骨碎补炮制工艺及质量标准研究_开题报告

（一）国外研究现状

1品种鉴定

周富荣（2001）等采用高效液相色谱法测定了骨碎补中袖皮昔的含量，对12个地区、市售骨碎补，测定结果表明，棚蔽含抽皮普，中华棚藏，大叶骨碎补未检出袖皮昔。

周铜水（2003）从TLC分析结果可看出，不同来源的骨碎补组成成分有所不同榭蔽和崖姜威含大量的抽皮贰，团叶棚藏和栋叶懈获仅含少量，其余均未检测出:来源于骨碎补科大叶骨碎补、骨碎补、圆盖阴石获和鳞轴小膜盖获4种均含芒果贰和异芒果贰，其它种不含这两种成分;中华榭威的主成分不同于懈蔗。来源不同的骨碎补，其总黄酮含量差别很大。中华懈获、光叶瘤蔽含量最高;懈破、川滇棚藏、海州骨碎补、鳞轴小膜盖获次之;栋叶懈蔽、团叶榭获、大叶骨碎补最低。李遇伯（2004）等收集了12个药材样品中，7个榭获根茎，5个为易混品。结果表明骨碎补正品与易混品中的成分差异很大，7个骨碎补药材中均含新北美圣草昔和袖皮昔，并且HPLC色谱图基本一致;而中华棚蔗(也称骨碎补)、崖姜威(大骨碎补)和光叶榭藏等样品中均未检到上述2种成分。李顺祥1等以HPLC测定不同产地的骨碎补中柏皮昔的含量，结果不同产地的骨碎补中抽皮昔的含量差异大，同一产地的不同生长环境对其含量影响也很大。骨碎补的道地性产地应在江南。

2炮制研究

张静（2006）等采用正交设计对砂烫骨碎补的工艺进行了研究，确定了100kg骨碎补用500kg沙子，沙温1800C，烫制1min为最佳工艺。杨梓鼓等研究表明骨碎补经炮制去毛后可以提高、总黄酮及浸出物的含量，经砂烫、恒温烘烤及微波炮制后并不影响总黄酮及浸出物的含量。而微波法优于其他方法。李孟广等考察了样品中的二氢黄酮昔含量和炮制前后含量的变化情况结果认为骨碎补的炮制目的，除方便净制外，还有利于有效成分的溶出，以提高疗效。杨中林（2007）等用分光光度法和HPLC法分别测定骨碎补不同炮制品中总黄酮的含量和袖皮昔的含量，结果表明骨碎补经去毛净制后，可提高黄酮及袖皮普含量;经砂烫、酒制、盐制后.并不影响总黄酮及袖皮昔含量，却有利于有效成分的溶出。袁叶飞（2009）采用膨化技术炮制骨碎补，与砂烫法相比较，骨碎补膨化品的水浸出物及抽皮昔含量最高，且膨化法操作简便，只需掌握压力和时间即可，既缩短了加工周期，又避免了砂烫法烟熏、灰尘及挥发气体对操作人员身体的影响，并通过正交实验法优选了骨碎补的膨化炮制工艺。

3药理研究

王华松（2010）等根据实验结果，推测骨碎补促进骨折愈合的机理可能有以下几方面提高血钙、磷的浓度乘积，促进钙磷沉积；增强机体内成骨活动，提高血清ALP的活性；增加TGF-p，在骨痴组织中的表达，促进骨折愈合。棚蔗根茎水煎液对实验性大.鼠骨损伤愈合有促进作用，随剂量增加，作用增强，懈蔽根茎主要成分抽皮贰与相当剂量的生药作用效果相当，说明袖皮贰可能是懈藏促进骨损伤愈合作用的主要活性成分。邓展生（2011）将骨碎补水提液、醇提液和骨碎补的有效成分袖皮贰与hMSCs共同体外培养，结果表明骨碎补水提液、醇提液与袖皮贰对HMSCs有保护作用并能分别促进其增殖、分化。

唐琪（2012）等制备骨碎补的水、醇提取液，考察其促细胞增殖作用，结果骨碎补水相和醇相提取物中分别存在有较高活性的促成骨细胞增殖、分化和钙化的物质。骨碎补提取液对体外分离破骨细胞性骨吸收有抑制作用，随浓度的增高抑制作用愈明显等采用破骨成骨细胞共培养体添加不同浓度的骨碎补提取物，结果表明加入提取物后，增加破骨细胞的移动性，有利于成骨细胞的早期分化，不利于成骨细胞的矿化，适合骨折的早期治疗。

徐展望（2013）等研究发现骨碎补提取液中含有能促进BMSCs向成骨细胞分化的成分，BMSCs可能就是骨碎补在体内发挥作用的一种靶细胞，是其促进骨折愈合、防治骨质疏松的细胞学基础。王华松等]实验表明骨碎补能增加骨痴厚度，提高骨折愈合质量。增加TGF在骨痴组织中的表达，可能是骨碎补促进骨折愈合的机制之一。

马克昌（2014）等通过动物实验证明，骨碎补对新生小鸡骨的生长发育有促进作用，用药组股骨的湿重和体积大于对照组，单位长度皮质骨内钙、磷、羚脯氨酸和氨基己糖都明显高于对照组。对长管骨径度方向上的促进作用大于对长度方向，对蛋白多糖的合成促进作用在时间上先于其他成分，在程度上高于其他成分。通过组织培养和同位素示踪法发现骨碎补明显促进培养中鸡胚骨原基的钙化，同时提高了培养组织中LP的活性和促进蛋白多糖的合成，并证明促进蛋白多糖的合成是促进钙化的重要因素。

早在20世纪70年代就有用骨碎补的补肾活血防治链霉素耳毒性的报道。现代研究发现，骨碎补对卡那霉素、链霉素等氨基昔类抗生素引起的耳聋有解毒、保护作用。采用全耳蜗基底膜铺片在光镜下计数毛细胞，进一步发现骨碎补可使链霉素所致耳蜗一回和二回毛细胞的损伤减轻。以豚鼠耳蜗毛细胞损伤为指标，参考Peryer氏反应和听性脑干反应测试，结果表明骨碎补有抑制链霉素耳毒性的作用。小鼠实验证实，骨碎补可对抗链霉素引起的运动平衡失调、体重增长缓慢、肾功能降低等毒性反应。通过对实验组及对照组动物脑干听觉诱发电位(ABR)III波潜伏期闭值的比较，全耳蜗铺片毛细胞损伤计数统计及对毛细胞超微结构的扫描和透射电镜的观察证明，骨碎补对卡那霉素的耳毒性有一定的预防作用。从肾脏的石蜡切片观察到，卡那霉素对肾脏也有损害，耳毒性与肾脏损害呈正相关，并认为骨碎补的解毒机理可能是通过对肾脏的保护作用实现的。骨碎补主成分抽皮昔具有脱敏和抗变态反应性能，活血解痉，改善局部微循环和营养供给，促进药物排泄，解除链霉素对第8对脑神经的损害，对缓解链霉素的毒副作用有其独特疗效，作用快，疗效高且确切，安全可靠，无不良反应。

通过对骨碎补类黄酮提取物(FF)对系膜增殖性肾小球肾炎大鼠模型的抑制作用的研究，表明FF通过抗氧化活性，抑制大鼠系膜增殖性肾小球肾炎系膜细胞的增殖及基质的增加，并且FF通过抗氧化作用，能够减轻HgCl诱导的急性肾衰竭。综上所述，学者们从骨碎补鉴定、炮制、化学、药理等方面作了一定的研究，但在炮制工艺的规范化及炮制原理的研究方面还有待于进一步的研究。

二、^范文提纲

摘要

一、绪论

（一）研究背景及意义

（二）研究现状

（三）研究内容及目的

（四）本文研究的方法

二、本文研究的依据

（一）骨碎补炮制工艺的设计依据

（二）骨碎补炮制工艺评价指标的选取依据

（三）关于骨碎补炮制过程中的温度控制

（四）中药炮制的建议

三、骨碎补传统炮制工艺研究

（一）骨碎补砂烫工艺研究

（二）骨碎补砂烫品化学成分分离

（三）骨碎补炮制前后化学成分的比较研究

四、骨碎补盐制工艺研究

（一）骨碎补砂烫法与盐制法的比较研究

（二）骨碎补盐制的工艺研究

（三）盐制骨碎补的中试验证

结束语

参考文献

致谢

三、参考文献

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