微透析技术在药物动力学和药物代谢研究中的应用_开题报告

一、文献综述

（一）MD的原理

微透析技术（microdialysis，MD）是一种活体细胞外液生化物质采样分析技术。

MD的原理与普通透析技术相同，即小分子物质顺着浓度梯度通过半透膜进行扩散，只是装置精巧，可以置入小的组织空间中。通过改变半透膜的渗透性，可以筛选出相对分子质量为5000～20000范围内的化学物质。微透析的装置包括探头、导管、微量灌流泵、样品收集器和定量分析仪等。将微透析探针置于脑组织中，当灌流液通过探针时，细胞外液中相对分子质量合适的物质便会顺浓度梯度通过半透膜进入灌流液中。由于透析管中的灌流液不断流动更新，因此，跨膜浓度梯度始终存在，微透析得以持续进行。将这些物质收集起来进行分析测定。因为微透析取样时流速慢，故样品量一般只有1～10μ。另外，收集样品时，透析过程也不可避免地会稀释样品。因而样品量少、浓度低（1pmol/L～1μmol/L）是其取样特点，故常用高效液相色谱法（HPLC）和高效毛细管电泳法（HPCE）对样品进行分析。

微透析取样是在非平衡条件下进行的，所测得的透析液中化合物浓度只是探针周围样品基质中实际浓度的一部分，而我们想要获得的是组织间隙的该化合物的浓度。于是人们用体内相对回收率（relativeinvivorecovery）来修正测量值，即先测定透析管内透析物的浓度和组织间隙中透析物浓度的比值，再根据这个比值推测组织中的浓度。然而，以上对回收率的测定都是假设细胞间隙的化学物质浓度稳定的情况。事实上，随着疾病进程的改变，组织间液的浓度会有所变化。如血-脑屏障通透性改变，水肿形成，颅内压（ICP）改变，脑温度的波动和胶质细胞形成过多等均会导致探针周围化学物质浓度的改变，而先前测定的回收率显然会有所改变。因此，必须定期进行测定以修正回收率。

（二）MD的临床应用

国外MD被广泛用于脑外伤、卒中、癫痫、肿瘤等重症患者的临床监测，尤其是用于脑外伤和SAH。通过对脑外伤患者能量代谢物和氨基酸类神经递质的监测，可以在一定程度上反映病情的变化、治疗效果及估计预后等。对SAH患者监测生化代谢物，亦可反映有无出血后的脑血管痉挛，并可针对性地采取积极措施，以改善预后。国内只达石等首次报道了使用MD研究7例颅脑创伤患者脑细胞间液中葡萄糖、乳酸、丙酮酸、甘油、乳酸/葡萄糖比值和L/P比值的变化规律以及亚低温治疗对其的影响。认为MD提供了一种实时监测颅脑创伤患者脑组织细胞间液生化指标的手段。

（三）微透析技术进行药动学研究用

微透析技术将类似于人工血管的微透析探针植入到采样部位，通过探针膜内外的浓度差使被采样物质借助浓度梯度被动扩散进探针内，从而被灌流液连续带出，实现活体采样的目的。微透析技术最早应用于生物采样，如对神经递质等内源性物质的实时监测，完成了其他采样手段难以完成或胜任的采样工作，其本质是一种“膜采样”和“膜分离”技术，所采集样品无需前处理可直接进样分析，兼有“采样”与“纯化”的双重作用，大大减少样品前处理过程所带来的误差与变异，减轻劳动强度; 每个实验动物即为完整样本，获得完整药-时曲线，大大节约实验动物，减轻动物福利组织压力及伦理学制约。微透析技术作为优良的采样技术，其优势非常突出，在生命科学研究中的应用越来越广泛，应用于药动学研究是其最新发展，广度和深度不断拓展。根据作者几年来采用微透析技术药动学研究的实践与思考，发现微透析技术也具有特定局限性。因微透析探针膜材料的性质及灌流液的水性特征，其天然的适用于水溶性、小分子物质采样，限制了应用，如能突破制约其应用的理论和实践困境，则适用性将大大拓宽。

二、^范文提纲

1 绪论

1.1 研究背景

1.2 研究意义

1.3 研究内容

2 微透析技术的简介

2.1 微透析技术的原理

2.2 微透析技术的特点

2.3 微透析技术的优点

2.4 微透析技术的局限性

3 微透析技术的定量问题

3.1 外推至零流速法

3.2 极慢流速法

3.3反透析法

3.4 零净流量法

3.5 释放量法

4 微透析技术在药物代谢和药动学研究中的应用

4.1 研究药物向中枢神经系统（ C N ）S 分布和转运

4.2 研究药物在外周组织和器官中的药动学

4.3 药物蛋白结合研究

结论

三、参考文献

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