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微透析法测定植物内源激素研究_开题报告

浓度逐渐趋于平缓,并且MDH的活性消失,这表明120分钟后收集到的透析液,没有受到破损细胞液的污染,是纯净的鹅掌柴嫩茎质外体汁液。将此法获取的质外体汁液在高灵敏的分析检测仪器上进样,便可对植物质外体进行实时、在线、活体研究。目前质外体的提取方法主要有还原测定法、离心法、淋洗法等,但上述方法均无法对植物..
微透析法测定植物内源激素研究_开题报告 浓度逐渐趋于平缓,并且MDH的活性消失,这表明120分钟后收集到的透析液,没有受到破损细胞液的污染,是纯净的鹅掌柴嫩茎质外体汁液。将此法获取的质外体汁液在高灵敏的分析检测仪器上进样,便可对植物质外体进行实时、在线、活体研究。目前质外体的提取方法主要有还原测定法、离心法、淋洗法等,但上述方法均无法对植物特定部位质外体进行取样研究,质外体汁液易受到污染、操作繁琐,且测定结果无法测定质外体相关组分的动态变化。与上述几种方法相比较,植物微透析取样技术可以快速、活体、简便、动态地测定质外体各项指标。微透析技术在植物质外体取样中的应用,必将在植物质外体动态研究以及质外体相关功能的研究方面,取得新突破。
(二)国外研究现状
植物的新陈代谢过程受到植物激素调控,植物激素尽管含量甚低却对植物的生长发育具有重要的支配作用。植物的开花、落叶、落果及植物的衰老、成熟等过程受到激素调节。研究表明植物的抗寒能力与植物激素特别是脱落酸有关,植物体内渗透压会在低温胁迫下发生改变,使脱落酸瞬间或持续性积累,最终使基因表达发生改变导致植物表现出高抗寒性的性状。耐寒强植物的脱落酸水平高于耐寒弱的植物,RAJA等研究发现随着马铃薯耐寒性提高其体内的脱落酸含量也在上升。而耐寒弱的植物体内赤霉素含量却高于耐寒强的植物,因此ABA/GA的比值能更好的体现植物抗寒能力。
植物内源激素含量极其低下,性质不稳定,同时又会受到植物体内其他化合物的干扰,因此其测定方法必须要求足够灵敏和专一。传统方法测定植物激素通常为首先通过有机溶剂从植物体内提取,提取过程中既要防止激素遭到破坏又要尽量避免其他干扰物质。其次通过各种层析或萃取的手段,对激素进行提纯。然后通过生物、物理或化学的方法对样品中激素含量进行测定。目前主要的物理化学检测方法为气相色谱法和高效液相色谱法,其中气相色谱通常被用来测定乙烯的含量,高效液相色谱以其快速分析、高灵敏度、高选择性及高重复性等特点广泛应用于除乙烯外其他植物激素的测定。
EKLUND等利用微透析的方法在挪威云杉上进行活体取样,通过高效液相色谱、紫外—可见分光光度计等测定了挪威云杉茎形成层玉米素核普、乙烯的含量。传统测定植物激素的方法其激素提取及分离纯化过程较为复杂繁琐,费时费力,稍有操作不当极易造成样品中待测激素的浪费,并且很难实现多种植物内源激素的同时测定。相比较而言微透析取样测定植物激素操作简单易行,避免了样品前处理造成的干扰和缺失,对植物体干扰较小,且可以进行活体取样测定,能更加真实的反映植物体内激素含量变化情况。
二、^范文提纲
1 引言
2 微透析及其取样优越性
2.1 微透析原理
2.2 微透析技术优越性
3 微透析测定植物内源激素的试验研究
3.1 材料与方法
3.1.1 试验材料
3.1.2 色谱条件
3.1.3 激素标准溶液的配制
3.1.4 植物激素透析液样品的获取
3.1.5 微透析探针体外回收率的测定
3.2 结果与分析
3.2.1 植物激素标准品定性分析
3.2.2 峰面积-浓度一元线性回归分析
3.2.3 透析液激素样品测定
3.2.4 透析液样品加标回收率的测定
3.2.5 透析液样品稳定性的测定
3.3 讨论
4 结论
三、参考文献
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[3]谢毅,凌家俊,古锦辉. 羟基喜树碱微透析回收率的体外研究[J]. 中国中药杂志,2012,37(10):1491-1493. 
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[12]胡威. 微透析技术在秸秆还田化感作用研究中的初步应用[D].湖北大学,2016.



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