五味子及其制剂中五味子甲素五味子乙素含量的测定_开题报告

一、文献综述：

（一）国外现状：

    五味子属于天然药物，目前天然药物正在成为世界各国新药开发的热点，欧供体已经通过使草药地位合法化；美国FDA已开始接受中药方法药物的申报，并在起草审批程序。自上世纪中叶，日本、前苏联、中国等国家学者运用现代医学手段，通过实验研究证明五味子可以降低肝炎患者血清中谷丙转氨酶；治疗肝脏的化学毒物损伤，对中枢神经有兴奋作用，能增强肌体对非特异性刺激的预防能力；使低血压患者血压升高，但不会使正常血压升高；影响大脑皮层的兴奋和抑制，改善人的智能，增加记忆力；增强肾上腺皮质功能，促进心脏活动。

（二）国内研究概况：

五味子为木兰科植物，果实干燥，其主要活性成分为木脂素，已有两千多年的药用历史。近年来发现它除了具有保肝降酶作用外，还具有抗癌、抗艾滋病、拮抗血小板活化因子PAF和抑制醛糖还原酶等多种活性[1]。传统中医学认为其具有敛肺滋肾、生津止渴、宁心安神等作用，现代临床常用于治疗肝炎、肝胆管泥沙样结石、哮喘等疾病。上世纪70年代初期以来，许多临床报告表明，五味子可以降低慢性肝病患者的SGPT，药理试验证明木脂素类物质具有明显生理活性。因此测定五味子药材及制剂中有效成分的含量，不仅可以控制药品的质量，而且又能为临床上按药效物质的量确定给药剂量提供了依据[2]。五味子甲素和五味子乙素是目前研究较为广泛的两种木脂素类成分，同时测定这两种有效成分的含量，可以更加准确地反映木脂素的含量。

五味子化学成分：含有挥发油和木脂素。木脂素成分主要由戈米辛A、B、C、F、G、五味子醇A。戈米辛D、H、当归酰戈米辛H、巴豆酰戈米辛H、苯甲酰戈米辛H、戈米辛J、前戈米辛、二氢愈创木质酸，戈米辛N、O、E、表戈米辛O、五味子素A、戈米辛P、五味子素B等30多种成分[3]。目前五味子甲素和五味子乙素研究较为广泛。

1、总木脂素的测定有

a、比色法五味子粉碎成粉末，加甲醇超声处理，过滤，去滤液，一次加入10%变色酸水溶液、浓硫酸及水，置水浴加热30min，速冷却，与570nm处测吸光度，另取五味子酯甲对照品同法操作，测定，计算总木脂素含量2.7%。

b、二阶导数紫外分光光度法[4]此法采用样品的乙醚提取液，在264nm处测定，此法使干扰组分为零，可不经分离直接测定总木脂素的含量。

C、分光光度法：取制剂、研细，置索氏提取器中，加苯回流提取，蒸去苯，残渣加甲醇溶解并定容，与222nm处测定吸光度，按五味子甲素的吸光度系数为953计算。

2、木脂素单体的测定

a、薄层层析—比色法。

b、薄层层析—紫外分光光度法。

c、薄层扫描法：采用薄层扫描法定量测定了五味子中所含五味子甲素和五味子乙素的含量。样品采用索氏提取法，样品夜点于GF254硅胶板上，用石油醚---乙酸乙酯---甲酸（15:15:1）进行展开，采用220,300双波长反射法锯齿扫描，五味子甲素在0.33~1.65μg，五味子乙素在0.30~1.50μg范围内呈良好线性关系，测得五味子甲素和五味子乙素。

d、HPLC法采用C18柱，以甲醇—水为流动相，检测波长254nm，发现线性较好，方便简便快速，用于五味子及其制剂中五味子甲素与乙素含量的测定。

3制剂及工艺

中国药典及卫生部药品卫生标准共收载含五味子的制剂共300多种。中国已开发的单味药有复方糖浆、颗粒、硬胶囊、片剂、等专门作为保护肝功能、降低谷丙转氨酶的药物。五味子的基础研究比较深入，临床所用中药五味子及其制剂品种较多，但是其中五味子制剂中护肝片是我国用于治疗肝损伤的常用药物，目前所测成分方法也很多，主要有五味子甲素和五味子乙素等为主。护肝片由柴胡、菌陈、板蓝根、五味子、猪胆粉、绿豆6味中药组成，具有疏肝理气、健脾消食、降低转氨酶的作用[5][11]，用于慢性肝炎及早期肝硬化等。护肝片中主要成分五味子[6-7]，五味子为君药，五味子中的木脂素类成分主要有五味子甲素和五味子乙素等有效成分为指标性成分，采用反相高效液相色谱法同时测护肝片制剂中五味子甲素和五味子乙素含量的测定[8--10]。方法简便、快速、专属性强，可用于护肝片质量控制。

HPLC具有分离效能高、分析速度快、选择性高和检查灵敏度高等优点，是质量控制中最为常用的一种分析方法，其中又以RP-HPLC应用最为广泛。综合来看能建立一种能快速同时反应药物整体含量的含量测定方法是十分必要的。中国作为中医药理论的发源地，有着丰富的中药资源和悠久的经验，更应该抓住机遇，加快中药现代化。阐明中药有效成分的含量测定研究至关重要。

^范文提纲：

1仪器与试药

1.1仪器

1.2试药五味子甲素、五味子乙素对照品

2方法与结果

2.1方法

2.1.1色谱条件   

2.1.2对照品溶液制备   

2.1.3供试品溶液的制备    

2.2结果

2.2.1色谱图分析

2.2.2线性关系考察   

2.2.3精密度实验   

2.2.4稳定性实验  

2.2.5重复性实验    

2.2.6回收率实验   

2.2.7样品测定   

3讨论

3.1检测波长的确定

3.2流动相的考察   

3.3提取方法的选择    

4结论

5参考文献

[1]J L Hancke，R A Burgos，S Ahumada. Schisandra  chinensis Baill.[J] Fitoterapia. 1999,70:451.

[2]国家药典委员会编.中国药典I部M].北京：化学工业出版社，2000，474,2010,760.

[3]王炎，王进福等.北五味子种子挥发油的GC-MS分析[J].中国药学杂志，2001,36（2）：91~92.

[4]杨军，袁军，付平.五味子的研究概况[J]西华药学杂志，2003,18（6）:438~440.

[5]杜英峰，袁志芳，王春英，等.高效液相色谱法同时测定护肝片中五味子甲素和五味子乙素的含量[J].药物分析杂志，2004,24（4）：397-399

[6]马育轩，王艳霞，周海纯，王艳丽，李冀五味子现代药理学及临床研究进展-[C]中医学信息2014（1）.

[7]高雁，李廷利五味子有效成分的药理作用研究进展[C]-中医学信息2011（6）.

[8]唐秋竹，王艺纯，孟庆妍，王婷，候静华HPLC法同时测定护肝片中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的含量[c]--中国药品标准2012（4）.

[9]张雪原，林晓辉，张楠涛高效液相色谱法测定护肝片中五味子甲素和乙素的含量[J]-药物分析杂志2004（4）.

[10]宋万志；董玉懿；陈鹭声五味子属植物木脂素资源的研究[J]药物分析杂志.1990（04）

[11]王昌、张东杰、五味子木脂素类成分中护肝片主要活性成分的体外筛选[J]-黑龙江八一农垦大学学报2010（2）.