天然药物化学茵陈提取物纯化后的用途_开题报告

茵陈是《中国药典》2005 年版（一部）收载品种，为菊科植物滨蒿 Artemisiascoparia Waldst. et Kit.或茵陈蒿 Artemisia capillaris Thunb.的干燥地上部分，具有清湿热，退黄疸的功效，药用历史悠久，临床上常用于各类肝炎、黄疸、高脂血症等疾病的治疗。此外，茵陈药材及其提取物还是各种成方制剂、食品、保健品以及化妆品的良好原料。针对茵陈现行标准及其提取物提取纯化工艺缺乏可控性的现状，在前期分离得到保肝利胆有效成分对羟基苯乙酮的基础上，对两个品种来源的茵陈药材质量标准及其提取物的提取纯化工艺进行了全面的研究。由于根据采收期的不同，茵陈分为春季采收的“绵茵陈”和秋季采收的“茵陈蒿”，而市售茵陈几乎全为“绵茵陈”，故选择绵茵陈为实验药材，参照《中国药典》2005 年版（一部）附录项下方法，对 20 个产地两个品种来源的茵陈药材进行了质量标准研究。以对羟基苯乙酮为对照品，建立了薄层色谱鉴别方法；对杂质、水分、重金属、砷盐、总灰分、酸不溶性灰分进行了检查并制定了相应的限度，暂定本品杂质不得过 7％，水分不得过 12.0%，总灰分及酸不溶性灰分分别不得过 4.0%和 0.4%，重金属、砷盐的量分别低于 10ppm 和 2ppm，故不收入质量标准；对醇溶性浸出物进行了测定，平均含量为 12.48%，暂定本品醇溶性浸出物不得少于 9.0%；建立了总香豆素和对羟基苯乙酮的含量测定方法，并对茵陈药材中总香豆素和对羟基苯乙酮的含量进行了测定，两者平均含量分别为27.05mg/g  和 0.283mg/g，暂定按干燥品计算，本品含总香豆素以滨蒿内酯(C11H10O4)计，不得少于 2.16％；含对羟基苯乙酮(C8H8O2)不得少于 0.023％。以总香豆素含量、对羟基苯乙酮含量、收膏率的综合得分为评价指标，权重系数为 4:4:2，选用 L9(3)4 正交表对乙醇浓度、乙醇用量、提取时间以及提取次数进行四因素三水平正交试验，对提取工艺进行研究，通过方差分析和实际因素考虑，确定最优提取工艺为 8 倍量 70％乙醇提取 2 次，每次 1 小时。采用大孔吸附树脂对提取液中的总香豆素和对羟基苯乙酮进行纯化，对树脂类型、上样流速、洗脱溶剂及用量进行考察，最终确定的纯化工艺条件为以 D101大孔吸附树脂作为纯化用树脂，1BV/h 的流速上样，分别以蒸馏水 4BV、30%乙醇 4BV、70%乙醇 5BV 洗脱按 1BV/h 的流速洗脱，收集 70%乙醇洗脱部位。本文对不同产地、不同品种来源的茵陈药材进行了鉴别、检查、浸出物以及含量测定的研究，建立了茵陈药材的质量标准；以具有保肝利胆作用的总香豆素和对羟基苯乙酮的含量为指标，初步完成了茵陈提取物的提取纯化工艺研究，为茵陈药材及其提取物的质量控制和开发利用奠定了基础。

1. 茵陈提取物纯化工艺研究

1.1茵陈提取物工艺研究

现代药理研究表明，茵陈醇提物具有确切的保肝利胆作用[24,25]，除用于保肝

成方制剂茵栀黄口服液、黄疸茵陈滴丸外，同时也是保健饮品的良好原料，如茵

陈茶、茵陈露饮料等，但是对于茵陈提取物提取工艺的研究尚未见报道[26

～30]。

本实验以滨蒿 Artemisia scoparia Waldst. Et Kit.为来源的茵陈作为实验药材，对茵陈提取物提取工艺的各参数进行考察，确定其最优提取工艺路线，再分别以两种来源的茵陈作为实验药材，对该工艺路线进行验证试验。

1.1.1 仪器与试药　

1.1.1.1 仪器　

UV1100型紫外-可见分光光度计：上海天美科学仪器有限公司；

Varian ProStar 210 高效液相色谱仪（Varian Model 325 检测器）：美国瓦里安公司；

BUG25-12 型超声波清洗机（25kHz，500W）：上海必能信超声波有限公司；

HW.SY11-K6B/C 水浴锅：北京东方精瑞科技发展有限公司。

1．1.1.2　试药　

茵陈药材;滨蒿内酯对照品;对羟基苯乙酮对照品：自制，纯度大于 98％；

甲醇为色谱纯，水为高纯水，其余试剂均为分析纯。

1．1.2　提取工艺研究　

1．1.2.1　吸醇率的考查

1．1.2.2　正交实验确定提取工艺　

大量文献报道，茵陈中的香豆素类成分为其保肝物质基础，而对羟基苯乙酮则有显著的利胆作用。因此，本实验以总香豆素含量、对羟基苯乙酮含量以及收膏率的综合评分为指标，权重系数为 4:4:2，进行提取工艺的研究。

1．1.3　验证试验　

分别以两个品种来源的茵陈作为实验药材，按最佳工艺条件和优化工艺条件进行提取。

1．1.4　小结

1．2　茵陈提取物纯化工艺研究　

茵陈及其提取物被广泛用于各种复方制剂、保健品以及化妆品当中，但大多数含茵陈及其提取物的复方制剂如利胆止痛片、复方肝炎颗粒、茵白肝炎冲剂、茵胆平肝胶囊、茵栀黄口服液等均无精制工艺。近年来，大孔吸附树脂在天然药物精制中的应用日益广泛，由于它可以选择性地吸附或解吸化学成分，从而在中药纯化工艺中起到了“去粗取精”的作用，对纯化中药提取液中的有效部位有着较大的优越性，成为了纯化中药有效部位的一种常用方法[31]。由于大孔吸附树脂对于黄酮类、皂苷类、香豆素类、生物碱类等成分具有很好的吸附作用[32～39]，

因此本实验对大孔吸附树脂的型号以及纯化工艺各参数进行考察，纯化茵陈提取

液中具有保肝利胆作用的总香豆素和对羟基苯乙酮。

1.2.1　仪器与试药　

1．2.1.1　仪器　

1．2.1.2　试药　

茵陈药材、滨蒿内酯对照品、对羟基苯乙酮对照品。

AB-8 大孔吸附树脂：南开大学化工厂；

D101 大孔吸附树脂：成都市科龙化工试剂厂；

D140 大孔吸附树脂：中南晨光化工研究院；

甲醇为色谱纯，水为高纯水，其余试剂均为分析纯。

1．2.2　纯化工艺研究　

1.2.2.1　大孔吸附树脂的预处理与再生　

预处理：分别取 AB-8、D101、D140 大孔吸附树脂适量，乙醇浸泡 24 小时，以乙醇湿法装柱，用乙醇洗脱，不时检查流出的乙醇液，当流出的乙醇液和水（1:1）混合后不呈白色混浊时，用蒸馏水洗至无醇味。

1.2.3验证实验

分别以两种来源的茵陈作为实验药材，按优化工艺条件进行提取。

1.2.4 小结。

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