对葛根中苯丙氨酸解氨酶、多酚氧化酶、过氧化酶活性的影响研究开题报告

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（一）PAL、PPO、POD的简介

1. L苯丙氨酸解氨酶（PAL）的简介

L苯丙氨酸解氨酶（PAL）是一种诱导酶，可受到多种因素的诱导。如低温、机械损伤、病原菌感染、光、毒素处理、昆虫取食等都可诱导PAL基因的表达，利用不同光质条件对长鞭红景天悬浮培养细胞进行较长时问的辐射处理，并检测其PAL活性的变化，通过比较分析得知长时间的红光处理有利于PAL酶活的提高。CHS是将苯丙烷类代谢途径引向黄酮类合成的第一个酶，该酶基因的表达也会受到病原菌的诱导，其活性受到植物激素、营养水平、光照、病原菌及机械损害等的影响。PAL位于初生代谢和次生代谢分界处，因此被定位为是苯丙烷类化合物代谢的中心酶。植物中，编码PAL的基因为单基因或一个多基因家族。分支酸(chorlsmic aid)是莽草酸途径的重要枢纽物质，将代谢分为色氨酸合成方向及苯丙氨酸(phenylalmline)和酪氨(tyrosine)合成方向。

2 .多酚氧化酶(PPO)的简介

多酚氧化酶(PPO)是一种蛋白体，在植物组织内广泛存在的一种含铜氧化酶，植物受到机械损伤和病菌侵染后，PPO催化酚与O2氧化形成醌，是组织形成褐变，以便损伤恢复，防止或减少感染，提高抗病能力。醌类物质对微生物有毒害作用，所以伤口醌类物质出现是植物防止伤口感染的愈伤反应，因而受伤组织一般这种酶的活性就会提高。多酚氧化酶也可与细胞内其他底物氧化相偶联，起到末端氧化酶的作用。PPO的存在是水果、蔬菜褐变及营养丧失的主要原因之一。PPO氧化内源的酚类物质生成邻醌，邻醌再相互聚合成醌或蛋白质、氨基酸等作用生成高分子络合物而导致褐色素的生成，色素分子量愈高，颜色愈暗。多酚氧化酶活性高低也是马铃薯解除休眠的指标之一。

（二）植物的次级代谢调控

植物次生代谢(secondary metabolism)是由初生代谢(皿mary metabolite)派生的一类特殊代谢过程【1】，是植物在长期进化中与环境相互作用的结果。近来的研究发现，植物次生代谢物(secondary metabolite)在植物生命活动的许多方面均起着重要作用，且部分是植物生命活动所必需的”【2】。例如，吲哚乙酸、赤霉素直接参与生命活动的调节；木质素为细胞次生壁的重要组成成分；叶绿素、类胡萝h素等萜类物质作为光合色素参与光合作用过程等”【3】。随着次生代谢产物在医药、食品、轻化工等领域的广泛应用，其物质的种类、代谢途径，以及代谢机理等相关问题亦倍受研究者关注，是植物生理学、植物化学等众多学科的主要研究内容之一。植物次生代谢物的产生和分布通常有种属、器官组织和生长发育期的特异性。目前其分类方法主要有如下三种：①根据化学结构不同，分为酚类、萜类和含氮有机物等”【4】；②根据结构特征和生理作用不同，分为抗生素(植保素)、生长刺激素、维生素、色素、生物碱与植物毒素等；③根据其生物合成的起始分子不同，分为萜类、生物碱类、苯丙烷类及其衍生物等三个主要类型。NO是通过影响植物中L苯丙氨酸解氨酶（PAL）、多酚氧化酶（PPO）、过氧化物酶（POD）的活性来调控葛根的次生代谢反应[5]。

二、^范文提纲

提供二级或者三级提纲

1引言

1.1 NO与植物过敏反应(hypersensitive responseHR)

1.2 NO与植物激素的协同作用

1.3NO与植物信号转导

2、仪器与材料

2.1仪器

2.2 材料

固体培养的葛根愈伤组织。

2.3 MS母液培养基配制

3、实验方法

3.1 悬浮细胞系的建立

3.2 SNP溶液配制

3.3 NO处理

3.4 PAL、PPO、POD酶液的提取

4、数据统计

4.1 苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的测定

4.2 多酚氧化酶(PPO) 活性的测定

4.3 过氧化物酶（POD）活性测定

5结果与分析

6、结束语

参考文献

三、参考文献

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