自噬在缺血性脑损伤中的调节作用研究_开题报告

一、立论依据

（包括研究背景及研究意义，并附主要参考文献及出处）

（一）研究背景及意义：

    脑卒中作为全球性的健康问题，已经成为威胁人类健康和生命的第四位杀手。过去三十年，随着改革开放，我国人民生活方式逐渐西化，同时伴随着医疗水平的提高，老年人口比例增加，脑卒中患者数量明显增加，其发病急促，死亡率、致残率高，在中国这个人口众多的国家中，脑卒中已经成为危害人民健康的关键杀手，给我国建设小康社会，实现中华民族伟大复兴梦蒙上了阴影。约有88%脑卒中是因急性脑缺血引起，缺血性脑卒中造成脑损伤的机制十分复杂，目前尚未被完全阐述清楚。脑卒中治疗时间窗窄，且经过美国食品与药品管理局FDA 认证的有效药物只有纤维组织酶原激活剂(tissue plasmagen activator, TPA)一种，大约只有不到 5%的患者能够得到及时的溶栓治疗，大部分患者将会残疾或者死亡，给家庭和社会带来了沉重负担。 脑卒中主要分为两类：一类是缺血性脑卒中，一类是出血性脑卒中。缺血性脑卒中又称脑梗死，主要是各种原因导致脑动脉血流中断，局部脑组织发生缺氧缺血性坏死，而出现相应神经功能缺损。缺血性脑损伤的病理机制复杂,  目前大家对其发病早期的分子机制主要有自噬反应、内质网应激反应以及钙超载。本文通过建立动物模型，探讨自噬反应在缺血性脑损伤中的调节作用。

研究意义

自噬是一种细胞内成分自我降解的过程，包括自噬的诱导、自噬体膜的形成、自噬体的形成、自噬体与溶酶体的融合以及内容物的降解。自噬若适度激活，则促进细胞存活;若过度激活，则可加重细胞损伤，甚至导致细胞裂解和促进细胞死亡。线粒体自噬是一种选择性的自噬活动，是细胞在受到不良刺激后的一种自我调节过程，在维持细胞内环境稳定、保护细胞结构方面发挥重要作用。本实验旨在观察BNIP3在大鼠永久性大脑中动脉闭塞模型中的作用，明确其可能发生的病理生理机制，为进一步研究缺血性脑卒中提供依据。

参考文献

[1]丁培炎，王 冬，赫 曼，等． 短期禁食诱导自噬对大鼠脑缺血损伤的保护作用［J］． 中华神经外科疾病研究杂志，2013，12( 3) : 201 － 5．

[2]Ding P Y，Wang D，He M，et al． Short-term fasting induced toler-ance against focal cerebral ischemia by autophagy activation in rats［J］． Chin J Neurosurg Dis Res，2013，12( 3) : 201 － 5．

[3]Wang P，Guan Y F，Du H，et al． Induction of autophagy contrib-utes to the neuroprotection of nicotinamide phosphoribosyltrans-ferase in cerebral ischemic stroke［J］． Autophagy，2012，8 ( 1 ) :77 － 87．

[4]Wang P，Xu T Y，Wei K，et al． ARRB1 /β-arrestin-1 mediatesneuroprotection through coordination of BECN1-dependent autoph-agy in cerebral ischemia［J］． Autophagy，2014，10 ( 9 ) : 1535 －48．

[5]高 博． 内质网应激诱导的自噬在脑缺血预适应和永久性缺血中的作用［D］． 苏州: 苏州大学，2012．

[6]Gao B． The role of autophagy induced by endoplasmic reticulumstress in brain ischemic preconditioning and permanent focal cere-bral ischemia［D］． Suzhou: Suzhou University，2012．

[7]王燕梅． 自噬参与低氧后处理对成年大鼠短暂全脑缺血的保护作用［D］． 广州: 广州医学院，2012．

二、研究方案

（一）研究目标、研究内容和拟解决的关键问题

1、研究目标

(1)本文通过建立动物模型，探讨自噬反应在缺血性脑损伤中的调节作用。

(2)得出系统评价结果，从而更好地指导临床。

研究内容

本研究采用大鼠永久性大脑中动脉闭塞模型在 MCAO 处理不同时间后，观察线粒体自噬相关蛋白的表达变化,探讨线粒体自噬在缺血性脑卒中发病过程中的可能作用。

3、拟解决的关键问题

（1）参考相应的文献资料，建立合格的动物模型。

（2）依据样本例数以及研究进程选用适当的统计学方法。

（二）研究对象与方法

1. 研究对象：健康雄性 SD 大鼠，体重 300±20 g，购自军事医学科学院实验动物中心， 

所购动物先饲养一周，待动物适应环境后再开始实验。

2.研究方法

2.1 动物模型建立

2.2 自噬相关蛋白检测

2.3 统计学处理

3. 可行性分析

1.学术及技术条件：①导师具有丰富的临床经验及严谨的科研思维，较早并率先在省内开展此项技术，积累了较多临床资料。②已阅读相关文献，了解国内外研究动态，完成了文献综述。

2.研究基础条件：①医院实验室能满足完成本研究的条件。②研究经费已落实，且合理安排。

4.本课题的创新之处

文通过建立动物模型，探讨自噬反应在缺血性脑损伤中的调节作用，指导临床的应用研究。

（三）研究计划及预测进展

2017年6月至2017年12月:检索文献，收集病例，准备开题。

2018年1月至2018年2月:掌握研究难点和细节，完成综述和开题报告。

2018年3月至2018年6月:整理分析数据，得出结论，^范文撰写，发表文章。

（四）预期研究成果

  本研究发现在脑缺血早期线粒体自噬被激活，缺血晚期线粒体自噬被抑制而导致脑损伤加重。

三、研究基础

1、与本课题有关的，前期研究工作积累和已取得的研究工作成绩

 （1）已阅读相关文献，了解国内外研究动态，完成了文献综述。

（2）已联系医院实验室室，其条件能满足完成本研究。查阅大量相关文献，已获得各项影响因素的可行性。

2、已具备的实验条件，尚缺少的实验条件和拟解决的途径（包括利用国家重点实验室和部门开放实验室的计划与落实情况）

医院实验室具备所有研究所需资料，可保障项目实施及顺利完成。

*^范文：作者·题目·刊名·年份·卷（期）·页码

专著：作者·书名·出版者·年份