浅析子宫内膜干细胞的研究进展开题报告

    干细胞是一类具有自我更新能力、多向分化能力以及无限增殖能力的未分化细胞，它可以产生至少一种高分化的子代细胞，包括从胚胎发育到成人生长发育过程中的各种未分化成熟的细胞。干细胞的自我更新、多向分化以及无限增殖贯穿于从受精卵到胚胎发育，直至最终衰老死亡的整个生命过程。本文对子宫内膜干细胞展开相关的论述，以便^范文更好的展开。

（一）子宫内膜干细胞的存在证据

1944 年，Hartman 等发现，外科手术切除恒河猴几乎全部的子宫内膜后，经过一段时间，子宫内膜可以完全再生。[1]1978 年，Prianishnikov 等首次提出子宫内膜干细胞学说。1979 年，Ferenczy 等研究发现，子宫内膜增生呈现区域性特征。1984 年，Padykula 等指出，当雌激素水平激增时，恒河猴子宫内膜呈现带状的增殖和分化现象。[2]Conti 和 Okulicz 等经过多年研究证明，子宫内膜上皮细胞和间质细胞的更新是一个极其有序的过程，并由此推测，在子宫肌层与近基底层子宫内膜交界处存在少量的子宫内膜干/祖细胞，其子代细胞具有无限增殖潜力并参与调控子宫内膜上皮细胞和间质细胞的再生。[3]1989 年，Padykula 等也指出，子宫内膜的再生是由定位于子宫内膜基底层的子宫内膜干细胞介导的。1999年，Tresserra 等通过临床观察发现，电切大部分子宫内膜后，部分功能失调性子宫内膜出血患者的子宫内膜组织可呈现带状再生并妊娠。2004 年，Chan 等在对人类子宫内膜上皮细胞和间质细胞的集落生成能力进行鉴定时，首次证明了子宫内膜干细胞的存在。集落生成能力是指在极低的接种密度培养条件下，单个细胞可以克隆形成单个细胞集落的能力。Chan 等将从切除的子宫组织中分离纯化出的单个细胞悬液进行体外培养，15 天后发现其中 0.22 ± 0.07%的子宫内膜上皮细胞和 1.25±0.18%的子宫内膜间质细胞可以克隆形成单个的细胞集落（colony-forming unit, CFU），即具有克隆生成能力。[4]2005 年，Schwab 等发现，当子宫内膜处于增生期时子宫内膜间质细胞的集落生成活性最强，而当子宫内膜处于分泌期时，子宫内膜上皮细胞的集落生成能力更强，提示子宫内膜可能存在上皮和间质两种干细胞类型。[5]

2008 年，Dimitrov R 等通过研究进一步证实，子宫内膜中含有极少数量的子宫内膜干/祖细胞，并初步推测子宫内膜干/祖细胞属于间质干细胞（MSCs）的一个亚型。直到 2009 年，Gargett 等采用 LRC 方法从小鼠组织中分离出子宫内膜上皮和间质两种干/祖细胞并分别对其进行定位，由此证明，子宫内膜中确实存在上皮和间质两种干细胞，共同参与调控子宫内膜腺体和间质的周期性再生并具有细胞集落生成能力和无限增殖能力。[6]

（二）子宫内膜干细胞的分离与鉴定

2004 年，Chan 等采用集落生成法首次证明了人类子宫内膜中存在上皮干细胞和间质干细胞。2007 年，Schwab 等用同样的方法进一步证实，大约 0.15% 的上皮细胞和 1.3% 的间质细胞具有集落生成能力。[7]

2006 年，Chan 和 Gargett 等在小鼠子宫内膜上皮中鉴定出大约 3%标签滞留细胞群（1abel retaining cells, LRCs）。 2007 年，Gargett 和 Cervello 等研究发现大约 6％-9% 带有 BrdU 标记的子宫内膜间质细胞可长时间保留 BrdU，且大部分定位于子宫内膜基底层，其中约 1/3 存在于与子宫内膜间质临界的部位。[8]

2007 年，Kato 等从正常人类子宫内膜中分离出 SP 细胞，并且证实 SP 细胞可分离出两个细胞群落，一个包含上皮细胞（CD9）；另一个包含间质细胞（CD13）。[9]2008 年，FrielAM 等从子宫内膜癌细胞系中也分离出 SP 细胞，并证实只有 SP 细胞具有致瘤性，而非 SP 细胞不具备致瘤能力。2010 年，Masuda 等将单个分散的人类功能层子宫内膜细胞（singlydispersed human endometrial cells, SDECs）异种移植到免疫缺陷小鼠并成功分离出子宫内膜 SP 细胞 （endometrial SP cells, ESP cells），并证实 ESP 细胞可以产生包括子宫内膜腺体、间质、内皮细胞、平滑肌细胞、免疫细胞和脉管系统成分在内的所有子宫内膜组织，并使子宫内膜完全再生。同年，Tsuji 和 Cervello 等进一步证实，ESP 细胞群中主要含有上皮细胞、间质细胞和内皮细胞。[10]2011年，Cervello 等进一步证实，ESP 细胞参与调控子宫内膜的再生和分化。2012年，Miyazaki 等建立了一种鉴定子宫内膜干细胞的新方法，即通过细胞追踪分析细胞分化的多能性以确定其是否为子宫内膜干细胞的方法，并证明 ESP 细胞是一种子宫内膜干细胞。

目前，已经从骨髓、皮肤、骨骼肌、肾脏等许多不同类型的成体组织中成功分离出具有共同特征的 SP 细胞，SP 细胞已经成为成体干细胞公认的特征性细胞表型。迄今为止，已经发现多种潜在的子宫内膜干细胞，包括集落生成细胞、ESP细胞、ABCG2+子宫内膜细胞、PECAM1+子宫内膜细胞、MCAM+PDGF-Rβ+间质细胞、ITGB1+NT5E+THY1+间质细胞等。

（三）子宫内膜干细胞的分化

近几年来，有多项研究发现，成体干细胞可以突破分化细胞谱系的限制，并发生跨胚层转化，最终分化成为其原定位组织或器官以外的组织来源的细胞，即干细胞的可塑性。1997 年，Eglitis 等研究发现，骨髓（BM）是由造血细胞以及含有间质细胞嵌入的细胞外基质环境共同组成的中胚层组织，骨髓干细胞可以分化成为定向造血干细胞（HSCs）、血管内皮祖细胞 （endothelialprogenitor cells, EPCs）以及骨髓间质干细胞（MSCs）。[11]1999 年，Bjornson 等指出，真皮干细胞可以分化成为神经元、神经胶质、平滑肌以及脂肪细胞。2001-2003年，Blau 和 Raff 等也发现，神经干细胞可以分化成为多种血细胞 （如骨髓细胞、淋巴细胞以及早期造血细胞）和骨骼肌细胞。[12]

    综上所述， 对子宫内膜干细胞的研究有其深远的必要性与重要性，本^范文将对其研究进展做细致分析。

二、^范文提纲

一、子宫内膜干细胞的存在证据

二、子宫内膜干细胞的分离与鉴定

（一） 集落生成法（CFU）

（二） DNA 标记法（LRCs）

（三） Hoechst 33342 染料排除法（ABCG2）

三、子宫内膜干细胞的来源

（一）残留的胎儿干细胞

（二） 骨髓

四、子宫内膜干细胞的分布

五、子宫内膜干细胞的生物学特性

（一）分化的可塑性（多向分化性）

（二） 治疗抗性

1、 药抗性（multidrug resistance, MDR）

2、 放射治疗抗性

（三）自我更新能力（无限增殖性）

（四） 高致瘤性

六、子宫内膜干细胞的标志物

七、 子宫内膜干细胞的微环境

三、参考文献

[1] Sara S Morelli, Pauline Yi, Laura T Goldsmith. Endometrial Stem Cells and Repro duction. Obstetrics and Gynecology International. 2012, doi:10.1155/2012/851367.

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[4] Eckfeldt CE, Mendenhall EM, Verfaillie CM. The molecular repertoire of the almighty’ stem cell. Nature Rev Molec Cell Biol. 2005, 6(9):726-737.

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