HPLC法测定肾炎Ⅱ号颗粒中人参皂苷Rb1的含量_开题报告

一、文献综述

（一）人参皂苷概述

西洋参 ( Panax quinquefolium L) 为五加科人参属植物，其味苦，性凉，主入心、肺、肾经，又名美国人参、花旗参，西洋人参、洋参、广东人参等。为综合利用西洋参资源，国内外学者从西洋参地上部分 ( 茎、叶) 提取出主要活性成份—西洋参茎叶皂苷 ( Panax quinquefolium sapo-nins from steams and leaves，PQS) ，并已证明其茎叶部总皂苷的含量明显高于根，而且茎叶部和根部总皂苷中单体皂苷的种类与含量也不相同。随着西洋参在国内外的研究越来越广泛，人们对西洋参中含有人参皂苷的结构修饰方法和生物活性作用的研究也越来越深入，尤其对人参皂苷在防治疾病的应用开发方面显示了良好前景。

肾炎Ⅱ号颗粒为第四军医大学第一附属医院西京医院药剂科自制的供军队需要的药品，已在第四军医大学第一附属医院西京医院临床应用近20年，其新配方根据临床经验、效果反馈以及现代研究的不断改进而最终确定。处方由地黄、茜草、小蓟及西洋参等十四味药组成。

肾炎Ⅱ号颗粒具有滋阴益气，凉血止血，兼以活血的功效，现行质量标准中的主要检测项目仅有丹皮、车前草、西洋参的薄层鉴别，无含量测定的质量控制。我们发现标准中存在制法描述不规范，不能完全满足质量控制的要求。中药复方制剂类在临床和药效学的研究报道较多，但对其质量标准的报道较少，且多局限于药材的鉴别。对中药复方制剂进行有效成分含量测定，因其杂质干扰大及含量微小，一般选用灵敏度高、重复性好、选择性高、分析速度快的HPLC法。

人参皂苷为人参属植物中主要活性成分，是由皂苷元和糖相连构成的糖苷类化合物，人参皂苷为白色无定形粉末或无色针状结晶，味微甘苦，具有较强的吸湿性。极性大的人参皂苷易溶于水、甲醇、乙醇，可溶于正丁醇、醋酸和乙酸乙脂，不溶于氯仿，乙醚、苯中。极性小的人参皂苷则能溶于氯仿、乙酸乙脂中，而微溶于水中。人参皂苷具有一定的旋光性，在甲醇中多呈现右旋。西洋参中的人参皂苷属按其母体结构主要分为3 种类型: 达玛烷型 ( Dammarane) 、奥克梯隆醇型 ( Ocotillol)。

（二）国内外研究现状

目前国内外文献报道的多是西洋参的化学成分提取分离，或粗略测定某类成分在药材中的含量，或提取物、化学成分的药理研究，在制剂及其临床应用方面的报道也不多，却没有有效部位的富集及含量测定项等，导致药材的质量难以保证。HPLC法是测定人参皂苷单体最常用的方法，在HPLC中紫外检测器最为常用，但因人参皂苷结构中缺乏生色团，2015版《中国药典》是以十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂，用乙腈和水梯度洗脱，测定人参皂苷的含量。张雪香等采用BondapakC18柱，401RI检测器，以乙腈-水（8:2）为流动相，测定了皂苷单体的含量。Yamaguchi等改进了色谱条件，采用Ultra NH2柱，乙腈-1.0%磷酸溶液（83:17），202nm为检测波长，在70min内测定了酸性和中性皂苷共11种，几线分离良好，但有些成份不能完全分离。Nagasawa等采用制备HPLC，用填充PrepPak-500硅胶分离了人参皂苷Rb1和Rb2、Rc、Rd等，却没能分离酸性皂苷。Kanazawa采用制备HPLC，180min内，成功分离了人参皂苷Rg1、Re、Rb2、Rd和m- Rb1、Rb2、Rc等，实现了酸性皂苷的分离。Kanazawa等用MPG-ODS柱，以乙腈-50mol/L磷酸氢二钾（25.5: 27.5），体积流量为2.0mL/min，在25min内也成功分离了11种中性和酸性皂苷。

本研究将针对以上问题，对西洋参材进行文献整理研究并按照药典部分对复方制剂的规定，拟采用以西洋参中人参皂苷Rb1为肾炎Ⅱ号颗粒的含测目标，建立药材质量标准以控制药材的质量，提高质量标准对产品的可控性[1-2]。

（三）研究意义

我们依据《中华人民共和国药典》（2015版）第二部和相关文献资料，用科学、合理、精确、灵敏的试验方法去测定肾炎Ⅱ号颗粒中人参皂苷Rb1含量，考察本品的安全性和有效性。旨在为肾炎Ⅱ号颗粒的临床应用提供安全、可靠的保证。因此，本次含测方法的意义是：

为同类药物的含量测定方法提供参考依据。

为肾炎Ⅱ号颗粒的生产和质量控制提供方法。

为肾炎Ⅱ号颗粒的临床安全合理的用药提供可靠、科学的试验依据。

4. 证明肾炎Ⅱ号颗粒的安全性和有效性，使其更好为国民所用。

二、^范文提纲

1引言

2仪器与试药

2.1仪器

2.2试药

3人参皂苷Rb1的含量测定

3.1色谱条件

3.2溶液的制备

3.2.1对照品溶液的制备

3.2.2供试品溶液的制备

3.2.3阴性样品溶液的制备

3.3方法学试验

3.3.1专属性试验

3.3.2线性试验

3.3.2.1对照品溶液的制备

3.3.2.2标准曲线的制备

3.3.3 精密度试验

3.3. 4 重复性试验

3.3. 5 样品溶液稳定性

3.3.6 加标回收试验

3.3. 7  样品含量测定

4结论与讨论

4.1 结论

4.2 讨论

三、参考文献

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