微透析技术在中医药领域中的应用研究_开题报告

一、文献综述

   （一）前言

微透析(Microdailysis，MD)一词起源于上个世纪50年代后期，为一种新型的生物采样技术，最初主要用于脑部采样，来研究脑内神经递质的释放。

微透析不同于以往传统的研究手段,是一种从生物活体内进行动态微量生化取样的新技术。动态：传统的采样方法是在一定时间点处死一批实验动物取血或脏器进行分析，首先样本过大，这会造成实验动物的大量浪费，其次由于实验动物的个体差异，会使实验中的误差过大；而微透析技术可以在同一只动物身上连续动态采样，而且可以在同一只动物的不同组织中植入探针，从而在同一只动物身上同时测定不同的药动学指标，既减少实验动物的用量，节省经费，又使实验中的误差减小。生物活体：取样中的动物可以是麻醉的，也可以是清醒的，因而获得的样品接近生物的正常生理情况，使获得的数据更加的精确、可靠。微量：传统采样方法是抽取拟定时间点动物的全血或其他体液，势必会影响实验动物的体液进而影响药物在体内的药动学行为；而微透析技术是以透析原理为基础，收集拟定时间段内的透析液进行分析，取样量极微小，一般是以μL为单位的，不会影响实验动物的体液，因而使测定的药动学参数更加准确、客观。

（二）国内研究现状

朱崇斌等提出了观点：DRO与EA合用后，不仅仅是通过拮抗DA，而且通过协调脑内其它单胺类递质的活动，从而加强针刺镇痛。通过采用大鼠脑内微透析及高效液相色谱电化学联检技术，观察多巴胺(DA)受体拮抗剂氟哌啶(DRO)加强电针(EA)镇痛时大鼠脑内微透析液中单胺类递质的变化，探讨药物加强针刺镇痛的机制。

窦永起，杨明会等研究人员针对“抑颤汤”治疗帕金森病方面进行了一系列研究，提出观点：抑颤汤能减轻帕金森病模型大鼠脑黑质细胞的受损程度，促进其修复，改善黑质纹状体系统的分泌功能，提高脑组织中内源性儿茶酚胺类物质的含量。他们利用6羟基多巴诱发法建立帕金森病大鼠模型，采用脑组织液微透析技术，用高效液相色谱法测定细胞外液中儿茶酚胺类物质含量的变化。研究结果为临床应用“抑颤汤”治疗帕金森病提供了相应的动物实验依据。    

陆远富等提出观点：钩藤碱的镇静作用，可能与其改变脑内单胺类递质及其代谢产物的含量有关。他们利用脑微透析方法收集钩藤碱给药前及给药后纹状体、海马及大脑皮质的细胞外液，经反相高效液相电化学法检测大鼠脑内去甲肾上腺素、5-羟吲哚乙酸的变化，结果发现钩藤碱能增高正常鼠脑纹状体及海马细胞外液中的5-羟吲哚乙酸含量，降低海马和皮层中去甲肾上腺素的含量，论证了这一观点。  

孙晓芳等提出观点：TZ对线粒体损伤、能量代谢障碍引起的胆碱能神经系统的损伤具有保护作用。他们应用微透析技术和高效液相色谱相结合，观察天智颗粒对脑线粒体损伤大鼠纹状体细胞外乙酰胆碱和儿茶酚胺类递质的影响。  

张春颖等提出观点：天钩方能增加正常大鼠海马细胞外液中抑制性氨基酸的浓度，抑制缺血再灌引起的兴奋性氨基酸的过度释放，增加精氨酸和抑制性氨基酸的浓度，从而发挥神经保护作用。他们应用微透析技术和高效液相色谱-电化学法相结合观察天麻钩藤方(天钩方)对不完全脑缺血清醒自由活动大鼠在不完全缺血前、缺血期间及再灌后，海马细胞外液递质氨基酸的影响，论证了这一观点。

（三）国外研究现状

在国外，微透析技术发展较快，同时应用的范围也比较广泛。大多数是对大鼠进行相关的实验。

1958年Gaddum发明了推拉式灌流取样技术并应用于监测脑细胞外神经化学物质。之后这项技术得到许多改进,曾广泛应用于脑中许多部位的神经递质的检侧。

1982年,Delgado等人最早报告了组织透析取样技术。

1999年，Lameris等以微透析技术采样，测定了麻醉猪心肌间质和血管内NE的含量，验证了心肌间质的细胞外液中NE含量高于血液中浓度，认为心肌内皮并非存在屏障样作用，而主要由心肌间质神经元的再摄取机制决定。

2000年，Tsukada等运用微透析与电化学检测器结合测定清醒状态下猴脑纹状体细胞间液的DA含量，并运用高分辨正电子放射断层扫描技术(PET)间接测定DA合成率和DA转运体的利用率，论证了东莨菪碱在体内因加快DA的循环率而使多巴胺D2受体结合型增加，而非通过增加突触间隙的DA浓度使受体的结合力增强。

2002年，Christopher等在大鼠第八胸椎造成脊椎机械损伤模型，在第一腰椎处倾斜插入微透析探针，研究脊椎损伤后氨基酸量的变化和损伤对膀胱功能的影响，实验测得损伤后兴奋性氨基酸Glu和抑制性氨基酸Gly、牛磺酸释放均增加，在40min左右释放量最大，且膀胱收缩次数增加，有反射亢进样表现。

Hutchinson等将微透析应用到临床研究中，发现在人脑缺血过程中伴随脑内谷氨酸含量的升高，且谷氨酸升高的程度与脑外伤或蛛网膜下腔出血的恶化程度呈现相关性。

Bequet等研究了禁食或是运动大鼠继发性的糖代谢，作者以紫外分光光度法测定外周血糖，1H-NMR与皮质区微透析相结合，测定大脑中细胞外液的糖浓度。在运动过程中，外周血糖下降，而脑细胞外液中糖浓度却较高。

（四）结论

综合国内外研究情况来看，很多学者将微透析技术应用在实验中，还有一些外科手术和临床研究中，尤其是对脑部的微透析技术应用研究较多，本文另辟蹊径，主要研究微透析技术在中医药领域的应用，以期为我国的中医药研究提供借鉴。

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二、^范文提纲

一、微透析技术概论

（一）微透析简介

（二）微透析技术的组成和原理

（三）微透析技术的优势

（四）微透析技术研究现状

（五）微透析技术的应用意义

二、微透析技术在中医药领域中的应用

（一）中医藏象学说研究中的应用

（二）药代动力学和药效学研究中的应用

（三）针灸研究中的应用

三、结语

三、参考文献

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