川乌的毒性及其解毒方法的研究_开题报告

川乌为毛莨科植物乌头(Aconitum carmichaeli Debx．)的干燥母根。始载于《神农本草经》，列为下品。其味苦、辛，大热，有大毒，功能祛风除湿、温经散寒、行瘀止痛。研究表明川乌有抗炎、麻醉镇痛、扩血管降压、强心、降血糖、抑制肿瘤细胞生长等药理作用，其功效是由乌头生物碱类物质决定，但其毒副作用亦是乌头生物碱类物质造成。川乌的化学成分中含有双酯型二萜类生物碱、单酯型二萜类生物碱和其他生物碱，其中双酯型二萜类生物碱是川乌中的主要毒性成分。对川乌进行炮制，配伍等可以降低其毒性，保证其能充分发挥良好的镇痛、抗炎和免疫抑制作用。

（一）川乌药物活性及毒性的现代研究：

川乌中主要有效成分为乌头总生物碱，主要有双脂型二帖类生物碱，含19个碳原子和20个碳原子构成的本环二萜或五环二萜，分子中具有氨基乙醇、甲胺或乙胺形成的杂环。如乌头碱，次乌头碱等，以及塔拉地萨敏、川乌头碱甲及川乌头碱乙．二萜生物碱是川乌的特征有效成分，具有抗炎、镇痛镇静、心血管及中枢神经等方面的作用。川乌头总生物碱杀虫活性主效成分是乌头碱、中乌头碱和次乌头碱,辅效成分是去甲乌头碱。川乌中二萜生物碱具有显著的生理活性。根据母核化学结构的不同，二萜生物碱可以分为 C18-、C19-、C20-以及双二萜型[8]。目前，对于其化学成分的研究主要集中在 C19-型生物碱，根据 C19-型生物碱C8-、C14-位取代基的不同，可以分为双酯型生物碱（DDAs）、单酯型生物碱（MDAs）以及醇胺型生物碱（ADAs）等，川乌中几种主要 C19-二萜生物碱如表1 所示。具体见图 1、表 1                           

有实验表明川乌头生物活性成分从川乌头中分离得到的乌头碱生物活性最强，中乌头碱、次乌头碱生物活性次之，新乌碱生物活性却最差。从其结构式上看，乌头碱、中乌头碱、次乌头碱都是双酯型的二萜生物碱。                                   

曾瑾等建立了小鼠瘤的模型,并应用四甲基偶氮盐化验法观察川乌水煎液对瘤细胞、一的繁殖抑制作用,结果与对照组比较,川乌水煎液对瘤的生长有着明显师海波等研究了川乌总碱的抗炎作用,随着剂量的增加,总碱对角叉菜胶或蛋清引起的大鼠足肿胀的抑制作用逐渐加强对五轻色胺和组胺引起的足肿胀和大鼠的毛细血管通透性增强的抑制作用也很明显对 小鼠二甲苯耳水肿抑制作用明显,尤其是瓜给药组的效果最显著还发现川乌总碱对大鼠的巴豆油气囊肿、白细胞向炎症灶内的聚集均有明显的抑制作用,能够显著减少渗出液中白细胞的总数对于免疫性炎症,川乌总碱能够显著抑制结核菌素引起的大鼠迟发型皮肤超敏的抑制作用,同时对瘤细胞。繁殖也表现出了明显的抑制作用,细胞株对川乌水煎液更敏感,说明了川乌水煎液可能对肠癌的繁殖有着更好的抑制作用。

孟庆勇等通过检测辐射损伤小鼠胸腺细胞自发结合一的百分比考察了乌头注射液对机体免疫功能的影响,结果体外实验显示乌头注射液只一雌和一”林给药组胸腺细胞自发结合'一的百分比高于对照组体内实验显示注射乌头注射液林瓜的辐射损伤小鼠组胸腺细胞自发结合一的百分比要比单纯辐射损伤组的显著,说明低浓度的乌头注射液对体外胸腺细胞自发结合“一有很好的刺激作用,在体内,适合剂量的乌头注射液可以增强辐射损伤小鼠的胸腺细胞自发结合一的能力。由此可见乌头注射液有提高机体免疫力和抗辐射的作用。

饶曼人研究发现川乌对离体蛙心具有强心作用,但剂量加大会出现心脏兴奋后心跳振幅受到抑制,剂量进一步增大,便会出现心律失常,直至心脏停止跳动煎剂可引起麻醉犬或猫血压快速且短暂的下降,此时心脏的功能没有显著的变化,降压能被大剂量的阿托品或苯海拉明拮抗。

川乌功效是由乌头生物碱类物质决定，但其毒副作用亦是乌头生物碱类物质造成。由于川乌的药用剂量与中毒剂量很接近，容易发生不良反应，其毒性主要表现在以下几方面。

1、心脏毒性：心脏毒性一直被认为是川乌的主要毒性。李氏等对1997－2006 年10 年间乌头类中药中毒临床文献进行了统计分析,在收集的355 篇临床文献中有139 篇是关于川乌中毒。乌头类中毒的大部分患者出现心律失常,其中室性早搏者占心律失常的比例高达60%，约10%的患者出现心脏骤停或阿-斯综合征。另外也有血压下降、心悸、中毒性心肌炎等情况发生。有文献报道,乌头碱类中药致心律失常的特点是多样易变,以频发室性早搏最常见。川乌的主要成分乌头碱导致心律失常的心电图异常率可达80.1%～88.0%,呈多形性改变,称紊乱性心律失常,其中以室性心律失常最常见,表现为房性、交界性和室性期前收缩、心动过速、心房颤动,严重的患者可能出现室性心动过速和心室颤动。缓慢型心律失常也比较容易发生,如窦性心动过缓、房室传导阻滞等,还可在心电图上表现为ST 段变化和QT 间期延长等。乌头碱急性中毒致严重室性心律失常通常表现为频发多源性室性早搏,其中以伴发多形性、单形性室性心动过速或尖端扭转型室性心动过速多见。

2、呼吸系统毒性：在动物实验中,川乌中毒会导致动物呼吸功能障碍；临床

上也有中毒者因为位于延髓的呼吸运动中枢麻痹,导致呼吸抑制的病例。研究发现,在SD 大鼠3 个月长期毒性实验中,生川乌对SD大鼠经口染毒3个月后,对肺组织无明显的毒性。

3、消化系统毒性：川乌的消化系统毒性作用在临床上主要表现为恶心、呕

吐、胃部烧灼感、流涎及腹痛、腹泻等,也有个别患者出现上消化道出血等症状。生川乌水煎液的长期毒性实验结果显示,动物胃平滑肌细胞的线粒体嵴减少、线粒体明显肿胀，胃壁内分泌细胞的线粒体同样肿胀,肠上皮细胞的线粒体嵴部分消失,线粒体轻度肿胀。

4、泌尿系统毒性：川乌以及其他乌头类中毒出现泌尿系统毒性症状的比较

少,只在个别案例中出现了肾衰竭、蛋白尿等情况。由于乌头碱可以导致心功能障碍,心功能障碍又能使肾脏产生缺血、缺氧,而乌头碱是经肾脏代谢后随尿液排出体外；所以,乌头碱在代谢过程中毒性对肾可能产生损害作用。

5、神经系统毒性：神经系统通常被认为是川乌作用的靶器官之一。外周神经系统损伤通常表现为皮肤蚁行感、刺痛以及麻木；中枢神经系统损伤则主要表现为头晕、视物不清、昏迷等。乌头碱作用于神经系统主要机制为使中枢神经系统和周围神经先兴奋后抑制,阻断神经-肌肉接头的传导功能。神经-肌肉接头传导阻滞的原因主要是由于过度的突触前去极化导致神经动作电位和终板电位阻滞。重度中毒者因位于延髓的呼吸和血管运动中枢麻痹,导致呼吸抑制,血压下降。组织缺氧后,机体正常的氧化还原的动态平衡被破坏,形成严重的氧化应激状态,从而激活促凋亡基因,引起组织器官细胞的凋亡；

6、生殖发育系统毒性：临床上迄今未见有川乌致生殖毒性的报道,但一些文献通过体外实验的方法研究了乌头碱的生殖毒性。有研究表明,乌头碱在5×101、5×102 ng/mL 剂量时可促进大鼠睾丸支持细胞的增殖及乳酸分泌量的增加,5×103 ng/mL 可抑制大鼠睾丸支持细胞的增殖,降低其对乳酸分泌的刺激作用。在大鼠卵巢颗粒细胞体外培养时发现,5×103、5×104 ng/mL 乌头碱可明显抑制大鼠颗粒细胞的增殖；5×104 ng/mL 乌头碱组细胞悬液中丙二醛含量明显高于溶剂对照组。可认为乌头碱在浓度高于5×103 ng/mL 时,对雌性大鼠卵巢颗粒细胞有毒性作用,主要表现为抑制颗粒细胞的增殖及对细胞的氧化损伤作用。

（三）川乌解毒方法的现代研究：

乌头类中药的减毒增效主要方法为：久煎、炮制和配伍。

1.炮制减毒法：川乌煎煮过程中，通过加水加热处理，可使川乌中的乌头碱等双酯型乌头碱水解，失去一分子醋酸，转化成毒性小的苯甲酰单酯型生物碱；再进一步将苯甲酰基水解，失去一分子苯甲酸，可得到几乎无毒性的乌头原碱，因此通过煎煮可以减少乌头类有毒中药的毒性。通过加水加热处理，可使乌头碱等双酯型乌头碱水解，失去一分子醋酸，转化成毒性小的苯甲酰单酯型生物碱；再进一步将苯甲酰基水解，失去一分子苯甲酸，可得到几乎无毒性较小的脂型生物碱，此外，双酯型生物碱也可直接发生置换反应生成脂型生物碱，从而降低毒性。

川乌的有毒成分为乌头生物碱类，其中双酯型乌头碱毒性最强，苯甲酰单酯型乌头碱毒性较小，乌头原胺类毒性很弱，几乎无毒性在炮制工艺中，加水、加热处理（包括干热法、湿热法），或蒸法，或煮法都能促进水解反应，使剧毒的双酯型乌头碱分解而“去毒”。药效学镇痛作用研究结果认为，炮制后由于双酯型乌头碱类成分的分解破坏而使其毒性降低，但其镇痛作用的生物活性仍然作用明显，大致与生品相近。

川乌炮制使用的辅料较多，但对辅料能否解毒的认识颇为不一致。有人认为，明矾的“去毒”作用是因为明矾可与生物碱结合而沉淀出去。另有研究认为，以白矾做辅料，在多次试验比较下显示出有增强毒性现象。还有人认为，乌头浸泡中加入少量白矾，起防腐作用。

邓海华采用正交试验法优选出川乌高压蒸制工艺即川乌润湿后，1.5kg/cm2 压力下蒸制150min，该法中总生物碱含量达到最大保留，双酯型生物碱含量大大降低，达到了减毒增效的目的。经研究川乌最佳高温烘制工艺为川乌经润透法处理，110℃烘制8h。HPLC 法测定川乌不同微波炮制品中苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱，苯甲酰次乌头原碱、新乌头碱、次乌头碱、乌头碱6 种乌头碱和总生物碱的含量，筛选出最佳的微波炮制工艺为川乌经润透法处理后，于60% 微波火力下炮制18~20min 最佳。

2.配伍减毒法：张少华等人发现川乌配伍防己可明显抑制免疫增高小鼠迟发性超敏反应，提高免疫低下小鼠MΦ 吞噬功能，抑制大鼠佐剂继发性关节炎，而各单味药则无明显作用；对特异性体液免疫防己表现出明显的促进作用，而乌防配伍后则出现了抑制作用。川乌配伍防己对细胞免疫有双向调节作用，对体液免疫也有一定的调节作用。

二、^范文提纲

一、川乌的药物活性及毒性的研究

1.川乌的药物活性

2.毒性作用

2.1心脏毒性

2.1.1影响Na+通道

2.1.2诱导Cx43 蛋白脱磷酸化

2.1.3抑制呼吸酶的活性

2.1.4促进心肌细胞膜脂质过氧化反应

2.1.5损害心肌细胞超微结构

2.1.6诱导心肌细胞凋亡

2.2呼吸系统毒性

2.3消化系统毒性

2.4泌尿系统毒性

2.5神经系统毒性

2.6生殖发育系统毒性

3.影响川乌毒性的因素

3.1炮制方法

3.2配伍

3.3其他

二、川乌的减毒方法的研究

1.1川乌总碱的抗炎作用

1.2抗癌作用

1.3提高免疫力和搞辐射作用

1.4强心作用

2.炮制减毒法

2.1煎煮减毒法

2.2工艺制备减毒法

3.配伍减毒法

三、体会与展望

三、参考文献

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