蛋白、多肽的微乳给药系统开题报告

（一）国内研究现状

    蛋白质、多肽类药物常温下稳定性差, 在体内易降解, 半衰期很短，因此，新型释药系统在蛋白质、多肽类药物的研究应用中非常活跃，其中微乳是近年来研究较多的一种给药系统。综合国内研究现状，微乳给药系统在多肽、蛋白质类药物给药方面有着良好的优势：可以保持蛋白质、多肽类药物的稳定性,使药物吸收迅速、完全、从而达到增强疗效,降低毒副作用,提高其生物利用度的作用。微乳作为口服蛋白多肽类药物的载体具有渗透力强并可根据分散相的量及环境温度的改变而转相以致药物自微乳中释放的特点。在多肽、蛋白质类药物的口服给药方面，微乳具有许多优点：①保护多肽、蛋白质类药物免于胃肠道中酸和酶的降解；②微乳口服后可经淋巴吸收，从而克服肝首过效应；③促进药物的吸收，提高药物的生物利用度；④微乳室温下易于制备，微乳化过程不会显著改变多肽、蛋白质类药物的生物活性[22]。

    清华大学研制出了一稳定的胰岛素口服自微乳制剂, 目前这一制剂已得到中SFDA 批准进入临床试验[5]；贾煜娇等人将微乳作为非注射剂型的载体如栓剂，应用实例有胸腺五肽微乳；孟博宇[4]等比较了2种含有不同乳化剂的w/o型微乳在大鼠不同肠段对胰岛素的促吸收作用。膜透过性差是多肽、蛋白质类药物口服生物利用度低的一个重要原因,将此类药物包裹于微乳后, 微乳中油相、表面活性剂等组分可通过提高膜流动性[25]、打开细胞紧密连接[27]等机制显著提高药物的透膜性能。王召等[28]用同位素示踪法对w/o型胰岛素口服微乳经狗十二指肠给药的体内吸收途径进行了研究,认为胰岛素微乳口服吸收的主要途径为淋巴途径。

    在微乳研究方面许多问题还有待解决, 如大量表面活性剂的使用增加了微乳的毒性, 限制了其临床应用;由于微乳对多肽、蛋白质类药物促吸收机制的基础研究仍然不够充分, 进一步改善此类药物微乳的口服生物利用度还存在一定困难;胃、肠液的稀释及微乳内组分对微乳口服后在体内吸收、分布的影响还不明确。要解决上述问题, 一方面要寻找高效、低毒、生物相容性好的表面活性剂, 如使用磷脂、胆酸盐、胆固醇为表面活性剂, 并通过工艺优化降低表面活性剂和助表面活性剂的用量, 另一方面应加强促吸收机制的研究, 从体内和体外实验两方面共同研究微乳组分的影响, 并从细胞、分子水平阐明其具体机制。相信随着各项研究的进一步深入,微乳在多肽、蛋白质类药物方面的应用将大大扩展, 将为临床提供更多安全有效的多肽、蛋白质类新药。

（二）国际研究现状

    蛋白、多肽的微乳给药系统在国外也是该领域的研究热点之一，微乳作为药物转运系统, 具有如下优点:①热力学稳定, 且可高温灭菌, 易于制备和保存;②O/W型微乳作为疏水性药物的载体, 药物分散性好, 能提高药物的溶解度和生物利用度, 可延长水溶性药物的释放时间, 起到缓释作用;③与油剂相比黏度低, 注射时不会导致剧烈疼痛;④为多肽和蛋白等稳定性差的药物提供保护作用;⑤与其他纳米制剂相似, 对药物的药代动力学产生影响, 并起到缓释和靶向作用[ 23, 24] 。

     临床主要应用实例有环孢素A、胰岛素、醋酸亮丙瑞林、降钙素等。Constantintides[14]综述了以生育酚为材料的微乳可作为抗体药物输送载体的优点，如可提高其生物利用度；山道士公司的环孢素微乳制剂— 新山地明增加了环孢素在消化道的吸收, 提高了血药浓度和疗效, 减少了给药剂量, 降低了不良反应, 已获FDA 许可；Wang JL 等[12] 制备了包封胰岛素的Tween 80-Span

80/乙醇/丁酸乙酯/水体系的w/o 型微乳液, 125I同位素示踪法进行的体外释放效果显示, 此胰岛素微乳具有缓释作用；Cilek A等[26]采用不同纯度的大豆卵磷脂为表面活性剂制备了重组人胰岛素的口服微乳,发现卵磷脂纯度越高,微乳区域面积越大,而所制得的微乳在4、25、40 ℃放置6 个月的过程中,其各种理化性质均未出现明显变化,表明所制得的微乳稳定性好；Ho HO等[3]以HLB在8 ～ 13 的聚甘油脂肪酸酯为表面活性剂制备了胰岛素微乳,发现将胰岛素包裹于微乳后,在室温和4 ℃时胰岛素都表现出很好的稳定性,体外酸降解实验显示, 微乳在37 ℃时能保护胰岛素免受酸降解至少达6 h。Sharma[21] 等以溴代双二十八烷基铵(DMABA)为表面活性剂，l，2- 丙二醇(PG)为助表面活性剂，三乙酸甘油酯(TA)为油相制备了胰岛素微乳，荧光光潜和圆二色性法验证了包裹于微乳中胰岛素的稳定性，并且其口服生物利用度显著提高；Cho YW等[29]研制出的胰岛素微乳,水相中含胰岛素和蛋白酶抑制剂, 油相中含胆固醇、磷脂和游离脂肪酸, 3 例IDDM 患者按1 IU · kg -1 剂量服用后血糖均明显下降, 此临床试验显示微乳用于胰岛素的口服给药具有较好的应用前景。微乳能显著增加醋酸亮丙瑞林的生物利用度, 且大鼠口服醋酸亮丙瑞林微乳后生殖器官重量明显下降, 显示出与醋酸亮丙瑞林长效注射剂lupron 相似的拮抗活性[13]；降钙素是一种水溶性的大分子多肽, 直接口服生物利用度低, 将其制成含有中等链长的甘油酯、中等链长的脂肪酸及其相应钠盐的w/o型微乳,大鼠十二指肠给药, 降钙素的吸收率大幅提高[14]。

    近来, 有研究者制备出了水溶性多肽、蛋白质类药物包封于油相的自微乳制剂, 是利用固体分散体技术, 先将此类药物在单分子水平上分散于如磷脂的两亲性物质中, 然后将这一固体分散体溶于油相[15],体内[16]、体外[17]实验结果显示此类自微乳应用于多肽、蛋白质类药物的口服给药具有较大潜力, 是一个值得关注的领域。

二、^范文提纲

引言：蛋白多肽的微乳给药系统研究背景和研究现状

1    微乳给药系统的介绍

2    蛋白、多肽的微乳口服给药系统的优点

2.1　保护药物免受胃肠道中酸和酶的降解

2.2  通过淋巴吸收克服肝首过效应

2.3  提高膜流动性增加药物的透膜性能

3    蛋白、多肽的微乳非口服给药系统的研究实例

3.1  胸腺五肽微乳直肠给药

3.2  胸腺法新微乳制剂分别采用皮下注射、十二指肠灌注、直肠灌注三种不同给药途径给药

4    临床应用实例

4.1  胰岛素微乳制剂

4.2  环孢素A微乳制剂

4.3  蝮蛇抗栓酶微乳制剂

4.4  其它微乳制剂

5   结语

三、参考文献

[1] 陆彬主编.药物新剂型与新技术.北京：人民卫生出版社，2005年7月第2版第5次印刷，第758页

[2] 王桂云，王桂兰，柳明洙主编.生物化学.北京：人民军医出版社，2009年11月第3版第1次印刷，第10页

[3] Ho HO , H siao CC , Sheu M T .Preparation of microemulsions using polygly cerol fat tyacid es ters as surfactant for the delivery of protein drugs [J] .Journal of Pharmaceutical Sciences ,1996,85(2):138-143.

[4] 孟博宇, 平其能, 熊净, 等.胰岛素微乳大鼠肠道给药降糖作用

的研究[J] .中国药科大学学报, 2006 , 37 (4):304-307 .

[5] Ma EL, Ma H, Liu Z, et al.Invitro and invivo evaluation of anovel oral insulin formulation [J] .Act a Pharmacologica Sinica,2006,27(10):1382-1388.

[6] Hesselink DA , Gregoor PJH S , Weimar W.The use of cycl- osporine inrenal transplant ation [J] .Transplant ation Proceedings, 2004,36 (2,Suppl 1):S 99-S 106.

[7] 陆彬.药物新剂型与新技术[M].2 版.北京:人民卫生出版社, 2005:79.

[8] Mueller E A, Kovarik JM , Vanbree JB , et al .Improved dose linearity of cyclosporine pharmacokinetics from a microemu- lsion formulation [J] .Pharmaceutical Research,1994,11(2):301-304.

[9] Kovarik J , Mueller E ,Van Bree J ,et al.Reduced inter -and intrain dividual variability in cyclosporine pharmacokinetics from a microemulsion formu lation[J] .Journal of Pharmaceuti cal Sciences,1994,83 (3):444-446.

[10] Mueller EA , Niese D, Mellein B.Cyclosporine microemulsion

formulation (Neoral) in transplantation :Pharmacokinetic/pharmacodynamic relationships [J].Transplantation Proceedings, 1998,30(5):1694-1696 .

[11] 陈建海, 任非, 李宝红, 等.胰岛素口服制剂的研究进展[J] .

中国医药工业杂志, 2002 , 33 (1):42-45 .

[12] Wang JL , Wang ZW , Liu F , et al.Preparation and invitro releasetest of insulin loaded W/ O microemul sion [J] .Journal of Dispersion Science and Technology ,2008 ,29 (5):756-762 .

[13] Zheng JY , Fulu MY .Decrease of genital organ weights and plasmatest osterone levels inrats following oral administration of leuprolide microemulsion [J] .International Journal of Pharmaceutics , 2006,307(2):209-215.

[14] Constantinides PP, Welz el G , E llens H , et al.Water-in-oil microemulsions cont aining medium-chain fatty acids/ salts:form ulation and intestinal absorption enhancement evaluation [J] .Pharm Res ,1996 , 13(2):210-215.

[15] Rao SVR, Shao J .Self-nanoemulsifying drug delivery systems(SNEDDS)for oral delivery of protein drugs I .Formulation development [J].International Journal of Pharmaceutics,2008,362(1-2):2-9.

[16] Rao SVR, Yaju rvedi K , Shao J .Self-nanoemulsifying drug delivery system (SNEDDS)for oral delivery of protein drugs III.Invivo oral absorption study [J].International Journal of Pharmaceutics,2008,362 (1-2):16-19.

[17] Rao SVR , Agarw al P , Shao J .Self-nanoemulsifying drug delivery systems (SN EDDS)for oral delivery of protein drugs II.Invitro transport study [J].International Journal of Pharmaceutics,2008 ,362 (1-2):10-15.

[18] Ma EL , Ma H , Liu Z, et al.Invitro and invivo evaluation of a novel oral insulin formulation [ J] .Act a Pharmacologica Sinica,2006, 27(10):1382-1388.

[19] Ho HO , H siao CC , Sheu M T .Preparation of microemulsions using

polyglycerol fatty acid esters as surfactant for the delivery of protein drugs [J] .Journal of Pharmaceutical Sciences,1996,85 (2):138-143 .

[20] 刘敏,黄绳武. 蛋白多肽类药物非注射制剂研究现状[J].中国生化药物杂志,2007,28(2):142-144. 

[21] Sharma G, Wilson K, vander Walle CF, et al. Microemulsions for oral delivery of insulin:design, development and evaluation in streptozotocin induced diabetic rats [J]. European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics,2010,76 (2):159-169.

[22] 胡雄彬,陆秀玲,唐甜甜等. 微乳在多肽、蛋白质类药物口服给药中的应用[J]. 中南药学,20l1,9(3):206-209.

[23] Azevedo, CHM, CarvalhoJP, Valduga, CJ, etal.Plasmakinetics and uptake by the tumor of a cholesterol-rich microemulsion(LDE) associated to etoposide oleate in patients with ovarian carcinoma.Gynecologic Oncology,2005, 97(1):178.

[24] WangJunping, KozoTakayama, TsunejiNagai, etal.Pharmacokinetics and antitumor effects of vincristine carried by microemulsions composed of PEG -lipid, oleicacid, vitaminE and cholesterol.International Journal of Pharmaceutics, 2003, 251:13.

[25] 韩旻, 傅韶, 方晓玲.三七总皂苷油包水微乳的处方筛选及体内外评[J] .药学学报,2007,42(7):780-786.

[26] Cilek A , Celebi N , Tirnaksiz F .Lecithin-based microemulsion of a peptide for oral administration:Preparation , characterization, and physical stability of the formulation [ J] .Drug Delivery, 2006 , 13 (1):19-24 .

[27] 沙先谊,方晓玲.自微乳化系统对细胞紧密连接蛋白的影响[J].药学学报, 2006,41(1):30-35 .

[28] 王召, 杨金奎, 路丽芳等.胰岛素口服微乳经狗十二指肠给药的体内吸收途径研究[J] .中国药科大学学报,1997,28(6):323-325 .

[29] Cho YW, Flynn M.Oral delivery of insulin [J] .Lancet, 1989, 2 (8678-8679):1518-1519 .