高效液相色谱法测定盐酸多西环素注射液含量开题报告

   农业部兽药评审中心依据农业部公告第1759号编制的兽药国家标准中，对盐酸多西环素注射液IV的含量检验，使用了高效液相色谱法，以0.05mol/L草酸铵溶液-二甲基甲酰胺-0.2mol/L磷酸氢二胺溶液[（65:30:5）用氨试液调节PH值至8.0±0.2]为流动相，要求使用的C18色谱柱的能适应PH大于8，这与我们通用的C18色谱柱（适应范围为2-8）不相符，需要检测时更换色谱柱，对日常检验来说增加了工作量，根据该质量标准中，在检查项目中有杂质吸光度一项，所以本人想用紫外分光光度法进行含量测定，查阅相关文献资料，发现廖建敏.张学文 在《中国兽药杂志2006（6）》中的紫外分光光度法测定盐酸多西环素可溶性粉的含量的文章，文章中使用的稀释液加盐酸溶液（9→100）的甲醇溶液（1→100）与农业部兽药评审中心编的《兽药国家标准汇编:兽药地方标准上升国家标准（第三册）》中对盐酸多西环素注射液IV的杂质吸光度一项的稀释液相同，但吸光波长不一致。在刘智钧，张玉莲发表在广东化工上的盐酸多西环素含量测定方法的比较中，提到高效液相色谱法测定盐酸多西环素更为可靠，但仪器及耗材较为昂贵，紫外可见分光光度法测定盐酸多西环素操作步骤简单，仪器及耗材便宜，但检测的加标回收率与精密度不如高效液相色谱法。随着检测技术的发展现在高效液相色谱仪器已经普遍使用，人们对质量的认识也超过了以前任何一个时代，所以本人想通过改变高效液相的色谱条件来使平常使用的普通C18色谱柱能适应改变的色谱条件，蒋慧岚.严寒.李军发表在中国兽药杂志2009（7）的HPLC测定盐酸多西环素可溶性粉含量一文中的色谱条件和桂双英.高超.李宁.郑峙云发表在安徽医药2007(4)上的HPLC法测定盐酸多西环素缓释药线中盐酸多西环素的含量一文中的色谱条件以及劳行刚.林微发表在现代预防医学2008(16)上的HPLC法测定盐酸多西环素片中盐酸多西环素的含量一文中的色谱条件与现行标准一致，王军.张晓明.曾万溪发表在现代食品与药品杂志 2006（3）上的盐酸多西环素HPLC测定色谱条件的改进 一文中，采用了0.05mol/L草酸铵溶液-二甲基甲酰胺-0.2mol/L磷酸氢二胺溶液-甲醇[（50:36:4:10）]的色谱条件，明显的提高分离效果，改善了柱压，缩短了多西环素的保留时间，方法虽然受流动相的PH影响不大，流动相配制后不用调PH值可以直接使用，但是配制好的流动相的PH值在8.0左右，不能适用普通C18色谱柱，李永梅发表在中国当代医药的HPLC法对氟尼康中盐酸多西环素及氟苯尼考含量的测定一文中的采用了流动相为乙腈:甲醇:磷酸二氢铵（0.1mol/L）=10:11:29,PH=3.50的色谱条件，符合我们需要，同时，李志伟.刘佳.霍云霞.刘方方发表在中国兽药杂志 2009（12）上的兽药氟尼康中主要成分的高效液相色谱分析一文中采用了流动相为乙腈：甲醇：磷酸二氢铵(0．1 mol／L)=l：2：5，pH=3．50，检测波长为254nm的色谱条件，对主要成分氟苯尼考和盐酸多西环素进行了含量分析，也基本符合我们所需的条件，但是文章中使用的色谱柱为Hyper-sil—ODS2(4．6 mm x250 mm 5um i．d),与现有实验条件的色谱柱有一定区别，同时文中提到当流动相中甲醇比例逐渐增大时，盐酸多西环素的色谱峰型托尾严重。

本文决定使用该色谱条件对盐酸多西环素注射液IV进行含量测定。)

^范文提纲

    盐酸多西环素（又名强力霉素）为四环素类光谱抗生素，盐酸多西环素注射液IV是它的一个重要的制剂产品，用于治疗革兰氏阳性、阴性菌和支原体引起的猪感染性疾病，如猪支原体肺炎、大肠杆菌病、沙门氏菌病、巴氏杆菌病等[2]。标准中要求使用PH值适用范围大于8的C18色谱柱，生产过程中中间品检验需要更换该色谱柱，麻烦，同时色谱柱在保存过程中容易损坏，增加企业成本，检验过程中出峰时间长，柱压也高，不利于中间品的质量控制

1试验材料

1.1仪器

1.2试剂

2方法与结果

2.1色谱条件与系统适应性

2.2线性及最低检测限

2.2.1储备溶液配制

2.2.2标准曲线的绘制

2.2.3检测限

2.3重复性（精密度）

2.4加样回收率

2.5中间精密度

3结果与讨论：主药保留时间短，理论塔板和分离度符合现行质量标准，该法能快速、准确地测定盐酸多西环素注射液的含量及有关物质，稳定性好，回收率高，比农业部公告第1759号品种项下的色谱条件及系统适应性强。

三、参考文献

[1]李永梅.HPLC法对氟尼康中盐酸多西环素及氟苯尼考含量的测定[期刊^范文]-中国当代医药2009（13）

[2]兽药国家标准汇编:兽药地方标准上升国家标准.3/农业部兽药评审中心编.-北京：中国农业出版社，2012.1

[3]中华人民共和国兽药典：2010年版.一部/中国兽药典委员会编.-北京：中国农业出版社，2011.3

[4]廖建敏.张学文 紫外分光光度法测定盐酸多西环素可溶性粉的含量[期刊^范文]-中国兽药杂志2006（6）

[5]刘智钧.张玉莲 盐酸多西环素含量测定方法比较[期刊^范文]-广东化工2012（7）

[6]蒋慧岚.严寒.李军.JIANG Hui-lan.Yan Han.Li Jun HPLC测定盐酸多西环素可溶性粉含量[期刊^范文]-中国兽药杂志2009（7）

[7]王军.张晓明.曾万溪.Wang Jun.ZHANG Xiao-ming.ZENG Wan-xi 盐酸多西环素HPLC测定色谱条件的改进 [期刊^范文]-现代食品与药品杂志 2006（3）

[8]李志伟.刘佳.霍云霞.刘方方.LI Zhi-wei.LIU Jia.HUO Yun-xia.LIU Fang-fang兽药氟尼康中主要成分的高效液相色谱分析[期刊^范文]-中国兽药杂志 2009（12）

[9]桂双英.高超.李宁.郑峙云.GUI Shuang-ying.GAO Chao.LI Ning.ZHENG Zhi-yun HPLC法测定盐酸多西环素缓释药线中盐酸多西环素的含量[期刊^范文]-安徽医药2007(4)

[10]劳行刚.林微HPLC法测定盐酸多西环素片中盐酸多西环素的含量[期刊^范文]-现代预防医学2008(16)