双歧杆菌四联活菌片制剂中婴儿双歧杆菌活菌数含量测定_开题报告

双歧杆菌是人体内的一种生理性细菌，定植于肠道内，属于优势菌群，占婴儿肠道菌从的92%[1]。该菌与人体终生相伴，其数量的多少与人体的健康密切相关，是目前公认的一类对机体健康有促进作用的代表性益生菌，如可以在肠道粘膜表面形成一个生理屏障，从而降低于伤寒杆菌、致泻性大肠杆菌、痢疾致贺氏杆菌等病原菌的侵袭，保证机体肠道内正常的微生态平衡；能激活巨吞噬细胞的活性，增强机体细胞的免疫力、防癌、抗癌的作用以及抗衰老的功能[2]。然而双歧杆菌的数量随着我们年龄的增长会呈现逐渐下降的趋势，所以为了增加人体这种益生菌保持机体微生态平衡，市场上即出现了许多种以食品、保健品、药品形式的益生菌活菌制剂。

双歧杆菌四联活菌片制剂是经国家认证审批的生物处方药，按照《2015版中国药典》第三部分类隶属微生态活菌制品[5]，该制剂是由婴儿双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌、蜡样芽胞杆菌四种原料，并添加药用辅料通过直压法制作的片剂。具有治疗与肠道菌群失调相关的腹泻、便秘、功能性消化不良功效。

制剂中婴儿双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌为健康人体肠道正常球菌群，直接补充可抑制肠道中某些致病菌，维持正常肠道蠕动，调整肠道菌群平衡。蜡样芽孢杆菌载肠道中定植，消耗氧气，为双歧杆菌等厌氧菌营造厌氧环境，促进双歧杆菌等厌氧菌的生长和繁殖。经口服进入肠道后，会在肠道内生长、繁殖、定植。其中蜡样芽孢杆菌不属于人体肠道正常菌群成员，在肠道中定植48小时后随粪便排出体外；而其余三种菌均是人体肠道中正常菌群，一般定植10天以上达到平衡。

•••••   为保证药品的疗效，作为药品生产企业需要根据国家药品相关法律法规制定药品的生产、质量检测等标准规范文件，并按照产品质量检测标准对每批生产产品进行各项指标检测，确保产品质量，而双歧杆菌四联活菌片制剂中质量检验核心内容之一就是四种益生菌的活菌数含量的测定，是否能够达到质量标准。确保能够为患者提供符合国家法律法规合格药品。

针对益生菌的活菌数测定，目前行业内使用的方法倍比稀释注皿法、梯度稀释涂布法、血球计数板法，以及电子仪器计数法等[3]。目前从事益生菌生产企业，对活菌数含量检测均使用倍比稀释法，该方法计数比较准确，误差较低[4]。

公司生产使用倍比稀释法对双歧杆菌四联活菌片中婴儿双歧杆菌活菌数含量的测定，较其他几种测定方法精确度高，同时也符合微生态活菌制品总论中对制剂活菌检测的要求。

使用倍比稀释法进行活菌数含量的测定，只要包含以下部分，样品抽取、样品梯度稀释、选择合适梯度进行注皿、培养、计数等。

二、^范文提纲

1．实验材料与方法

1.1材料与设备

1.1.1样品抽取

         1.1.2 仪器与设备

         1.1.3 培养基与稀释液

1.2实验方法

1.2.1MRS培养配制及灭菌

1.2.2TPY培养基配制及灭菌

1.2.3样品稀释液制作

1.2.4涂布法计数

1.2.5注皿法计数

2结果与分析

2.1实验结果

2.1.1涂布法检测结果

2.1.2注皿法检测结果

2.2实验分析

2.2.1

3结论

三、参考文献

[1] 康白 双歧杆菌【M】 大连海事大写出版社，1998年， 69-70

[2] 李平兰，张篪。利用亨特管厌氧管技术检测双歧杆菌制品中的活菌数，《食品科学》，1999年2月：68~69

[3] 居建华，徐万军，陈敏。一种双歧杆菌鉴别计数培养基的研制【J】，中国微生态学杂志，2000年（10）：291~292

[4] 刘兰，曹郁生，黄筱萍。双歧杆菌选择计数方法的研究进展[J]。食品与发酵工业，1999,25（4）：61~63

[5] 药典委员会，《中华人民共和国药典》2015年版第三部，微生态活菌制品总论，2015年，44-46