮苷的提取采用超声提取30分钟此较为方便的方法，而同时表明提取时间必须达到30分钟以上才能有效提取橙皮苷。高效液相色谱法含量测定方法简便、快速、准确、重复性好，为样品的质量控制提供了依据。相比较其他的方法，高效液相色谱法更加的好用。

陈皮中主要含橙皮苷、新橙皮苷、橘皮苷等，其实橙皮苷为主要活性成分。而薄层扫描法[4]测定橙皮苷含量中，表明橙皮苷点样量在0.19~0.64μg范围内，与峰面积积分值呈良好的线性关系，直线不通过原点，故用外标两点法测定。薄层扫描法亦能体现出橙皮苷的含量。

紫外光谱检测陈皮中橙皮苷。试验表明，橙皮苷在特定条件下具有较高的提取率及较高的纯度，因此需要选择合适的方法进行实验。紫外光谱法[5]则可在特定条件下监测并定量测定提取物中的橙皮苷含量。

通过大孔树脂吸附法[6]富集橙皮苷洗脱率，洗脱溶媒确定为50%乙醇，而洗脱量确定为100ml，最佳的上柱量为5ml，静置时间30分钟时含量最高。文章也证实了D101型大孔吸附树脂富集橙皮苷等黄酮类成分水溶液不仅具有吸附快、解吸率高的特点，而且具有吸附容量较大，洗脱率高、树脂再生简便等优点。具有一定的推广应用价值。

分光光度测定[7]橙皮中橙皮苷含量，橙皮苷和Al(NO3)3水溶液反应后生成的络合物在420nm处有最大吸收，在0~100μg/ml的范围内吸光度具有良好的线性关系，且将反应体系放置一段时间，其吸光度值变化较小，说明络合物的稳定性较好。可用于分光光度测定橙皮中橙皮苷。

陈皮中橙皮苷提取溶剂的优化选择[8]，方法选择有纯水提取法、碱水提取法和乙醇提取法，应用高效液相色谱法分别检测回收率。结果表明提取陈皮中橙皮苷的最佳溶剂为乙醇。

超声波提取[9]橘皮中橙皮苷的提取工艺条件，利用超声波辅助，碱性乙醇溶液提取柑橘皮中的橙皮苷，并通过紫外分光光度计对提取物中的橙皮苷进行定量测定。结果表明，超声波频率是影响橙皮苷提取率的最主要因素，其最佳工艺条件为：超声波频率为低频（25.5kHz），提取溶剂为60%乙醇，PH值为11，提取温度为75℃，料液比为1:35(g/ml)。在此条件下橙皮苷的提取率为4.7%。

（二）历年研究的成果及实验的借鉴方向

根据文献研究可知，橙皮苷在提取过程中，提取方法主要表现为试剂的选择、提取方法的选择、提取时间的确定、提取溶剂量的确定等等；试剂在提取橙皮苷过程中，醇类试剂的提取效果最佳，所以在实验时，减小选择范围，取用醇类试剂；提取方法有超声和回流两种，可尝试后确定何种方法最佳。实验的时间和溶剂量也得经过实验来确定。选用高效液相色谱法来完成此研究，还要考虑高效液相色谱法测定橙皮苷的含量时，要确定的波长及色谱条件等。最终进行线性关系考察、精密度试验、重复性试验、回收率试验等，来确定试验的可行性。

二、^范文提纲

1 仪器与试药

2 色谱条件的优化

2.1 检测波长的选择

 2.2 色谱条件

3 提取方法考察

3.1 对照品溶液的制备

3.2 提取溶剂的选择

 3.3 提取方法的选择

3.4 回流提取时间的选择

 3.5提取溶剂量选择

4 线性关系考察

5 精密度

5.1 精密度试验

5.2 重复性试验

6 准确度试验

7 耐用性

7.1稳定性试验

7.2 柱温比较

8 样品测定

9 小结与讨论

参考文献

[1]肖崇厚.中药化学 [M].上海：上海科学技术出版社，1997：263-298.

[2]江纪武,肖庆祥.植物药有效成分手册[M].北京.

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[4]刘方，李文仕 ，余绍玲，等.薄层扫描法测定消气合剂中橙皮苷的含量[J]. 中国医院药学杂志，2003，23（5）：310-311.

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[9]耿敬章，钱英，张志健，等.超声波辅助提取橘皮中的橙皮苷[J].中国食品添加剂，2009，12（7）：63-68.