药用植物天花粉中天花粉多糖的提取工艺研究_开题报告

1.1选题背景

多糖是21世纪世界生命科学研究的热点，植物多糖在自然界植物中广泛存在，研究表明［1］植物多糖多存在免疫调节抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗氧化、抗衰老和抗病毒等药理功效，植物多糖作为一类重要的天然活性物质，其最大的优点就是毒副作用小，来源广泛，而丰富的植物资源使我国在植物多糖的研发方面具有得天独厚的优势，多糖在疾病预防及保健产品开发等方面具有广阔的应用前景。但由于其种类的多样性、结构组成的复杂性以及多糖分子量大、极性大等特点，给植物多糖提取、分离带来很大困难。

1.2相关研究的最新成果及动态

天花粉是葫芦科栝楼属的干燥根, 主要成分为蛋白质、淀粉、糖及皂苷等，其多糖组成在抗肿瘤，抗炎，抗病毒方面有良好的药理活性。天花粉多糖［2］主要由鼠李糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖6种单糖组成的杂多糖。天花粉多糖具有降血糖的活性[3]，天花粉中具有活性的多糖的量很低，而富含淀粉，虽然这些淀粉也属于多糖类，但没有降糖功效，并且对天花粉多糖的提取纯化干扰很严重。天花粉中含有的天花粉蛋白属于水溶性的天然高分子化合物，也严重干扰天花粉多糖的分离提取和分析。有关天花粉有效成分的提取分离的研究大多是针对天花粉蛋白，对天花粉多糖的研究较少，已经有研究的提取方法主要有［4］热水浸提法，碱浸提法，酶浸提法，微波辅助法以及超声波法，而分离纯化方法主要有膜分离法、有机溶剂萃取法、柱层析法等分离纯化方法。组成研究主要有GC、GC-MS、、GPC、HPLC等。

1.3提取方法的研究

目前多糖的提取方法研究比较多的是热水浸提法，碱浸提法，酶浸提法，微波辅助法以及超声波法。我们拟采用传统的热水提取法和较先进的超声波法做比较，考虑到若按传统的加热回流提取方法，由于天花粉中富含淀粉，会使提取物完全成糊状，无法进行分离，确定最佳提取温度为70℃。超声波［7]主要是利用超声波空化产生的极大压力造成被破碎物细胞壁及整个生物体破裂，而且整个破裂过程在瞬间完成；同时超声波产生的振动作用加强了胞内物质的释放、扩散及溶解，加速植物中的有效成分进入溶剂，使其进一步增大了有效成分进入溶剂，使其进一步增大了有效成分的溶出。故采用超声波振荡法可强化多糖的溶出效率，明显提高提取率，达到满意的效果。

1.4分离纯化方法的研究

多糖粗提取液中除了天花粉多糖外，还含有天花粉蛋白以及其他大量可溶于水的物质，这就需要将提取液中的天花粉多糖分离出来。由于植物多糖是大分子化合物，其在有机溶剂中的溶解度较小，在含一定比例有机溶剂的水溶液中会沉淀下来，因此通常采用加入有机溶剂的方法使多糖沉淀出来。但提取液中的天花粉蛋白也会随之沉淀下来，因此必须选择适合天花粉多糖的沉淀分离条件。有研究表明，清液加入4倍体积无水乙醇，使乙醇体积分数达到80％以上，可有效沉淀出多糖。沉淀于40℃真空干燥箱烘干得到天花粉粗多糖。天花粉粗多糖质量分数不高，只有23％～25％，主要是由于还含有部分蛋白质、小分子有机物等杂质，因此需要进行进一步纯化。植物多糖常用的纯化方法有重结晶、透析、柱色谱等。本实验采用三氯乙酸除蛋白后透析法。

1.5组分分析方法的研究

扈瑞平［9]对脱色后的沙葱多糖进行SephadexG-100柱层析纯化并测定其分子量，采用紫外光谱、纸层析、比旋光度法和凝胶柱层析法检验纯度；硅胶薄层层析（TLC）、高效液相色谱（HPLC）鉴定单糖组成，红外光谱（IR）和核磁共振（NMR）进行结构解析。

何晋浙［10]等在研究灵芝多糖组成时，采用了多种方法，如紫外光谱分析、红外光谱分析、灵芝多糖的X衍射分析、单糖及多糖的GC及GC-MS色谱分析多糖的分子量分布研究。

杨兴斌［11］等采用l-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）柱前衍生化反相高效液相色谱（HPLC）法，建立了9种常见单糖的分离模式，并成功地用于当归多糖的单糖组成分析，具有良好的重复性。

2.^范文提纲

摘 要

1绪论

1.1  选题的背景、意义

1.2  相关研究的最新成果及动态

1.2.1  提取方法的研究

1.2.2  分离纯化方法的研究

1.2.3  组分分析方法的研究

2实验部分

2.1  实验材料

2.1.1  实验仪器

2.1.2  实验试剂

2.2  实验流程

2.3  实验内容

2.3.1  多糖的提取

2.3.2  多糖的纯化（除蛋白）

2.3.3  多糖的分离

2.3.4  多糖的再纯化

2.3.5  多糖的组分分析

3结果与分析

3.1  不同提取法得率对比结果与分析

3.1.1  不同的提取法

3.1.2  得率对比

3.2  组分分离结果

3.3  组分Ⅱ的纯化

3.4  组分Ⅱ的单糖组成

3.5  多糖分子量

4结论

4.1  最佳提取条件

4.2  分离，纯化效果

4.3  多糖组成成分及分子量

参考文献

致 谢

3.参考文献

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