浅析PH值对牛胶原蛋白提取的影响_开题报告

（一）国内研究现状

赵苍碧为了探讨用酶从牛腱中提取胶原蛋白的最佳工艺配比，采用胃蛋白酶和无花果蛋白酶消化法，进行了酶和加入酶量对提取结果的影响研究，给出了酶对胶原提取影响的因素。结果发现，使用胃蛋白酶进行消化时，酶与牛腱的重量比为01时效果最佳，而使用无花果蛋白酶时，001的配比最佳。

刘丽莉针对牛骨胶原蛋白提取的工艺(脱脂、脱钙、提取介质)和结构表征进行研究。结果表明:最佳的提取工艺条件:采用乙醚低温回流脱脂，0.48%盐酸脱钙，骨粒径为5mm×10mm，以1%柠檬酸和1%胃蛋白酶复合为提取介质。纯化后的牛骨胶原蛋白通过紫外扫描分析、FT-IR、DSC热收缩温度和SDS—PAGE凝胶电泳的测定，并与标准牛腱I型胶原蛋白比较，确定所提蛋白为典型的I型胶原蛋白，达到了电泳纯，且较好地保持了I型胶原的3股螺旋结构。

何兰为综合利用牛骨资源，提高牛骨深加工程度及其加工附加值，以牛骨为原材料，提取其中的胶原蛋白并对其进行理化性状鉴定及分析，将纯化后的胃蛋白酶促溶性胶原蛋白应用于胶原蛋白海绵的制备，并对海绵进行结构分析及理化检验。主要研究内容及结果如下:为提高牛骨胶原蛋白的提取率，以得率作为指标，考察胶原蛋白提取纯化的工艺流程并对脱脂、脱钙、盐析、酶溶等各项工艺条件进行优化。

牛凤英采用离子液体([AMIM]Cl)提取胶原蛋白，并将提取的胶原蛋白与聚丙烯腈进行共混改性，对得到的改性聚丙烯腈纤维进行了FT-IR、SEM、断裂强度及回潮率测试。结果表明:随着加入胶原蛋白含量的增加，纤维断裂强度逐渐下降，胶原蛋白含量在20%以下时，断裂强度为1.72～2.21cN/dtex，表面沟槽被胶原蛋白明显覆盖，在其表面形成了一层胶原蛋白膜层。

王煜采用加入胃蛋白酶的方法，以新鲜牛跟腱为原材料，分别用3种不同的酶加入比例——1:100、1:50、1:10来实现胶原蛋白的提取。并对提取出的胶原蛋白进行表征。将新鲜的牛跟腱切割成块，并用10%氯化钠溶液除去盐溶性的杂质，再用丙酮除去脂类物质，最后按照设定的方法进行搅拌提取，盐析、透析纯化胶原蛋白;利用室温干燥法计算提取的产量;采用傅立叶红外、紫外分光光度法进行鉴定。通过实验得知，利用丙酮处理过的跟腱提取出的胶原较多;酶加入比例为1:10时，提取到的胶原蛋白产率最高，为0.927%。

杨萌萌以青海牦牛蹄筋为原料，利用超声波辅助胃蛋白酶法提取牛蹄筋胶原蛋白，并采用Design—Expert对超声波功率、超声时间、胃蛋白酶的加入量进行响应面优化。结果表明:最优提取条件为超声功率366W，超声时间7.4min，加酶量1:133，在该条件下牛蹄筋胶原蛋白的提取率为31.04%，而传统胃蛋白酶法提取得率为20.35%，提取率提高了10.69%，说明该方法优于传统的提取方法，对胶原蛋白提取工艺的大规模生产应用具有实际意义。

张云凤分别采用胃蛋白酶法与超声波-酶法提取牛跟腱胶原蛋白，比较了两种方法胶原蛋白的产率，并对胶原蛋白进行光谱测试.实验证明，超声波酶法的产率明显较高。

沈菊泉采用酸法从牛皮中提取胶原蛋白，研究酸提介质、物料比、提取温度和时间对胶原蛋白提取的影响。实验结果确定的最佳酸法提取牛皮胶原蛋白条件为采用0.5mol/L乙酸作介质，料液比1∶30，32℃下提取6h。经等电点沉淀并纯化后的胶原蛋白结合SDS-PAGE电泳和DSC分析，并与SigmaⅠ型胶原蛋白比较，确定所提取的胶原蛋白为典型的Ⅰ型胶原蛋白。此外，圆二色谱测试和体外成纤维试验结果，进一步表明所提取的胶原蛋白保持了天然胶原的三螺旋结构。

胡君景以牛骨胶原蛋白初步酶解产物为研究对象，以水解度为指标，采用甲醛滴定法监测深度酶解的进程，对比分析不同的酶解条件对水解度的影响，确定了中性蛋白酶和风味蛋白酶分步水解的酶解条件.通过正交试验结果表明:采用中性蛋白酶和风味蛋白酶加酶量分步水解牛骨蛋白的最佳条件为物料比1∶750，起始pH值是6.5，先用中性蛋白酶55℃酶解3h后，再用风味蛋白酶于55℃继续酶解2h.此时水解度达到63.6%.

臧传锋分析研究了用不同pH值的胶原蛋白溶液对真丝纤维处理后，溶液pH值对胶原蛋白改性真丝纤维的影响.结果表明，胶原蛋白溶液的pH值在真丝纤维的等电点时，与真丝纤维的交联最差.胶原蛋白溶液为中性时，对真丝纤维的改性效果较好。

（二）国外研究现状

Golinska M D认为酸法是提取胶原蛋白比较常用和有效的方法，用酸法提取的胶原蛋白最大程度地保持了胶原的三螺旋结果。此法处理块速，所的产品的分子量是连续的，适用于医用生物材料及原料的制备，但产品得率底，设备腐蚀严重。碱法容易造成肽键水解，得到的水解产物分子量较小。

Deyl认为盐析法可采用不同浓度的盐溶液进行盐析处理，从而可得出不同类型的胶原蛋白。酶法反应迅速，可提出高纯度的胶原蛋白，但需要控制的条件较多，成本较高。结合法则是结合以上方法的任意几种，此法能在考虑生产成本、工艺的有效控制及稳定性等方面更为有效的提取Ⅰ型胶原蛋白，但仍然存在得率较低的问题。

二、^范文提纲

1绪论

1.1概述

1.2研究的现状

1.3选题意义

2试验准备

2.1试验原理

2.2试验设备

2.3试验材料

2.4试验试剂

3试验方法及过程

3.1试验分组

3.2试验过程

4胶原蛋白质量分析的研究

4.1紫外吸收值的测定

4.2羟脯氨酸含量测定

4.3细胞毒性试验

4.4电镜检测

5 结果与讨论

5.1试验过程各项检测结果的记录

5.2紫外吸收值的测定

5.3羟脯氨酸含量测定

5.4细胞毒性试验

5.5电镜检测

6结论

三、参考文献

[1]赵苍碧, 黄玉东, 李艳辉. 从牛腱中提取胶原蛋白的研究[J]. 哈尔滨工业大学学报, 2004, 36(4):515-519.

[2]刘丽莉, 马美湖, 杨协力. 牛骨I型胶原蛋白提取及结构表征[J]. 食品科学, 2010, 31(2):87-91.

[3]何兰. 牛骨胶原蛋白的提取及复合海绵的制备研究[D]. 华中农业大学, 2012.

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[5]牛凤英, 王少君. 离子液体提取胶原蛋白对聚丙烯腈的改性研究[J]. 中国皮革, 2012(7):9-12.

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