脑微透析技术在丹红注射液药动学中的应用研究开题报告

（一）丹红注射液研究现状

丹红注射液的主要成分是中药丹参和红花的提取物。丹参味苦，性微寒，归心，肝经，通血脉，散疲结，为君药；红花味辛，性温，归心，肝经，化癖血，通经络[1]。在丹红注射液中红花作为臣药，与丹参相辅祛疲生新，除邪而不伤正，共奏活血化疲、通脉舒络之功[2]。

丹红注射液对冠心病、心肌梗死、脑血管硬化等心脑血管疾病具有较好的疗效。适用于游血闭阻所致的胸癖及中风，在临床上应用越来越广泛，用于治疗心脑血管等多种疾病[3]。因而开展本项目研究有助探讨该药对脑缺血疾病的作用机制，开拓治疗该病的思路，并为丹红注射液的药效研究和丹红配伍的中药新药开发奠定了基础。

丹红注射液中的主要水溶性有效成分如丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸、丹酚酸B和丹酚酸A等均具有抗心肌缺血及抗缺氧的作用，但作用强度有所不同，丹酚酸A、B的活性较丹参素和原儿茶酸更强，且丹酚酸A是目前已知最强的抗氧化化合物之一[4]。而现有关于丹红注射液的国家药品标准仅对丹参素和原儿茶醛两种成分有含量限度的规定；文献报道中虽有指纹图谱的建立，但基本只关注于丹参素、原儿茶醛或丹酚酸B的含量测定，为此本实验建立了一种高效液相色谱-二极管阵列检测器方法用于丹红注射液中6种水溶性有效成分的同时定量[5]。此外，由于丹红注射液中含有的黄酮类化合物也有抗脑缺血损伤、抗心肌损伤、抗氧化和抗血小板聚集等作用，故本实验也同时测定了丹红注射液中总黄酮有效部位的含量，为丹红注射液质量的评价和控制提供更全面的依据。

（二）脑微透析技术及其在生化指标检测的应用

Microdialysis，MD（微透析）[6]技术是一种在不破坏生物体内环境的前提下，对生物体细胞间液的内源性或外源性物质进行连续取样和分析的检测技术。微透析取样技术现已在中药局部或整体药动学研究中得到一定的应用，与其他药动学方法相比微透析优点明显，实时、活体、原位，对动物造成的损伤小，少量动物即可获得大量精密数据，一定程度上减少了中药作用于不同动物的个体误差，降低了研究难度。

但大多研究仅限于对单成分的研究，如化学药物、中药单体等。中药是一个复杂的整体，中药复方更为复杂，仅使用一个成分作为指标并不能准确说明中药的药动学变化规律，能否将微透析技术应用于中药药动学研究，使得透析液中包含多种中药化学成分并同时进行检测是一个值得探索的问题。而探针的回收率是将微透析技术应用于药动学研究的一个关键[7]。丹参中丹参素、原儿茶醛、咖啡酸和迷迭香酸等水溶性成分均具有抗心肌缺血及抗缺氧的作用，而HSYA（羟基红花黄色素A）是红花药理功效的最有效水溶性部位。本实验以丹红为模型药物，对其回收率的体外测定方法及影响因素进行研究，进而对微透析技术应用于中药复方药动学研究进行探索。

脑微透析技术在检测生化指标主要有神经递质类和能量代谢物质量两部分。脑细胞外液中神经递质及其代谢产物受脑缺血影响，其中包括（Glu）谷氨酸、（Asp）天冬氨酸[8]、CEK-8（缩胆囊肽-8）等EAA（兴奋性氨基酸）；GABA（y-氨基丁酸）、Tau（牛璜酸）、Gly（甘氨酸）等IAA（抑制性氨基酸）；DA（多巴胺）、NA（去甲肾上腺素）、（5-HT）5-轻色胺等单胺类递质以及Ach[9]（乙酷胆碱）、组胺等。微透析技术可以直接观察动物模型脑细胞外液中神经递质等的动态变化，使相关假设有了实验依据[10]。过去几年，大量研究将微透析与HPLC结合，釆用结扎小鼠双侧颈动脉造成脑缺血模型，发现脑缺血小鼠脑内EAA与IAA均升高，且IAA升高的幅度大于EAA，推测这是对EAA过量释放的保护性反应，拮抗EAA的兴奋毒性[11]。近年来，人们还把研究重心转移至不同神经递质间相互联系上，这有助于从一个新的角度去了解脑缺血的本质。

二、^范文提纲

一、前沿

二、丹红注射液有效成分和有效部位的质量控制

（一）实验材料与方法

（二）实验仪器与设备

（三）实验方法

（四）实验结果

（五）分析与讨论

三、丹参红花微透析回收率的体外测定及影响因素

（一）实验材料与方法

（二）实验结果

（三）分析与讨论

四、丹红注射液药效学研究

（一）实验材料与方法

（二）实验结果

（三）分析与讨论

五、结论

参考文献

三、参考文献

1.郑素会，刘增娟，郝哲.丹红注射液的临床研究概况[J].现代中西医结合杂志，2009，18（28）：3520-3522

2.张英锋，王燕革，马子川，等.丹参活性化学成分的研究.[J]化学世界，2014（10）：638-640

3.祝美珍，胡国恒，肖健.径基红花黄色素A的应用研究进展[J].中西医结合心脑血管病杂志，2007，5（11）：1108-1109

4.张川，毛静远，王贤良，等.丹红注射液治疗心力衰竭的系统评价[J].中华中医药杂志，2010，25（12）：1956-1960.

5.王丹，石力夫，胡晋红.微透析技术探针回收率的影响因素研究进展[J].国际药学研究杂志，2008，35（4）：261-265.

6.张川，毛静远，王贤良，等.丹红注射液治疗心力衰竭的系统评价[J].中华中医药杂志，2013，25（12）：1956-1960

7.齐丹丹，潭晓杰，贾英，等.注射用丹红（粉针剂）色谱指纹图谱研究[J].药物分析杂志，2007，27（4）：518-521

8.辛世萌，刘远洪，聂志余，线栓长度直径及大鼠体重与线栓法大鼠局灶性脑缺血模型关系的研究[J].大连医科大学学报，2010，22（2）：105-107.

9.曹霞，曹秉振.线栓法复制局灶性脑缺血模型影响因素探讨[J].中国病理生理志，2010，16（2）：157-159

10.李菊，扬期东.微透析技术和丹参注射液对Wistar鼠脑缺血时海马细胞外液兴奋性氨基释放的影响[J].中风与神经疾病杂志，2015，2（5）：258-261

11.张恒义，施弘毅，王恩禹.环境温度对单胺类神经递质微透析探针回收率的影响[J].浙江大学学报（医学版），2013，38（3）：271-275.