高效液相色谱法测定丹参中原儿茶醛的含量_开题报告

高效液相色谱法测定丹参中原儿茶醛的含量

 

一、文献综述

标准简述

     丹参为《中国药典》2015年版一部收录品种，该标准收载了丹参的来源、【性状】、【鉴别】、【检查】（水分、总会分、酸不溶性灰分、重金属及有害元素）、【浸出物】（水溶性浸出物、醇溶性浸出物）、【含量测定】（丹参酮类、丹酚酸B）、【性味与归经】、【功能与主治】、【用法与用量】、【注意】、【贮藏】及饮片相应的质量控制要求。现根据心可宁胶囊（国家食品药品监督管理总局国家药品标准WS3-B-1714-94-16）【含量测定】要求，新增原儿茶醛的含量测定，并对其测定方法进行方法学研究。

（二）质量标准研究现状与展望  

    丹参呈类圆形或椭圆形的厚片。外表皮棕红色或暗棕红色，粗糙，具纵皱纹。切面有裂隙或略平整而致密，有的呈角质样，皮部棕红色，木部灰黄色或紫褐色，有黄白色放射状纹理。气微，味微苦涩[1]。丹参的活性成分可分为脂溶性丹参酮类和水溶性丹酚酸类，水溶性丹酚酸类的主要成分为丹酚酸 B、丹参素、原儿茶醛，脂溶性的丹参酮类的主要成分为迷迭香酸、二氢丹参酮、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA。现代药理学研究表明，丹参中酚酸类和丹参酮类成分均具有显著的生物活性［2-4］ ，因此可以通过测定这些化合物的含量来全面评价丹参的质量。原儿茶醛是丹参中主要的水溶性成分之一，作为常用指标控制丹参药材及其相关复方制剂的质量。研究表明原儿茶醛具有抗动脉粥样硬化、保护心肌细胞、抗血栓形成、对神经细胞的保护及抗病毒等作用［5］。为了有效控制丹参的质量，采用高效液相色谱法测定丹参中原儿茶醛含量，该方法操作简便 ,快速 ,准确 ,重现性好。

丹参中有效成分功效及其特点

现代生物、化学及药理学研究表明，传统中医药对丹参功效的总结由其化学 成分作为物质基础，作为一种较早进入实验研究的中药，它的研究模式有助于其他中药的开发研究。但由于中药成分复杂，其发挥作用的量效关系才进入初步研 究阶段，丹参发挥作用的成分还需要深入研究［6］。 

 丹参祛瘀止痛、活血通经、清心除烦之功效与抗心肌缺血、抗脑缺血、抗血栓、改善微循环、促进组织的修复与再生, 以及镇静镇痛等多种药理作用有关。目前, 国内对丹参的化学成分、药理和临床都进行了初步研究［7］。

丹参中原儿茶醛(Protocatechnic aldehyde，PCA)具有广泛的药理活性，但亦有研究表明PCA有一定的毒性，是否可作为含丹参制剂的质量监控指标值得探讨。PCA(8 mg/kg)具有明显的心脏毒性，能明显降低左心室收缩峰压而升高左心室舒张末压，加重心肌缺血病变，对左心室有害无益。质量控制时，应注意建立相应的PCA限量检测项目，从而提高丹参制剂治疗缺血性心脏病的疗效，避免不必要的毒副作用发生。相信随着PCA药理活性的深入研究以及作用机制的不断阐明，将加快高效低毒相关新药的开发进程［8］。

    丹参酮ⅡA作为中药丹参的脂溶性成分的代表, 具有多种功效 ,除对心脏和血管作用、抗肿瘤、清除氧自由基和神经保护作用外, 还有抗菌、消炎、诱导细胞分化、雌激素样作用等广泛的药理作用 。它的应用有待进一步开发 , 尤其是对中枢神经系统疾病防治具有乐观的应用前景［9］。

 （三）高效液相色谱法测定丹参中原儿茶醛含量的研究依据

丹参药材以及制剂的质量控制研究已成为丹参研究的热点，而丹参有效成分的多样性一直其丹参药材质量控制的难点，寻找有效准确方便的质量控制方法是研究的根本目的。高效液相色谱法在对于中药材有效成分研究领域应用日益广泛［10］。现阶段高效液相色谱法(HPLC)在药物分析及中药指标成分定量等方面有着广泛的应用，是一种常用的分析技术，具有普遍性，是目前药品质量控制的主要手段之一。    

二、^范文提纲

（一）仪器与试药

1、药品名称及样品来源

2、仪器与试药

   岛津LC-20A高效液相色谱仪，VWD检测器，Kromasil 100-5-C18 250*4.6mm色谱柱。

原儿茶醛对照品：（110810-201608，供含量测定用99.3%，由中国食品药品检定研究院提供）。

甲醇和乙腈均为色谱纯，水为哇哈哈纯净水，其余试剂为分析纯。

（二）含量测定分析方法研究

1.指标成分的选择

2.仪器和试药

2.1仪器设备

2.2样品、对照品及试剂来源

方法条件的选择

3.1色谱条件的选择

3.2波长的选择

3.3流动相的选择

3.4色谱柱的选择

对照品溶液的制备

供试品溶液的制备

提取条件的选择

6.1提取方法的选择

6.2提取溶剂浓度的选择

6.3提取时间的比较

6.4提取溶剂量的比较

线性关系考察

精密度试验

重复性试验

10.回收率试验

11.耐用性试验

三、参考文献

     [1] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典2015年版一部[M].中国医药科技出版社，2015.

    ［2］丰成相．丹参的化学成分及药理作用概况［J］．中国民族民间医药，2012，21(2):25－26．

［3］刘艾林，李络源，王一涛，等.丹参药理学活性物质基础研究现状［J］．中国药学杂志，2007，42(9):642－646．

［4］赵艳威，杨宣，谢文利，等．丹参素及原儿茶醛研究进展［J］．武警医学院学报，2009，18(3):260 －262．

［5］陈继舜,陈琴华 . HPLC 测定银丹心脑通软胶囊中原儿茶醛的含量[J]. 吉林中医药 ,2015,35(1):71-73.

［6］李二平，孙建宁.中药丹参研究进展[J].中华中医药学会中药化学分会第九届学术年会^范文集（第一册）.2014.366-369

［7］王炜辰，吴学辉，郑芳.丹参药理学研究进展[J].海峡药学.2013. 24-25

［8］张翠英，郭丽丽，王阶.原儿茶醛的药理研究进展[J]. 中国实验方剂学杂志.2013.338-342

［9］张萌涛，钱亦华，唐安琪.丹参酮ⅡA药理作用的研究进展[J].医学综述.2010.2661-2664

［10］王招玉，徐依萍，焦蓉，赵娜，李将.HPLC法同时测定丹参中原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸A的含量[J].中国药师.2014.1473-1475