微透析技术在中医药领域的研究进展_开题报告

1.1 选题的背景、意义

微透析（microdialysis）是灌流采样与透析相结合的新型生物采样技术，诞生于20世纪70年代。1972年微透析第一次应用于恒河猴脑内神经递质释放的测量[1]，标志着这一技术的初步形成，也标志着微透析技术在神经药理和药物研究领域中广泛应用的开端。30多年来，经过科研工作者们的深入探究和研究，微透析技术不断完善，应用范围日益扩大，尤其在医药研究领域的应用更显示出活体微创、动态观察、定量分析、采样量小的特点，简单地说，就是创造一个“人造血管”，使化合物在浓度差作用下扩散而出此“人造血管”。[2]微透析技术因此也成为解决临床医疗和医药研究中一些关键问题不可缺少的手段之一，引起了医药工作者的广泛关注。[3]但微透析的探针在植入时会造成局部的轻微损伤，特别是对于急性实验可能有一定程度的影响。也存在采用的回收率的方法不同，造成检测浓度极低的生理活性物质时不同作者的报告有时可能会相差近一个数量级。所以在采用微透析技术时，要求探头必须准确插在同一取样部位，不适合对很小的脑内神经核团及直径或厚度不到1毫米的植物根、茎、叶采样。[4]

目前，对于选择运用微透析技术还有一个困扰人们的问题，就是对探针的回收率的确认。探针回收率是指从灌流液中流出的待测组分与标准浓度之比的百分数。而影响探针回收率的因素有取样部位的生物学性质、透析膜的物理性质（材料、孔径、长度及几何形状等）、待测物质的分子量、灌流速度、压力、生物体本身的健康条件和生物节律等。目前测定的回收率的方法主要有以下几种：外标法、内标法、反透析法、低流速法。探针类型一般分为并联型和串联型，并联型探针根据结构不同，又分为同心圆式和套管式；根据材料分刚性探针和柔性探针，分别用于脑内和静脉的微透析取样。[5]串联型探针有线性和环形，适用于皮肤、肌肉、肿瘤等外周组织取样，且以线性探针最为常用。此外还有1种分流探针适合于血液和胆汁中取样。[6]

1.2 微透析技术在中医药领域的研究进展

作为新发展起来的一项采样技术，已广泛应用于人体和多种实验动物，如猴、鼠、猫、狗、猪、羊和兔等。取样部位几乎遍及了体内各种组织，如脑、心、肝、肾、皮肤、血液和肌肉等。在动物清醒状态下开展分子水平的研究，并且在针刺麻醉、兴奋剂检测、吸烟危害、老年痴呆，巴金森氏症和植物人等神经系统疾病的发病机理和治疗等研究领域取样分析法中有不可替代的作用。同时微透析技术也很适合药物和毒物的代谢动力学研究。[7]

目前在中医药的研究应用也是2000年左右的事情，属于比较新的应用领域,并且由于其能够连续、微量采样等优点在近几年可能依然处于发展的高潮阶段。

现主要研究中医药经皮微透析药物，如活血止痛膏。活血止痛膏应用历史悠久，能够活血止痛、舒筋通络，临床上广泛用于筋骨疼痛、肌肉麻痹、痰核流注、关节疼痛等的治疗。其中牡丹皮为方中君药，与当归、川穹等配伍能够活血化瘀止痛，胡椒，丁香等辛温之品，加强散寒止痛之功。丹皮酚、丁香酚和胡椒碱分别是牡丹皮、丁香和胡椒的主要活性成分，均为活血止痛膏中的有效成分。杨畅、白洁[8]等人用CMA30线性微透析探针研究建立了丹皮酚、丁香酚、胡椒碱体内外微透析回收率的测定方法，考察微透析技术应用于活血止痛膏的经皮药动学的情况。利用体外测得回收率或反透析测得回收率进行浓度校正对结果都没有较大影响，因此，两种微透析方法均可用于采集部位的浓度校正。如花椒挥发油的促透作用的研究。花椒为芸香科植物花椒或青椒的干燥成熟果皮，性温味辛，其作用类似现代的经皮促透剂。兰颐、杨琳[9]等人利用CMA30线性微透析探针经皮微透析技术研究花椒挥发油的促透作用的研究。实验中川穹嗪的适宜亲脂性使其在未加促透剂条件下即有较好的透皮吸收，而另一种葛根素为亲水性药物，透皮吸收较差，在未加促透剂的正常条件下难以有效监测其透皮吸收含量，但在花椒挥发油加入后，葛根素的在体透过量增加明显，这也说明花椒挥发油对葛根素有良好的透皮效果。

此外运用微透析技术研究中医药在肝胆、脑等组织的情况。如利用微透析技术研究天麻素、天麻苷元在肝阳上亢偏头痛在大鼠体内的药动学研究。王美静、刘明平[10]等人将微透析应用于天麻在肝阳上亢偏头痛模型大鼠药动学的研究，使用血管探针获得了肝阳上亢偏头痛大鼠病理模型的药动学参数，也为微透析方法在中药药动学研究方法提供参考。又如五味子甲素的代谢情况。五味子甲素是中药五味子中的木脂素类成分之一，具有诱导肝微粒体细胞色素P450酶活性进而增强肝脏的解毒功能、降低血清转氨酶、阻断多种毒性物质对肝细胞膜的损伤等作用，但以往不能连续动态取样，故诸明娜[11]等人采用血液微透析技术探究五味子甲素在大鼠体内的代谢过程，得到五味子甲素的代谢特点，属于快速代谢型药物。又如阿魏酸、川穹嗪在脑中的回收率的测定。阿魏酸（FA）、川穹嗪（TMP）分别是当归、川穹的主要生物活性成分之一，均为补阳还五汤中的指标性成分。近年来，国内关于阿魏酸和川穹嗪的研究表明这两种物质均对脑缺血再灌注损伤具有保护作用，但由于脑局部的药物量效关系并不清楚，故廖卫国、王利胜等人就利用脑微透析技术对两种生物活性物质进行测定，优化体内微透析取样参数，实验证明方法可行。[12]

二、^范文提纲

1绪论

1.1前言

1.2微透析技术概述

1.2.1微透析技术的基本原理

1.2.2微透析系统的构成

1.2.3微透析技术的特点

1.2.4回收率的方法

2微透析技术在中医药方面的应用

2.1微透析经皮吸收技术的应用

2.1.1微透析技术在体内外微透析回收率的测定方法

2.1.2微透析技术在药物促透作用的研究应用

2.2微透析技术研究中药在肝胆、脑等组织的情况

2.2.1微透析技术在中药药动学研究中的应用

2.2.2微透析技术在动物体内的代谢过程研究的应用

2.2.3微透析技术在在脑组织的回收率测定

3 展望

三、参考文献

Delgado J M,Defeudis F V,Roth R H,et al.Dialytrode for long term intracerebral perfusion in awake monkeys[J].Arch Int Pharmacody Ther, 1972, 198(1):9.

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[3] 高亚娟.微透析技术在药学领域的应用[C].//第六届海南省科技论坛“医药科技创新与药品质量安全”专题论坛暨海南省药学会2012年学术年会^范文集.2012:234-238.

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[6]韩冬，班春林，崔黎丽，等.微透析技术及在药学中的应用进展[J].药学实践杂质，2005,23（2）：139-142.

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[8]杨畅,白洁,杜守颖,崔雅华,张勤帅,马军明. 丹皮酚、丁香酚、胡椒碱经皮微透析体内外回收率的研究[J]. 中国中药杂志,2016,41(22):4247-4253.

[9]兰颐,杨琳,史大勇,王英新,吴学萍,谢璇,吴清. 基于微透析技术的花椒挥发油在体经皮促透作用研究[J]. 中国中药杂志,2017,42(14):2676-2682.

[10]王美静,刘明平,李盛青,黄志云,毛禹康,郭思宇,柯国韩. 微透析技术研究天麻素、天麻苷元在肝阳上亢偏头痛大鼠体内的药动学[J]. 中药新药与临床药理,2017,28(06):753-757.

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[12]廖卫国,王利胜,范文涛,李周,余健烨,廖丰蕴,吴银爱,巴文强,王玎. 阿魏酸、川芎嗪微透析脑探针回收率测定及影响因素研究[J]. 中国中药杂志,2015,40(21):4275-4280.