抗乙型肝炎病毒药物靶向给药系统研究_开题报告

概述

1.乙型肝炎病毒的概念

病毒（virus）是由一种核酸分子（DNA或RNA）与蛋白质（Protein）外壳构成或仅由蛋白质（朊病毒）构成。病毒没有最基本的细胞结构单元，不具备新陈代谢所必需的基本系统，必须借助宿主细胞才能完成病毒的自我复制。

生物学上，病毒分为噬菌体、植物病毒、动物病毒。本课题所研究的对象为乙型肝炎病毒（Hepatitis B Virus, HBV），是一种具有独特复制模式的嗜肝DNA病毒（hepadnavividae），是直径42nm的球形颗粒，又称Dane颗粒，有外膜蛋白的表面抗原(HBsAg)病毒DNA及形成复合体的核心抗原(HBcAg/HBeAg)两个部分组成。病毒DNA由正链和负链的双股环状DNA分子组成【1】。临床发现，感染乙肝病毒可导致急、慢性乙型肝炎，并与肝硬化、肝细胞癌等肝脏疾病的发生相关。其结构图【2】，详见图1.1。

图1.1乙型肝炎病毒（Hepatitis B Virus, HBV）结构图

2.抗乙型肝炎病毒药物相关概述

病毒增殖过程的大致分为五个阶段：吸附、侵入、脱壳、病毒成分的合成和装配与释放。具体过程如下：

吸附是病毒感染宿主细胞的第一阶段：病毒蛋白与宿主细胞膜表面特异性

受体位置发生碰撞进而附着于宿主受体细胞。病毒的吸附分为两个步骤：第一步：可逆吸附。病毒与细胞以静电引力相结合，是一种非特异性吸附。解脱的病毒具备感染性；第二步，不可逆吸附。病毒吸附蛋白与宿主受体细胞细胞膜表面特定蛋白的特异性结合，然而并非所有的病毒都有机会达到吸附的第二步。

侵入是病毒感染宿主细胞的第二阶段：病毒不可逆吸附于细胞受体后，病

毒以核酸或核衣壳或病毒颗粒等形式进入宿主细胞内部的过程。

脱壳是病毒感染宿主细胞的第三阶段：脱壳是病毒侵入细胞后，病毒的包

膜或壳体去除而病毒核酸释放出来的过程，包括脱囊膜和脱衣壳两个过程。

病毒大分子的合成是病毒感染宿主细胞的第四阶段：病毒大分子的合成包

括病毒核酸的复制和蛋白质外壳的合成。可以分为几个连续阶段：（a）mRNA的早期转录；（b）mRNA的早期翻译（早期蛋白质）。（c）病毒核酸的复制：按病毒核酸及其转录和复制可将病毒分为 6种基本类型，具体为（Ⅰ）双链DNA病毒（PRV）；（Ⅱ）单链DNA病毒（PPV）；（Ⅲ）双链RNA病毒（BDV）；（Ⅳ）单股正链RNA病毒（FMDV）；（Ⅴ）单股负链RNA病毒（NDV）；（Ⅵ）反转录病毒（HIV）。

装配和释放是病毒感染宿主细胞的第五阶段：首先，新合成的病毒核酸与病毒蛋白、质外壳在宿主细胞内按自我组装或指导装配的方式组装成完整的病毒颗粒。然后，新形成的子代病毒颗粒由宿主细胞内释放到宿主细胞外部【3】。

深入研究乙型肝炎病毒（Hepatitis B Virus, HBV）感染肝细胞的五个阶段（自我复制过程【4】，详见图1.2），设计出能够直接作用于这五个阶段的药物来抑制病毒的增殖或直接杀灭病毒，其主要作用机理分别为干扰病毒吸附、阻止病毒侵入细胞、抑制病毒大分子的生物合成、抑制病毒释放或增强宿主抗病毒能力的药物，称之为抗乙型肝炎病毒药物。目前，临床上抗乙型肝炎病毒用药主要有：（1）干扰素：普通干扰素和长效干扰素；（2）核苷酸类似物【５】，主要有6种，即拉米夫定、阿德福韦酯、替比夫定、恩替卡韦、替诺福韦酯和克拉夫定等；（3）中药中医。

图1.2乙型肝炎病毒（Hepatitis B Virus, HBV）自我复制过程

3.抗乙型肝炎病毒药物给药途径概况

抗病毒药物的理化特性决定了常规给药途径。例如，有些多肽蛋白类药物具有较强的抗病毒活性，考虑到多肽蛋白类药物在胃里及肠道内容易降解而失去药理活性，绝大部分制成针剂，进行静脉注射给药。很多科学家深入研究其口服给药途径。口服给药要求经过肠道粘膜吸收，要求多肽蛋白类药物借助脂溶性分子包裹，既能规避药物在胃里及肠道被消化而破坏活性成分的风险，又能通过肠道粘膜表皮细胞膜磷脂双分子层吸收至静脉，通过血液循环运行至病灶部位，发挥抗病毒功效。近些年来，很多科学家研究多肽蛋白类药物给药系统，借助传递体、脂质体、微球、毫微球和毫微囊等包埋多肽蛋白类药物采取口服给药途径【6，8】。

医学临床上，药物给药途径大致分为肠内给药与肠外给药两大类，具体可分为口腔给药系统、直肠给药系统、结肠给药系统、鼻腔给药系统、皮肤给药系统及眼用给药系统等。抗乙型肝炎病毒药物的给药途径主要有以下两种方式：口服方式的结肠给药途径及静脉注射给药途径，都属于常规非靶向给药途径。

4.靶向给药相关概念

鉴于常规非靶向给药途径药物具有分散广，作用范围大，对机体毒副作用大，药物制剂的生物利用度差和药物对病灶的疗效精准度差的缺点，近几十年来科学家们一直致力于精准靶向治疗的研究，建立起了精准靶向给药途径，更是从药物源头设计精准靶向制剂。靶向给药是借助现代先进的科学技术（包埋技术及抗原抗体特异性技术等），将药物集中分布于靶器官、靶组织和靶细胞的一种给药途径。依据靶向给药途径设计出来的靶向制剂，是指一类能使药物浓集于靶器官、靶组织、靶细胞且疗效高和毒副作用小的靶向给药系统，属于第四代药物剂型【7】。其狭义定义为一类抗癌制剂，随着近年来靶向给药途径的深入研究，在给药途径、靶向的专一性和特效性等方面取得突破性进展，现在靶向制剂的广义已经涵盖所有具有靶向性的药物制剂。其具有这些作用特点：使药物具有药理活性的专一性，增加药物对靶组织的指向性和滞留性，降低药物对正常细胞的毒性，减少剂量，提高药物制剂的生物利用度。

近些年来，生物制药已经成为国内及国际医药行业的热点研究领域。临床上，主要用于靶向治疗癌症、恶性肿瘤及免疫性疾病。单克隆抗体研究是生物制药领域的热点。单克隆抗体与小分子细胞毒性药物相耦联的靶向药物（ADC）【8~10】，是单克隆抗体发展的一个重要方向。细胞毒性药物以共价键和抗体耦联，进入肿瘤细胞后药物释放，达到靶向杀死肿瘤细胞的目的，大大提高了抗体对肿瘤的杀伤作用。

抗乙型肝炎病毒靶向给药途径系统研究

1.抗乙型肝炎病毒药物的临床用药及其给药途径现状

目前，国内国际临床上抗乙型肝炎病毒药物主要有（1）干扰素，（2）核苷类似物（NAs）：拉米夫定、阿德福韦酯、替比夫定、恩替卡韦和富马酸替诺福韦。乙型肝炎病毒药物相关临床用药及其相应的给药途径，具体如下：

（1）干扰素：普通干扰素和长效干扰素（临床应用的聚乙二醇化干扰素）用于治疗慢性乙型肝炎，主要用药途径为肌内注射。其副作用有：a. 流感样症候群表现为发热、头痛、肌肉酸痛和乏力等；b．一过性外周血细胞减少，如白细胞性粒细胞和（或）血小板降低；c．精神异常，如抑郁、妄想、重度焦虑等精神病症状；d．自身免疫性疾病，如出现甲状腺疾病、糖尿病、银屑病、白斑、类风湿关节炎和系统性红斑狼疮样综合征等；e．少见的不良反应包括肾脏损害、心血管并发症、视网膜病变、听力下降和间质性肺炎等。

（2）核苷类似物（NAs）：拉米夫定、阿德福韦酯、替比夫定、恩替卡韦和富马酸替诺福韦，主要用于治疗慢性乙型肝炎，均采用口服肠道吸收给药。其中，拉米夫定具有耐药性较高，连续使用的耐药发生率高的缺点；阿德福韦酯具有肾功能损害的副作用；

    目前，上述临床治疗乙型肝炎病毒所用的药物，均属于常规非靶向药物，采取常规给用途径，具有药物用量大、生物利用度小和药物治疗精准度差等缺点。

2.抗乙型肝炎病毒靶向给药途径系统研究背景及其意义

近些年来，生物制药领域中单克隆抗体与小分子细胞毒性药物相耦联的靶向药物（ADC）研究治疗癌症取得突破性进展。细胞毒性药物以共价键和抗体耦联，进入肿瘤细胞后药物释放，达到靶向杀死肿瘤细胞的目的，大大提高了抗体对肿瘤的杀伤作用。ADC药物研究为研究并设计抗乙型肝炎病毒药物提供了新的方向。科学家们借助现代“抗体耦联药物（ADC药物）”技术，将抗乙型肝炎病毒的抗体装载上具有强细胞杀伤力的小分子抗乙型肝炎病毒药物，给药后通过血液循环富集于肝靶器官，可以精准作用于病灶，杀死乙型肝炎病毒。

抗乙型肝炎病毒药物靶向给药系统研究，旨在进行乙型肝炎病毒的生物学特性、抗乙型肝炎病毒药物理化特性及现代靶向给药途径的深入研究，把握靶向药物给药技术研究前沿科技脉搏，利用现代先进科技，将乙型肝炎病毒生物学特性、抗乙型肝炎病毒药物化特性及靶向给药技术等运用到抗病毒药物靶向给药系统研究，设计出更加合理的靶向药物，旨在抗乙型肝炎病毒药物通过靶向给药方式减少抗乙型肝炎病毒药物给药使用剂量，降低抗乙型肝炎病毒药物对机体正常细胞的毒副作用，提高乙型肝炎抗病毒药物制剂的生物利用度，增加药物制剂治疗的精准度。

^范文提纲

引言：抗乙型肝炎病毒药物靶向给药系统研究

1、乙型肝炎病毒生物学特性研究

1.1乙型肝炎病毒结构

1.2乙型肝炎病毒增殖模式

1.3乙型肝炎病毒表面特异性位点

2.靶向药物给药系统研究

3.抗乙型肝炎病毒药物靶向给药系统研究

3.1抗乙型肝炎病毒药物

3.2抗乙型肝炎病毒药物靶向给药设计研究

参考文献

1. 王邵征. 乙型肝炎病毒的增殖机制[J]. 国外医学情报,  1987（01）. 

2.Charlotte Uetrecht, Albert J. R. Heck. High-resolution mass spectrometry of viral assemblies: Molecular composition and stability of dimorphic hepatitis B virus capsids [J]. 国家科学院院刊（PNAS）,  2008 105: 9216-9220.

3.周飞彪. 例谈病毒的增殖[J]. 生物学通报, 2016（05）. 

4. Jieliang Chen,Min Wu, Kuancheng Liu.at al. New insights into hepatitis B virus biology and implications for novel antiviral strategies [J]. Natl Sci Rev. （2015）2（3）: 296-313. 

5.陈琨, 欧阳贵平, 任志饶等. 核苷酸抗乙肝病毒药物研究最新进展及其合成方法[J]. 精细化工中间体. 2018, 38（2）.

6.王璞, 王思玲. 蛋白多肽类药物给药系统的研究进展[Z].中国药剂学杂志（网络版）. 2004（03） 

7. 余德林, 马超英，马宝玉等. 近10年中药制剂抗肿瘤的研究概述[J]. 中华中医药学刊，2012，30（10）.

8. 尚利娜, 洪明岳. 抗肿瘤抗生素抗体靶向药物研究新进展[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2014（09）1075-108.

9. 杨跃梅, 张伯彦,黎燕等.靶向抗肿瘤抗体-药物偶联物研究进展[Z]. 国际药学研究杂志, 2014（01）.

10. 梁文, 谢丽萍, 胡又佳. 肿瘤靶向抗体偶联物的研究进展[J]. 《世界临床药物》, 2012（03）.