冬凌草甲素抗肿瘤分子药理机制研究_开题报告

1.在抑制肿瘤细胞增殖的相关文献方面，对冬凌草甲素用于白血病治疗的实验研究逐渐增多，冬凌草甲素能够明显的抑制肿瘤细胞的增殖。如在冬凌草甲素作用于白血病细胞Ｎａｌｍ－６的研究中，研究者证明冬凌草甲素对其有显著的增殖抑制作用。Chen S [3]等观察到冬凌草甲素阻滞前列腺癌细胞周期受激素受体影响, 雄性激素受体表达于G1 期, 而在未表达的激素受体的细胞主要以G2/M期为主。提示冬凌草甲素阻滞周期与细胞的类型有关联, 可能作用于不同时期的调控蛋白使细胞阻滞在某一分裂时期, 影响信号转导、端粒酶活性等抑制癌细胞增殖。采用冬凌草甲素作用于人Ｋ５６２细胞和人白血病ＨＬ－６０细胞的作用，结果发现冬凌草甲素对两种细胞均有直接杀灭作用，其抑制作用与冬凌草甲素作用时间和冬凌草甲素的药物剂量呈明显的量效和时效关系。李瑞芳[4]等分析不同浓度的冬凌草甲素处理过的K562细胞, 出现明显细胞周期改变, 在小剂量时下调K562 细胞端粒酶活性, 细胞以凋亡为主, 在大剂量时以细胞毒作用为主, 认为可能不是直接抑制了端粒酶的活性,是通过间接途径下调端粒酶活性, 抑制了端粒酶RNA 的转录和翻译过程。此研究为冬凌草甲素治疗白血病提供了很好的实验依据。

2. 在诱导细胞凋亡的相关文献方面，细胞凋亡是多细胞有机体为调控机体发育, 维护内环境稳定, 由基因调控的细胞主动死亡过程。Zhou GB [12]等研究发现用冬凌草甲素处理后有Caspase- 3 介导的AE 融合蛋白降解, 它的上游转录过程却未受到影响, 当在ETO 或者AML1 基因的D188 个位点用甘氨酸代替天冬氨酸时阻止融合蛋白降解。所以冬凌草甲素很可能在此位点诱导融合蛋白分解, 此外融合蛋白降解也影响了下游靶基因BCL- 2 表达, 诱导激活了凋亡途径。细胞凋亡的减少在肿瘤的发生发展中起着重要的作用, 而几乎所有抗肿瘤化疗药物都是通过诱导细胞凋亡发挥抗肿瘤作用, 因此, 目前对冬凌草甲素的研究和报道最多的即是冬凌草甲素诱导肿瘤细胞凋亡及其作用机制。辛庆锋[14]等实验结果表明冬凌草甲素能显著抑制人胃腺癌BGC -823 细胞的生长,并呈浓度-时间依赖性。提示冬凌草甲素对BGC -823 细胞的生长抑制和诱导凋亡作用可能与G2/M 细胞周期阻滞有关, 诱导凋亡可能通过线粒体和(或)内质网途径起作用。已有多项体外试验表明, 冬凌草甲素能有效诱导下列肿瘤细胞株凋亡:人白血病HPB-ALL;人肝细胞癌BEL-7402;人宫颈癌Hela ;鼠纤维肉瘤L929 ;人组织细胞淋巴瘤U937;人黑色素瘤A375-S2 等。冬凌草甲素诱导肿瘤细胞凋亡的具体途径可能与细胞的类型、状态、信号途径中的各个效应器的活性及功能有关。

3.在对肿瘤细胞信号通路的调节的相关文献核转录因子- KB(NF- KB) 对多种基因的调节起关键作用。Liu [18]等用ORI 处理人组织细胞淋巴瘤U937 细胞, 检测到FasL、Fas 及下游接头蛋白FADD表达增加, pro-caspase-8 减少, 且caspase-8 抑制剂z-IETD能阻断ORI引起的细胞死亡及DNA碎片, 提示FasL/Fas 死亡受体途径参与ORI 激活的凋亡。Hsieh 等观察到ORI 作用于MCF-10A, 减少其p65 和p50 型NF-kB及上游调控基因IkB表达, 但在MCF-7细胞中这些参数却没有明显变化。NF- KB 在细胞质中与NF- KB 抑制物( IkB) 相互作用而处于失活状态, IkB 激酶使IkB 磷酸化致其降解, NF- KB 游离并进入细胞核, 多数肿瘤细胞通过激活NF- KB 来保护自己免于凋亡。在Leung [19]等实验中, ORI 作为NF-kB结合DNA的活性抑制剂, 能有效抑制TNF-a引起的NF-kB受体基因高表达及其下游效应分子环加氧酶-2 (COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达,还影响 NF-kB 从胞浆到细胞核的定位, 但不影响IkB的磷酸化及降解。研究表明冬凌草甲素可以降低乳腺癌细胞NFKB的P65 或者P50 组分, 上调IkB 的表达, 下调cyclin B1,cdc2。此外, 研究还发现了冬凌草甲素可以并不影响IkB 磷酸化和降解, 而是通过作用于P65、P50 的一个亚基位点来改变调整转入因子与DNA 结合的亲和力, 影响基因的表达。冬凌草甲素对IkB 的双重作用, 可能是抑制其基因转录抑制肿瘤生长的机制之一。

二、^范文提纲

引言

1冬凌草甲素理化性质与结构

2 冬凌草甲素的药理作用

2.1 抗菌消炎作用

2.2 抗氧化作用

2.3 细胞毒作用

2.4 其他作用

3冬凌草甲素抗肿瘤活性及其机制

3.1 抑制肿瘤细胞增殖

3.1.1 调控细胞周期

3.1.2 抑制端粒酶基因表达与蛋白活性

3.1.3抑制细胞膜钠泵活性 

3.2 诱导细胞凋亡

3.2.1 细胞的调亡途径

3.2.2 调控癌基因蛋白,凋亡调控蛋白的表达

3.2.3 对肿瘤特异性融合蛋白的影响

3.3 对肿瘤细胞信号通路的调节

3.3.1 对核转入因子-KB信号通路的抑制作用

3.3.2 对MAPK 相关信号通路的调控

3.3.3 对表皮生长因子受体介导的信号通路的抑制作用

3.4 其他

3.4.1 抑制毒性物诱变细胞DNA

3.4.2 清除细胞内自由基

4结语

三、参考文献

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