微透析技术在人体脂肪代谢研究中的应用_开题报告

（一）国内研究现状

微透析(Microdialysis，以下简称MD)技术是近些年来临床上发展起来的一种新型取样技术，其原理与透析相同，可通过器官与组织中的体液进行连续、动态取样，取得的透析液较为纯净，且均为小分子物质，能与液相色谱-质谱联用技术（以下简称HPLC/MS）或高效液相色谱法（以下简称HPLC）联用,组成HPLC/MS或HPLC联用新技术进行原位在线分析，具有“微创、高效、实时、活体”等特点。在麻醉或清醒的生物体上进行深部组织的操作以及重要器官的生化研究具有重要的意义。随着近年来微透析技术在我们国内的不断发展，该项技术在临床上的推行也越来越广泛。目前微透析技术在药物代谢和中药药动学研究领域同样发挥着重要的作用。

在国内，微透析技术已被确立为一种可靠的体内工具，可用于在线测定动物和人体内几乎每个特定组织和器官间质药物浓度。自20世纪70年代首次被提出以来，MD得到了进一步发展，并且MD在制药研发中的应用原理是基于存在血液与组织间屏障，从而影响药物渗透到靶点。我们认为清楚认识MD和辅助技术提供靶点药动学是了解体内药物作用的前提。

研究微透析技术在脂肪代谢中的应用，首先要清楚脂肪组织是进行代谢研究的基础。过去有人强烈认为脂肪在代谢过程中是被动者，所以我们首先在脂肪中进行代谢研究，目的就是证明脂肪组织是活跃的代谢器官。1985年采用研究离体脂肪细胞功能的方法。目前我们利用穿刺活检技术来获得脂肪组织，该法可追溯到50年前。据报道，20世纪60年代，人们利用胶原蛋白酶法从组织标本中获得脂肪细胞，并研究体外脂肪细胞的大小和数量。实际上，当时人们所知道的关于体内脂肪组织功能的信息只停留在FFA循环水平，且通过动物实验研究甘油或FFA转化过程中的A-V平衡来研究脂肪。另外建议收集与组织间液类似的淋巴液，但淋巴结不能特异性地反映脂肪组织。此外，在组织间液中也许可利用负压吸疱技术测定超滤液中物质浓度，但该法也有缺点。酶电极法可能是监测皮下组织间液中葡萄糖的替代方法。总之，前面简单提到的研究脂肪代谢的方法都存在明显的不足，且只能部分反映细胞水平上的代谢，因此，我们需要新的方法来进行研究，MD就是研究脂肪代谢的一个很好的方法。

基于众多正在进行的MD项目和新技术，可预期该技术将会蓬勃发展。然而，更重要的是，MD已从实验室走向手术台，现在MD已可以帮助临床医生对患者进行最理想的监护，如神经外科、肝移植、整形外科，甚至可用来监测糖尿病患者的代谢变化。

（二）国外研究现状

MD已经历较长研发周期，最初可追溯到20世纪60年代，当时不同类型的载体取样技术首次用于测定药物、神经递质、介质和代谢物组织浓度。严格来讲，发明MD的美名授给了国外研究者Unger-stedt和Pycock，这两位研究者在1974年首次报道“中空纤维”的应用。另一个里程碑是Lonnroth等人在1987年所发明的MD探针校正，此项发明使准确量化EC浓度成为可能。高度敏感的化学分析法的实用性不断增加，精细导管的制造以及各种导管通过欧盟与美国食品药品管理署认证，在过去二十年里促进了MD的广泛使用，同样也促进了MD在临床药理学领域的应用。

临床脂肪代谢研究中，需要借助工具才能获得人体生理和病理生理学知识。利用MD监测实验动物大脑间质液，是对普通采血技术的补充。1987年推出皮下MD可用于测量任何低分子化合物的间质浓度。每个MD探针均需校正，可利用“零净流量”法来获得葡萄糖、乳酸和甘油的准确间质浓度。可利用Fick定律与脂肪组织血流中133Xe-清除法来估算底物的是释放值。改进探针和回收率技术可同时监测脂肪和肌肉中胰岛素和细胞因子/趋化因子的间质浓度。实际上，几乎可测定人体内每个器官组织间液中的小分子和大分子物质。因此，MD在代谢研究中的应用前途光明。

实际上，迄今为止MD已经成为一种研究和药物研发工具，应用于几乎所有的动物和人类器官及代谢系统，而且国外出版了很多值得推荐的关于MD的综述文章，包括药物研发中的PK和药效学。已经证实MD是临床前和临床药物研发的有效工具，大量的MD相关出版物也强调了这一点，除了MD，大量衍生技术在文献中均有描述，例如超滤以及开流微灌注。

未来20年，国外还可能出现几种不同系列的研究组，来研究脂肪代谢领域，利用MD对运动时、肥胖研究中、低血糖症发生停用胰岛素时和调节交感神经张力时的脂肪进行研究。研究小组详细研究了皮下脂肪的肾上腺素能调节，描述灌流液中加入的药物如何干扰脂肪分解。但这些加入的化合物中部分具有血管活性。我们推测，甘油的间质水平取决于组织产生与皮下组织扩散。因此，国外机构创立了133Xe清除技术来测定脂肪组织血流量。

二、^范文提纲

引言：微透析技术的由来以及在代谢研究中的历史背景

一、微透析技术的简介

（一）微透析技术的原理

（二）微透析技术取样分析面临的挑战

（三）微透析技术的现状分析及发展进程

二、皮下脂肪微透析技术

（一）皮下脂肪微透析技术的历史背景

（二）皮下脂肪微透析技术实验设计原理

三、微透析技术在人体脂肪小分子物质研究中的应用

（一）葡萄糖研究中的应用

（二）腺苷研究中的应用

（三）乳酸研究中的应用

（四）甘油研究中的应用

四、临床脂肪代谢中的研究

（一）皮下脂肪组织的血流量和底物释放

（二）应用大孔隙膜测定皮下脂肪组织及骨骼肌中胰岛素、生长因子及细胞因子

（三）微透析技术在骨骼肌代谢研究中的应用

五、对于未来微透析研究脂肪代谢的展望

三、参考文献

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