灵芝多糖的提取工艺研究_开题报告

   灵芝多糖提取工艺的研究

采用正交试验优化纤维素酶﹑果胶酶和木瓜蛋白酶对灵芝 (Hericium erinaceus)菌丝体多糖酶解提取的工艺参数，然后在优化酶解条件下，依次采用纤维素酶﹑果胶酶和木瓜蛋白酶分步处理灵芝菌丝体提取其生物多糖，并与单一酶解提取法和传统热水浸提法进行对比。结果表明，纤维素酶﹑果胶酶﹑木瓜蛋白酶的最佳提取工艺参数依次为加热时间为150min，初始pH值调至2，加热温度40℃，加酶量为1.4%；加热时间为180min，初始pH值调至4，加热温度50℃，加酶量为1.4%；当加热时间为180min，初始pH值调至4，加热温度50℃，加酶量为1.2%。实验证明，在此条件下，灵芝菌丝体多糖含量可达3.61%。通过中试放大研究，可使灵芝菌丝体多糖含量达到3.26%。在对灵芝菌丝体多糖产业化提取过程时，按经济核算的最佳工艺可使灵芝菌丝体多糖含量为3.44%。

近年来，药理学和免疫学的多方研究表明，灵芝多糖芝扶正固本最有效的成分之一，具有广泛的药理活性，排毒、抗放射，提高肝脏、骨髓合成dna、bna的能力，抗肿瘤增强机体免疫等效果。因此多糖的提取为广大科研人员药研制者所重视，他们不断研究和探索灵芝多糖提取的方为弄清灵芝多糖的化学成分提供有力的理论依据，同时为许多疾病患者带来福音。

从灵芝液体发酵产物中可提取获得发酵液胞外多糖和菌丝体胞内多糖。胞外多糖溶于发酵液中，易于提取，发酵结束后将发酵液直接浓缩醇沉即得到胞外粗多糖。菌丝体胞内多糖存在于细胞壁或者胞间质中，一般将灵芝菌丝体粉碎后水提醇沉，提取可得到胞内粗多糖。

本专题研究各单因素对灵芝菌丝体粗多糖提取率的影响，确定灵芝菌丝体粗多糖的最佳提取工艺，为灵芝多糖的纯化提供材料。

关键词：灵芝菌丝体；多糖；提取

1.1 原料、试剂材料及仪器

1.1.2试剂材料

杭州产95%(V/V)药用乙醇；

其它试剂均为分析纯。

1.1.3仪器

METTLER TOLEDO电子天平（MAX=210 g, d=0.001 g）

METTLER TOLEDO pH计

Jing Li LD5-10型低速离心机

ZFQ-85A型真空浓缩装置，上海医械专机厂

Thermofisher型冷冻高速离心机，法国

NN-K653S型微波炉，日本松下

SPECTROPHOTOMETER VIS-7220可见分光光度计

XDD型高压灭菌锅  

Labconco真空冷冻干燥装置，美国

GVDV300 三频恒温超声波清洗器，江苏昆山超美

1.2实验设计与方法

1.2.1提取工艺流程

1.2.2多糖含量测定

2生物酶辅助提取：

2.1灵芝菌丝体多糖多因素酶解提取工艺正交实验

三、参考文献

[1] 袁亚宏，岳田利，王云阳，等. 灵芝菌丝体营养液提取工艺研究[J]. 中国食品学报, 2005, 2(5): 65-68.

[2] 刘梅生,孙宏斌. 猴头菌的药用价值概述[ J ]. 中国食用菌, 1999,18 (1) : 24～25.

[3] 吴云艳, 宋慧, 马福.猴头菌属(Hericium)真菌多糖的研究进展[J].吉林农业大学学报, 2005, 27(6): 621- 626.

[4] 蔚荣海, 崔喜艳, 于少华.基础生化实验与技术[M].长春: 吉林大学出版社, 2000.42- 43.

[5] 杨炎，周晶艳，等.正交试验法提取灵芝菌丝体多糖的研究[J].食用菌，2000，10（5）：16-18.