荷叶生物碱提取与纯化_开题报告

当今社会，健康成为全球最为关注的问题之一。利用天然产物制造的绿色产品逐渐被人们开发利用，而植物资源丰富是我国的一大优势，提取植物的有效成分将其应用到食品和药品等方面是近几年的研究热点。

生物碱是存在于植物体内的天然有机化合物，其有特殊的活性功能，大多数生物碱为无色结晶形固体，不溶于水，但与酸结合后易溶于水，有明显的熔点和旋光性，苦味，挥发性不强[1]，自从 1806 年德国学者 F.W.Serturner从鸦片中分离吗啡碱（morphine）以后，迄今以从自然界分出 10000 多种生物碱。生物碱广泛分布于植物界约 100 余科的植物中，其中以双子叶植物为多，其次为单子叶植物、裸子植物与蕨类植物。在地衣类和苔藓类植物中，尚未发现生物碱。少数真菌中也有生物碱。蛙类、蟾蜍、某些昆虫、加拿大海狸等动物中也存在生物碱。含生物碱较多的科有毛莨科、小檗科、防已科、罂粟科、豆科、马钱科、夹竹桃科、茄科、菊科、百合科和石蒜科等。有些科几乎全科植物均含生物碱，如罂粟科。生药中生物碱的含量大多低于1%，有少数含量特别低，如长春花中长春新碱含量为百万分之一，美登木中美登木素含量为千万分之一；也有些含量特别高，如黄连中小檗碱含量可达9%、金鸡纳皮中奎宁含量高达15%。生物碱是生药中一类重要的有效成分，目前已分离到 10000 余种，其中 80 余种已用于临床，如黄连中的小檗碱(berberine)用于抗菌消炎，麻黄中的麻黄碱(ephedrine)用于平喘，萝芙木中的利血平(reserpine)用于降压，喜树中的喜树碱(camptothecine)与长春花中的长春新碱(vincristine)用于抗肿瘤等。所以对生物碱进行提取并利用到药物中成为研究热点[2]。有研究报道，生物碱具有抗肿瘤，抗病毒等特性，因此很多生物碱制药品被运用于临床,例如长春新碱的抗癌作用被应用到抗癌药物中、吗啡被应用到镇痛片中、麻黄碱被应用到抗哮喘药物中等[3]。

而荷叶是睡莲属植物莲的叶片,在全世界有着广泛的分布,是一种既是食品又是药品的天然植物原料,含有多种有效活性物质[4]。随着人们生活水平的提高，肥胖及高血脂成为现代人的一大烦恼，因此降脂减肥的产品有了很大的市场[5]。现代药理学研究表明，荷叶中的生物碱和黄酮具有降血脂,抑制胆固醇、抗有丝分裂、抑菌和止痉挛、抗氧化等药理活性,是荷叶的主要有效成份[ 6] 。杜力军等[7]以急性高脂血症小鼠为整体模型，观察荷叶水提物对血清胆固醇及甘油三酯的影响。结果表明,荷叶水提物有明显的调脂作用,其活性部位主要是荷叶黄酮，其次是荷叶生物碱。徐剑[8]等人报道复方荷叶冲剂能降低家兔高脂血症中的血清总胆固醇和血清甘油三脂的含量，对动物组织中的脂质沉淀和动脉粥样硬化均有抑制作用。钱彦方[9]等人研制的轻健胶囊能明显的减缓肥胖大鼠体重的增值，促进脂肪细胞代谢，降低脂肪细胞合成甘油三酯和吸入脂肪酸，加强甘油三酯的酶性水解和游离脂肪酸向血中释放，降低了血液中的甘油三酯、胆固醇的浓度，同时，也降低了血液粘稠度，提高了红细胞电泳。现代研究中,荷叶被用作药用入药的制剂分为5大类:(1)祛暑清热药：如暑热感冒颗粒等；(2)清热消痤药：如通便消痤胶囊等；(3)止血药：如荷叶丸等；(4)健胃消食药：如醒脾 胃颗粒等； (5)化湿降脂药：如血脂宁、脂脉康胶囊、通脉降脂片、荷丹片等。

一般植物所含功能药用成分的生物碱的含量都非常小，提取等过程都会造成有效成分的损失。但是作为中草药等药用成分需要纯度较高的生物碱，要尽可能多的提取有效成分及去掉杂质及有毒成分，才能提高中草药的治疗效果。因此，现代研究越来越多的人关注如何高产的从自然界中得到生物碱，同时促进了天然产物的提取、鉴定方法的改进和提高。荷叶的生物碱有10多种，其中大部分已确定其结构，它们当中大部分的碱性都较弱，不能直接溶于水， 能溶于氯仿、乙醚、乙醇、甲醇等有机溶剂；同时，易溶于酸性介质，生成可溶性盐。现代研究为了提高荷叶生物碱的得率，很多研究者对其提纯工艺进行了工艺研究。赵俊等[10]研究了溶剂这个因素对提取率的影响，包括溶剂种类和溶媒浓度。结果显示，采用加热回流法和超声提取,最佳提取溶剂为95%的乙醇和0.5%盐酸，最佳纯化工艺为采用大孔吸附树脂纯化。肖文军等[11]则研究了聚酰胺、D101、HP-20三种树脂对生物碱的提取得率和纯度的比较，树脂D101的分离纯化效果最好。

荷叶生物碱盐有多种提取方法，传统方法有浸绩法、浸提法等，也有很多新兴的提取方法，如超临界萃取法、微波辅助提取法及双水相萃取技术等，众多的学者从不同角度对中药材中生物碱的提取分离进行了优化和改进。本文以提取得率为指标，为了尽可能多的提取荷叶生物碱盐，选择了最常用的加热回流法进行了试验，这种方法操作简便，且没有有机试剂残留等问题。本文通过单因素试验考察了提取时间、提取功率、温度、料液比等因素对总生物碱盐提取得率的影响，确定了荷叶总生物碱提取分离的最佳工艺条件。

^范文提纲

1.引言

2．材料与方法

2.1材料

2.2荷叶生物碱的提取

2.3标准曲线的制作

2.4样品含量测定

2.5生物碱提取率的计算

2.6提取条件对生物碱提取率的影响

3. 结果与分析

3.1荷叶生物碱含量测定

3.2标准曲线的绘制

3.3提取条件对生物碱提取率的影响

3.3.1提取溶剂对提取率的影响

3.3.2提取温度对提取率的影响

3.3.3提取时间对提取率的影响

3.3.4料液比及提取次数的选择

4．小结与讨论

三、参考文献

[1]刘成梅,游海.天然产物有效成分的分离与应用（第一版）.化学工业出版社,2003: 80-169.

[2]刘淑萍.荷叶中生物碱的制备及其药理学活性研究[D].石家庄:河北医科大学,2004.

[3]朱秀萍,徐翔.野生物件研究进展[J].中国药房,2008,19(6):459-460.

[4]黎先才,李萍,李静. 水热改性SO42- /ZrO2 催化剂的制备及其对酯化反应的催化性能[ J ]. 精细化工,2006, 23 (2) : 133 - 135.

[5]Song X, SayariA. Sulfated zirconia based strong solid acid catalysts: Recent progress [J]. Catal Rev Sci Eng, 1996,38 (3) : 329 - 412.

[ 6]张连伟. 乙酸正丁酯合成的研究进展[ J ]. 当代化工,2005, 34 (3) : 173 - 175.

[7] HinoM, Kobayashi S,Arata K. Solid catalyst treated with anion. Reactions of butane and isobutane catalyzed by zirconium oxide treated with sulfated ion solid superacid catalyst [J]. J Am Chem Soc, 1979, 101 (21): 6439 -6441.

[8]徐剑．复方荷叶冲剂降脂作用研究中成药，1989 1(11)：24～25 

[9]钱彦方.轻健胶囊的降脂减肥动物实验研究．实用中西医结合杂志，1994 7(10)：592-595

[10]赵俊,高岚,齐召朋.荷叶总生物碱及其盐的提取和降脂作用的比较[J].天津中医药,2005,22(2):16 1- 167.

[11]肖文军,胡祥文,胡云铃等.荷叶生物碱柱分离纯化技术研究[J].食品科学,2007,28(6):120.