分光光度法测发酵虫草菌多糖粉多糖含量开题报告

糖，蛋白质和核酸是三种最基本的生物物质。在生活过程中，人们长期以来就将糖作为高能物质（例如葡萄糖，淀粉和糖原）以及结构性物质（例如纤维素和几丁质）。近年来，随着分子生物学特别是细胞生物学的飞速发展，糖的许多其他生物学功能也不断被揭示和理解。糖不仅直接参与自由形式的多糖或寡糖的生命过程，而且以糖结合物的形式存在，糖结合物是由糖链与其他生物大分子（例如糖和糖蛋白）之间的共价键形成的化合物。皮肤和糖脂参与许多重要的生活活动。多糖是通过糖基化键与醛糖或酮糖连接的线性或支链聚合物，广泛分布在生物体中，例如植物，动物和微生物。它不仅是细胞的结构和能量物质，而且具有多种生理功能，广泛参与细胞识别，细胞生长，分化，代谢，胚胎发育，细胞致癌作用，病毒感染，免疫反应和其他重要活动。抗诱变，抗病毒，抗凝，抗溃疡，抗氧化，降血糖，降脂等生物活性。多糖主要来自多种来源，包括高等植物，细菌，真菌，地衣和藻类。在草药中尤其丰富。真菌多糖由于其良好的药理活性而吸引了研究人员的注意。自从日本人于1969年发现具有抗肿瘤活性的真菌多糖并引起医学界的轰动以来，世界上已经发现了真菌中抗肿瘤成分的高峰，并且虫草多糖的各个方面的研究也已开始。冬虫夏草多糖是冬虫夏草的主要活性成分之一，是冬虫夏草中含量最高的药理活性物质。抗癌作用和免疫作用引起人们极大的兴趣。当前，从天然虫草和人工培养的虫草真菌以及其他菌丝体和发酵液中分离和纯化各种多糖成分，并且对其详细的理化性质和药理活性进行了详细的研究。 

二、研究综述

在虫草细胞外多糖的提取和纯化试验中，于溢等人以4000 r/min的速度离心发酵液15分钟，然后用95％的乙醇沉淀3次上清液10小时。做好了。提取速度达到最大。赵明文等人发酵后，离心去除菌丝体，将上清液浓缩至原始体积的1/3，加入3倍体积的95％乙醇进行沉淀，并在60°C下添加恒定重量。并干燥得到虫草多糖粗品。 360虫草胞外多糖的发酵:虫草胞外多糖的发酵与一般微生物菌胞外多糖的发酵相似，李欣的研究发现，发酵过程具有典型的假塑性非牛顿流体特性，并且在发酵后期具有高粘度发酵。做吧液体会影响氧气的传输速度，停止细菌的生长并抑制多糖的合成，因此在发酵后期必须增加通气量并提高搅拌速度。 360虫草胞外多糖的发酵:虫草胞外多糖的发酵与一般微生物菌胞外多糖的发酵相似，李欣的研究发现，发酵过程具有典型的假塑性非牛顿流体特性，并且在发酵后期具有高粘度发酵。做吧液体会影响氧气的传输速度，停止细菌的生长并抑制多糖的合成，因此在发酵后期必须增加通气量并提高搅拌速度。 He Yajun等人的一项研究发现，CPL可以显着降低患有肝损伤的小鼠血清中的谷氨酸和天冬氨酸转氨酶的活性，并且对D-半乳糖引起的小鼠肝损伤具有保护作用。季晖等人对人工虫草菌丝多糖的生理功能进行的研究发现，虫草多糖（CP）在四氧嘧啶糖尿病和链脲佐菌素糖尿病的正常小鼠和模型小鼠中具有明显的降血糖作用。存在数量效应关系。在实验中，王根伟等人在大鼠中使用相同浓度的冬虫夏草水提取物和不同的药剂。结果表明，冬虫夏草水提取物可以促进某些抗体的产生并提高体液免疫力。另外，小鼠腹膜巨噬细胞的吞噬指数也很高。在对照组中。另一项研究报告说，虫草多糖可能会降低血液中的甘油三酸酯和胆固醇水平。虫草多糖具有抗肿瘤，抗辐射的作用，据报道也可诱导干扰素的产生。 

三、发酵虫草菌多糖粉多糖含量多糖的含量测定

多糖含量的测定方法主要有化学法和色谱法。其中化学法有苯酌硫酸法、葱酮硫酸法、二硝基水杨酸法等，色谱法有薄层色谱、液相色谱、气相色谱法等。其中苯酹硫酸法最为常用，多糖经过浓硫酸的作用水解成单糖，并迅速脱水，生成糖醛衍生物，该衍生物与苯酌反应生成橙黄色化合物，在490nm处比色测定其吸光值，带入标准曲线计算即可得糖含量的结果。

四、真菌多糖的纯度鉴定

多糖的纯度鉴定与普通化合物不同。纯多糖它不是指单一化学物质，而是指在一定相对分子量范围内的多糖的均质成分。多糖的结构也完全不一致。常用方法如紫外光谱扫描，凝胶过滤，比旋度、超速离心和高效液相色谱法测定多糖的纯度。紫外线扫描法是使用紫外线分光光度计对波长在180-640nm范围内的样品进行扫描，如果在260-280nm处没有吸收峰，则说明该样品不含核酸和蛋白质。凝胶过滤法可以根据凝胶孔径分离不同形状和大小的分子，并且可以通过检测洗脱液并收集洗脱峰来分离各种成分的多糖。比旋法（吴乐如是基于不同多糖在不同浓度的乙醇溶液中的不同溶解度。将样品多糖沉淀到不同浓度的乙醇溶液中，并将沉淀的多糖溶解在水中以检测比旋度）。表示多糖样品是均匀的，并且超离心方法根据离心力场中不同大小，密度和颗粒形状的沉降速率来区分多糖是否均匀且分子量相似。它应该具有，并且如果异质成分的多糖在离心力的作用下形成多个区域，则单成分多糖仅形成一个区域。高效液相色谱使用缓冲液，不同比例的混合溶剂或极性不同的单一溶剂作为流动相。使用高压注射系统将流动相送入配备有固定相的色谱柱。分离色谱柱后，它流向检测器，并通过检测器的检测进行样品分析。 

参考文献

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